劉嬌 ，劉國(guó)龍 ，郭正晨，張?jiān)粕?/p>

子癇前期是以妊娠20周后初發(fā)高血壓、蛋白尿?yàn)橹饕R床特征的妊娠特異性疾病，影響全世界5%～8%的妊娠女性，是增加孕產(chǎn)婦和圍生兒死亡率的主要因素之一[1]。目前子癇前期的病因及發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，但胎盤與子癇前期的發(fā)病密切相關(guān)[2]。MicroRNAs（miRNAs）是20世紀(jì)90年代早期發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性、短鏈、非編碼RNA，由20～24個(gè)核苷酸組成，通過轉(zhuǎn)錄后抑制或降解mRNA的方式調(diào)控基因表達(dá)[3]。近年來(lái)，在各種疾病發(fā)生機(jī)制的基礎(chǔ)研究中，microRNAs已經(jīng)成為熱門研究方向之一。本文綜述胎盤來(lái)源的microRNAs在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 子癇前期的發(fā)病機(jī)制

子癇前期影響血管的穩(wěn)態(tài)、胎盤及胎兒的發(fā)育，其發(fā)病機(jī)制的假設(shè)主要包括兩個(gè)階段，即妊娠早期胎盤的異常形成、子宮胎盤缺血，隨后進(jìn)展為母體的炎癥反應(yīng)[4]。

1.1 胎盤異常形成 因產(chǎn)后胎盤娩出減輕了子癇前期的臨床癥狀，故胎盤是子癇前期發(fā)病的關(guān)鍵器官。胎盤發(fā)育過程中，滋養(yǎng)層細(xì)胞在絨毛外分化途徑中獲得浸潤(rùn)型的表型，成為絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞，并分化為間質(zhì)絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞（iEVT）及血管內(nèi)滋養(yǎng)層細(xì)胞（enEVT）。妊娠早期，絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入子宮蛻膜及肌層，改建子宮螺旋動(dòng)脈，增加胎盤灌注，是胎盤發(fā)育及胎兒生長(zhǎng)的關(guān)鍵[5]。而間質(zhì)絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入子宮肌層后釋放血管擴(kuò)張因子，如一氧化氮，為血管內(nèi)滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入、附著、改建子宮螺旋動(dòng)脈提供準(zhǔn)備環(huán)境。在子癇前期的患者中，子宮螺旋動(dòng)脈的改建不足，從而導(dǎo)致胎盤灌注不足[6]。

子宮螺旋動(dòng)脈的改建不足可能與如下因素有關(guān)：（1）血管內(nèi)滋養(yǎng)層細(xì)胞上存在特定人類白細(xì)胞抗原與母體免疫系統(tǒng)的自然殺傷細(xì)胞及T細(xì)胞相互作用，從而影響正常的母胎免疫耐受[7]。（2）血管內(nèi)皮的功能障礙，例如，與健康妊娠女性相比，子癇前期患者血液循環(huán)和胎盤組織中可溶性fms樣酪氨酸激酶?1（sFlt?1）和可溶性內(nèi)皮蛋白（sEng）升高[8]。sFlt?1和sEng都是抗血管生成蛋白，其拮抗促血管生成因子，包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）和胎盤生長(zhǎng)因子，從而導(dǎo)致胎盤血管發(fā)育不良[8]。

1.2 母體炎癥反應(yīng) 子癇前期患者胎盤中缺氧誘導(dǎo)因子（HIF）蛋白水平的顯著增加，提示缺氧是子癇前期的高風(fēng)險(xiǎn)因素[9]。胎盤灌注減少及氧化應(yīng)激是刺激細(xì)胞因子、抗血管生成因子和相關(guān)下游細(xì)胞因子釋放的關(guān)鍵。最終在子癇前期患者中觀察到許多器官和系統(tǒng)（包括脈管系統(tǒng)、腎臟、肝臟、腦等）的炎癥反應(yīng)和內(nèi)皮功能障礙[9?10]。

2 胎盤來(lái)源miRNAs與子癇前期發(fā)病機(jī)制的關(guān)系

通過傳統(tǒng)及微陣列的方法進(jìn)行鑒定后提示，子癇前期患者與健康女性的胎盤轉(zhuǎn)錄組之間的差異表達(dá)可能與子癇前期的發(fā)病機(jī)制相關(guān)[11?12]。這種異常表達(dá)的子癇前期胎盤轉(zhuǎn)錄組通常受遺傳及表觀遺傳途徑影響，然而關(guān)于差異表達(dá)的基因組、轉(zhuǎn)錄組如何調(diào)控疾病的發(fā)生發(fā)展目前仍未完全闡明。胎盤來(lái)源的miRNAs全基因組分析已經(jīng)鑒定出了與子癇前期相關(guān)的異常表達(dá)的miRNAs。一些研究也表明miRNAs在調(diào)節(jié)胎盤發(fā)育和功能及子癇前期發(fā)病機(jī)制方面有重要作用。

