張世玉+劉漢成+張宏旭

摘 要：目的 探討早期乳腺癌患者血清中血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）的表達(dá)水平與患者前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性。方法 收集我科自2016年9月～2017年6月確診的146例早期乳腺癌患者，術(shù)前清晨均留取外周靜脈血送檢驗(yàn)科，采用ELISA法測定血清VEGF-C水平，分析VEGF-C表達(dá)水平與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)及臨床病理參數(shù)（月經(jīng)狀態(tài)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、血管內(nèi)皮生長因子受體-EGFR）的關(guān)系。結(jié)果 早期乳腺癌患者VEGF-C的分布水平在前哨淋巴結(jié)類別上不同，前哨淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移組高于前哨淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移類別上不同，淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移組高于淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在腫瘤大小類別上，腫瘤大小介于2～5 cm組高于腫瘤<2 cm組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在月經(jīng)狀態(tài)和EGFR表達(dá)類別上相同，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 早期乳腺癌患者血清VEGF-C水平與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)呈正相關(guān)，血清VEGF-C的水平可以被認(rèn)為是早期乳腺癌患者前哨淋巴結(jié)狀態(tài)的預(yù)測生物標(biāo)志物。

關(guān)鍵詞：乳腺腫瘤；血管內(nèi)皮生長因子-C；前哨淋巴結(jié)

中圖分類號：R737.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.02.024

文章編號：1006-1959（2018）02-0071-03

Abstract：Objective To investigate the correlation between the expression of vascular endothelial growth factor -C（VEGF-C）and sentinel lymph node metastasis and clinicopathological characteristics in patients with early breast cancer.Methods A total of 146 patients with early breast cancer diagnosed from September 2016 to June 2017 in our department were collected and their peripheral venous blood was collected in the early morning before operation.Serum VEGF-C was measured by ELISA method.To analyze the relationship between VEGF-C expression and sentinel lymph node metastasis and clinicopathologic parameters（menstrual status，lymph node metastasis，tumor size，vascular endothelial growth factor receptor-EGFR）.Results The distribution of VEGF-C in early breast cancer patients was different in the sentinel lymph node category.The metastasis of sentinel lymph node was higher than that in sentinel lymph node without metastasis，the difference was statistically significant（P<0.05）.In the different types of lymph node metastasis，lymph node metastasis group was higher than lymph node metastasis group，the difference was statistically significant（P<0.05）.In the category of tumor size，tumor size between 2～5 cm were higher than that of tumor <2 cm group，the difference was statistically significant（P<0.05）. In the menstrual status and the expression of EGFR in the same category，there was no statistically significant difference（P>0.05）.Conclusion Early breast cancer patients serum VEGF-C level was positively correlated with sentinel node status lymph node metastasis and lymph，the level of serum VEGF-C can be considered as predictive biomarkers of lymph node status in patients with early breast cancer sentinel.

Key words：Breast tumor；Vascular endothelial growth factor -C；Sentinel lymph node

乳腺癌（breast cancer）是女性最常見的惡性腫瘤之一，在女性最常見惡性腫瘤死亡原因中居第五位[1]。我國乳腺癌發(fā)病率年增幅速度是世界平均水平的2倍，嚴(yán)重威脅女性生命與健康[2]。腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)是評估乳腺癌患者預(yù)后的一項(xiàng)主要因素。為確定腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)，必須通過選擇行前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)（SLNB）或腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)（ALND）來進(jìn)行淋巴結(jié)的組織學(xué)分析，目前ALND逐漸被SLNB所取代。研究發(fā)現(xiàn)[3]，VEGF-C可以作為強(qiáng)有力的促淋巴管生成因子來促進(jìn)腫瘤組織淋巴管的新生，增強(qiáng)淋巴管的通透性，利于腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。本實(shí)驗(yàn)通過研究血清VEGF-C水平以確定其是否可以作為前哨淋巴結(jié)狀態(tài)的一個(gè)預(yù)測因子。endprint

1資料與方法

1.1一般資料 回顧性研究2016年9月～2017年6月于我科確診的146例女性乳腺癌患者，年齡30～79歲，平均年齡（51.84±10.22）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前均無放化療、內(nèi)分泌治療史；②非炎性、哺乳期乳腺癌；③無血小板相關(guān)血液系統(tǒng)疾病病史；④無淋巴系統(tǒng)疾病病史；⑤無其他腫瘤病史；⑥臨床病理資料完整；⑦術(shù)前臨床分期（CTNM）為T1-2N0M0；⑧術(shù)前均完成血清VEGF-C檢測；⑨所有患者均行前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)+乳腺癌改良根治術(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：長期口服抗血小板藥物患者。

1.2方法 入組病例均于入院后24 h內(nèi)術(shù)前清晨空腹抽取外周靜脈血5 ml，血液標(biāo)本靜置2 h后，以3000 r/min離心5 min后取上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA法檢測血清VEGF-C。術(shù)中均應(yīng)用亞甲藍(lán)+吲哚菁綠作為示蹤劑行前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)，并每例成功取得了前哨淋巴結(jié)數(shù)（≥3枚），術(shù)中送冰凍病理，由兩名主任病理醫(yī)師進(jìn)行制作、閱片。以下臨床病理學(xué)特征前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有、無）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有、無）、腫瘤大?。╟m）、EGFR（陰性、陽性）直接從病理報(bào)告中收集，病理取材及制片均由高年資技師完成，病理閱片由副主任病理醫(yī)師以上級別完成，最終病理報(bào)告由主任病理醫(yī)師審核。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0軟件進(jìn)行處理。非正態(tài)分布的計(jì)量資料以P50（P25，P75）表示，計(jì)量資料組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1血清VEGF-C水平與臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性 早期乳腺癌患者VEGF-C的分布水平，在月經(jīng)狀態(tài)和EGFR表達(dá)類別上相同，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。腫瘤大小介于2～5 cm組高于腫瘤<2 cm組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=2.892，P<0.05），見表1。