2.1 miRNA?223X 染色體上存在編碼miRNA?223的高度保守的基因，現(xiàn)有研究已經(jīng)提示這種基因的啟動(dòng)子與造血系統(tǒng)密切相關(guān)，包括調(diào)節(jié)造血細(xì)胞的分化、抑制炎癥反應(yīng)和血小板黏附[13?14]。髓樣細(xì)胞特別是靜止的自然殺傷細(xì)胞高表達(dá)miRNA?223，而細(xì)胞因子激活時(shí)miRNA?223表達(dá)水平降低[15]。妊娠早期自然殺傷細(xì)胞在胎盤中大量存在，其在維持母體對(duì)植入胚胎的免疫耐受中起關(guān)鍵作用[6]。因此妊娠早期胎盤來(lái)源的miRNA?223下調(diào)可能提示自然殺傷細(xì)胞存在異常免疫耐受[16]。

Schjenken 等[17]最近的一項(xiàng)研究表明，敲除miRNA?223后，小鼠的免疫及炎癥相關(guān)基因表達(dá)具有顯著變化，即隨著妊娠進(jìn)展，免疫T細(xì)胞的數(shù)量減少、胎兒與胎盤的質(zhì)量比值逐漸降低。雌性小鼠生殖道與精液接觸后，miRNA?223表達(dá)上調(diào)，相反下調(diào)miRNA?223的表達(dá)則會(huì)對(duì)雌性小鼠的免疫耐受產(chǎn)生不利影響。因此母體暴露于含有異體抗原的精液后，miRNA?223可增加母體的免疫耐受，對(duì)妊娠起到保護(hù)作用。

在血管生成方面，Shi等[18]的一項(xiàng)研究表明，miRNA?223可能在維持內(nèi)皮細(xì)胞的靜止?fàn)顟B(tài)起到一定作用，下調(diào)的miRNA?223靶向增加β1?整聯(lián)蛋白的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)血管生成。缺血缺氧應(yīng)激可通過HIF蛋白靶向調(diào)節(jié)miRNA?223的上游啟動(dòng)因子C/EBP?α，從而使miRNA?223減少[19]。因此，子癇前期中低表達(dá)的miRNA?223可能是激活內(nèi)皮功能、增加血管生成的代償機(jī)制。

在白細(xì)胞介素（IL）?6/miRNA?223/STAT3細(xì)胞通路中的研究提示下調(diào)miRNA?223的表達(dá)可靶向激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3），該過程伴隨促炎癥細(xì)胞因子IL?6的產(chǎn)生并且發(fā)現(xiàn)IL?6是誘導(dǎo)miR?223表達(dá)降低的主要因子[20]，其次增加IL?6，miRNA?223靶向減少，可導(dǎo)致血管功能障礙并促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，進(jìn)而對(duì)細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞侵潤(rùn)蛻膜及子宮肌層產(chǎn)生不利影響[21]。免疫組化進(jìn)一步驗(yàn)證子癇前期患者蛻膜及滋養(yǎng)層細(xì)胞高表達(dá)IL?6[21]，因此在子癇前期發(fā)病機(jī)制中，miRNA?223可作為生物學(xué)標(biāo)志，進(jìn)而成為新的研究靶點(diǎn)。

2.2 miRNA?126 血管生成相關(guān)的miRNAs中，miRNA?126最具有代表性。Wang等[22]的一項(xiàng)研究提示，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中miRNA?126高度表達(dá)，并通過絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）途徑上調(diào)VEGF和成纖維細(xì)胞生成因子從而促進(jìn)血管生成。另一項(xiàng)研究提示，因血流可以激活鋅指轉(zhuǎn)錄因子（KLF2A）從而誘導(dǎo)miRNA?126的表達(dá)，故子癇前期患者可以導(dǎo)致miRNA?126的表達(dá)下調(diào)，且下調(diào)的程度與子癇前期胎盤缺血的程度呈正相關(guān)[23]。并且Yan等[23]的研究提示，子癇前期中血管生成因子的不平衡，包括促血管生成因子VEGF?A的降低，伴隨缺氧程度的增加，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量的減少以及與其相關(guān)的miRNA?126的表達(dá)減少。Hong等[24]采用qRT?PCR方法在115例子癇前期患者的胎盤組織中也發(fā)現(xiàn)miRNA?126低表達(dá)，并且與VEGF的mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)。