2.2血清VEGF-C水平與早期乳腺癌患者前哨淋巴結(jié)及腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)的相關(guān)性 VEGF-C分布水平在前哨淋巴結(jié)類別上不同，前哨淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移組高于前哨淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=2.138，P<0.05）。VEGF-C分布水平在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移類別上不同，淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移組高于淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=2.272，P<0.05），見表1。

3討論

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。早期乳腺癌占乳腺癌患者的85%以上，早期乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)對于患者手術(shù)方式的選擇、預(yù)后及術(shù)后輔助治療的選擇具有非常重要的影響[4]。依據(jù)前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)后病理結(jié)果，決定行保留腋窩或不保留腋窩兩種術(shù)式。盡管接受前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)的患者中只有1/3有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，剩下的2/3決定給予何種輔助治療是基于其他已知的預(yù)后因素（年齡、月經(jīng)狀態(tài)、組織學(xué)分級、分子亞型等）。但考慮到患者手術(shù)費(fèi)用，手術(shù)并發(fā)癥及與SLNB技術(shù)相關(guān)的時(shí)間和復(fù)雜性，本實(shí)驗(yàn)研究VEGF-C以確定其是否可以作為前哨淋巴結(jié)狀態(tài)的一個(gè)預(yù)測因子[5]。

近年來綜合各種臨床、解剖和病理變量因素，已開發(fā)了多種列線圖來預(yù)測前哨淋巴結(jié)及腋窩淋巴結(jié)的狀態(tài)，但臨床實(shí)用價(jià)值較低。如依據(jù)腫瘤大小、病理類型、Luminal分型等制作出的多因素Logistic回歸預(yù)測前哨淋巴結(jié)狀態(tài)模型：P=1/1+ExpΣ（5.319-1.038X1-2.724X2-1.841X3-1.687X4-3.113X5-1.418X6），預(yù)測乳腺癌SLN轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確度為79.0%、特異度為87.0%，但公式復(fù)雜、臨床應(yīng)用難度大[6]。因此，探索新的可以預(yù)測前哨淋巴結(jié)狀態(tài)的因子成為了臨床研究的熱點(diǎn)。

VEGF家族主要由VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E及PLGF組成，國外研究已證實(shí)VEGF-C、VEGF-D及受體VEGFR-3在淋巴管生成中的重要性[7]。VEGF-C可通過直接與VEGFR-3結(jié)合和改變淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白的結(jié)構(gòu)兩種方式來促進(jìn)淋巴管的大量生成。Yin J等[8]研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率隨著VEGFR-3陽性表達(dá)脈管的比例增加而增加，提示乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是經(jīng)VEGFR-3陽性表達(dá)脈管形成的。VEGF-C在乳腺癌淋巴擴(kuò)散中的作用已經(jīng)在使用小鼠模型的實(shí)驗(yàn)中建立，其中使用RNAi抗VEGF-C能顯著降低淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)[9]。在結(jié)腸癌小鼠模型中也觀察到在使用RNAi抗VEGF-C后對淋巴擴(kuò)散的抑制[10]。國外也有研究通過對原發(fā)性腫瘤手術(shù)標(biāo)本的免疫組織化學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)VEGF-C的表達(dá)增加與周圍淋巴管毛細(xì)血管密度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，其他實(shí)體瘤的研究已經(jīng)證明了淋巴結(jié)擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)與非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、胃癌和食管癌等腫瘤血清VEGF-C水平的高水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著關(guān)系[11]。在116例診斷為可手術(shù)的非小細(xì)胞肺癌患者的研究中，VEGF-C血清水平低于1850 pg/ml，預(yù)測了縱隔淋巴結(jié)腺癌切除術(shù)組織學(xué)研究中縱隔淋巴結(jié)陰性，特異性為77%。當(dāng)VEGF-C的水平與增強(qiáng)CT的結(jié)果相結(jié)合時(shí)，這種特異性增加到80%[12]。

本研究結(jié)果顯示，早期乳腺癌患者血清VEGF-C水平與前哨淋巴結(jié)及腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)均具有相關(guān)性，轉(zhuǎn)移組均較未轉(zhuǎn)移組血清VEGF-C水平高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。本研究檢查了早期乳腺癌患者群體，接受非常相似的治療，并進(jìn)行前瞻性評估并納入分析。這些特征使我們能夠在收集和儲存標(biāo)本中獲得良好的質(zhì)量用于測定VEGF-C，在進(jìn)行前哨淋巴結(jié)活檢和獲得手術(shù)標(biāo)本的同時(shí)進(jìn)行評估。

綜上所述，VEGF-C血清水平可以被認(rèn)為是早期乳腺癌患者前哨淋巴結(jié)狀態(tài)的預(yù)測生物標(biāo)志物。VEGF-C積極參與了乳腺癌的新生血管及淋巴管的增殖過程，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌的生長和轉(zhuǎn)移，檢測血清VEGF-C水平可以更好的幫助臨床醫(yī)生預(yù)測乳腺癌前哨淋巴結(jié)及腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)，為乳腺癌的早期診斷、制定個(gè)體化的治療方案提供重要依據(jù)。但本研究樣本量較小，且未能劃定可提示前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的VEGF-C的具體參考值范圍，待進(jìn)一步研究。endprint

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收稿日期：2017-7-31；修回日期：2017-8-1

編輯/楊倩endprint