對(duì)miRNA?126/PIK3R2/PI3K/AKT細(xì)胞通路的研究提示，miRNA?126的3′UTR靶向調(diào)節(jié)PIK3R2，而PIK3R2又是VEGF通路的重要組成部分，激活miRNA?126后，PIK3R2的表達(dá)降低，PI3K和AKT的mRNA和蛋白水平均升高[23]，進(jìn)一步說明miRNA?126作為生物學(xué)標(biāo)志在促血管生成、抗凋亡機(jī)制中的重要作用，提示在子癇前期發(fā)病機(jī)制中具有潛在的生物學(xué)作用。

2.3 miRNA?218 缺氧相關(guān)的miRNAs中，F(xiàn)ang等[25]研究了miRNA?218在子癇前期中的作用機(jī)制，結(jié)果顯示子癇前期患者胎盤組織與正常對(duì)照組比較，miRNA?218及其宿主基因SLIT2、SLIT3表達(dá)升高；體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提示，在HTR?8/SVneo絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞系中，缺氧可誘導(dǎo)miRNA?218高表達(dá)，HIF?1α基因敲除后miRNA?218表達(dá)下調(diào)，染色質(zhì)免疫沉淀分析提示HIF?1α可與SLIT2、SLIT3的啟動(dòng)子直接結(jié)合。因此，miRNA?218、SLIT2、SLIT3的表達(dá)均與缺氧環(huán)境下HIF?1α的表達(dá)相關(guān)。且LASP1基因?yàn)閙iRNA?218的靶基因之一，過表達(dá)miRNA?218可抑制LASP1mRNA及蛋白水平的表達(dá)，F(xiàn)ang等[25]采用熒光素酶報(bào)告基因?qū)Π谢蜻M(jìn)行了驗(yàn)證，缺氧環(huán)境下誘導(dǎo)的miRNA?218上調(diào)并靶向抑制LASP1來(lái)抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的浸潤(rùn)，可能最終誘導(dǎo)子癇前期的發(fā)病。

2.4 miRNA?517 Anton等[26]的一項(xiàng)研究中提示，缺氧相關(guān)的microRNA?517在子癇前期的胎盤組織中高表達(dá)，體外研究中提示，原代絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞模擬缺氧條件后誘導(dǎo)microRNA?517表達(dá)，且通過增加sFLT1的表達(dá)導(dǎo)致滋養(yǎng)層細(xì)胞侵潤(rùn)減少，有助于解釋子癇前期發(fā)生發(fā)展。

2.5 miRNA?125b Yang等[27]的研究提示，炎癥相關(guān)的miRNA?125b在子癇前期的胎盤組織和血清中表達(dá)上調(diào)；鞘氨酸醇?1?磷酸裂解酶?1（SGPL1）為miRNA?125b的靶基因之一，過表達(dá)miRNA?125b后，抑制SGPL1的表達(dá)；miRNA?125b在下調(diào)SGPL1表達(dá)的同時(shí)增強(qiáng)了IL?8的產(chǎn)生，該效應(yīng)可以通過SGPL1過表達(dá)來(lái)逆轉(zhuǎn)。因此miRNA?125b可增加子癇前期中IL?8的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)母體的炎癥反應(yīng)。

2.6 miRNA?210 Kopriva 等[28]的一項(xiàng)研究中提示，子癇前期患者胎盤中miRNA?210高表達(dá)與炎癥因素相關(guān)，而炎癥的出現(xiàn)提示與TLR3的過度激活相關(guān)[29]。子癇前期患者TLR3處于激活狀態(tài)[30]，并通過激活HIF?1α和NF?κBp50，誘導(dǎo)miRNA?210的上調(diào)，進(jìn)一步下調(diào)靶基因信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6（STAT6）。因此miRNA?210可能在炎癥方面誘導(dǎo)子癇前期的發(fā)病。

3 總結(jié)與展望

子癇前期是一種多因素造成的妊娠期特有疾病，miRNAs作為生物學(xué)標(biāo)志在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的作用尚在研究的起始階段。目前研究提示，胎盤中異常表達(dá)的miRNAs可能通過不同的細(xì)胞通路、作用方式在母胎免疫、血管生成、缺氧、炎癥等方面參與子癇前期的發(fā)生發(fā)展過程。隨著研究的深入，子癇前期中胎盤來(lái)源的miRNAs可能會(huì)作為輔助診斷、治療及孕期管理的標(biāo)志物之一。