關(guān) 健 薛 偉 丁羅賓 謝 磊 楊秋軍 李 鋒

(石家莊市第三醫(yī)院關(guān)節(jié)外科，河北 石家莊 050000)

據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計，骨關(guān)節(jié)炎(OA)在老年人發(fā)病率最高，女性高于男性，絕經(jīng)后婦女發(fā)病率更高，發(fā)病率隨著增齡而升高〔1〕，60歲以上人群中OA患者約50%，75歲以上人群發(fā)病率高達80%，隨著人口老齡化，至2025年OA發(fā)病率可增加40%〔2〕。OA患者發(fā)病率升高迫切需要早期且準確的診斷該疾病。近年來，生物標志物(BM)被用來檢測潛在的退變性或炎癥性關(guān)節(jié)疾病〔3〕。其中，瘦素(Leptin) 是源于脂肪細胞合成并分泌的細胞因子類激素，屬于細胞炎癥網(wǎng)絡中的一分子，由167 個氨基酸組成的蛋白質(zhì)〔4，5〕。有報道〔6〕顯示，在OA 患者關(guān)節(jié)軟骨及關(guān)節(jié)滑膜中均發(fā)現(xiàn)存在瘦素受體，且隨著損傷程度加重所表達的受體逐漸增多，但在健康人群中瘦素受體表達較低。但目前對關(guān)節(jié)液中瘦素濃度與OA癥狀嚴重程度相關(guān)性研究較少。本研究旨在探討膝骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)滑液中瘦素水平與關(guān)節(jié)病變程度和X線K-L分級間的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1臨床資料 選擇2015年12月至2016年12月在骨關(guān)節(jié)門診就診膝骨性關(guān)節(jié)炎患者140例(男52例，女88例)，根據(jù)X線Kellgren-Lawrence(K-L)分級標準：Ⅰ級：關(guān)節(jié)軟骨存在輕微骨贅；Ⅱ級：關(guān)節(jié)軟骨存在明顯的骨贅，關(guān)節(jié)間隙輕度變窄；Ⅲ級：關(guān)節(jié)軟骨關(guān)節(jié)間隙中度變窄，軟骨下骨出現(xiàn)硬化；Ⅳ級：關(guān)節(jié)軟骨關(guān)節(jié)出現(xiàn)大量骨贅，關(guān)節(jié)間隙嚴重變窄，軟骨下骨硬化及畸形明顯。其中Ⅱ級43例、Ⅲ級56例、Ⅳ級41例。3組患者年齡、性別、BMI指數(shù)經(jīng)統(tǒng)計學比較差異無意義(P>0.05)。見表1。

1.1.1診斷標準 美國風濕病學會判斷OA的臨床標準〔7〕：①1 個月來大多數(shù)時間發(fā)生膝痛；②關(guān)節(jié)活動時有響聲；③晨僵<30 min；④年齡≥50 歲；⑤有骨性膨大?；颊邼M足前4 項，或滿足①②⑤、①④⑤即可診斷為OA。

1.1.2納入標準 ①符合美國風濕病學會診斷標準；②簽字同意并配合相關(guān)治療；③本院倫理委員會批準同意。

1.1.3排除標準 患者有膝關(guān)節(jié)外傷史、手術(shù)史；類風濕關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、膝關(guān)節(jié)腫瘤結(jié)核、嚴重骨質(zhì)疏松等；凝血障礙或使用抗凝藥物者；存在嚴重內(nèi)科疾病者；治療過程中不配合或病情出現(xiàn)變化者。

1.1.4一般資料及相關(guān)檢查 專一人員負責體重、身高測量，每一個患者重復測量3次，并取平均值。 對患者行患膝正側(cè)位X線片檢查、抽血檢查。

1.2評價指標 體質(zhì)指數(shù)(BMI)、OA X線KL分級標準、西安大略和麥馬斯特大學骨性關(guān)節(jié)炎指數(shù)(WOMAC)。

1.3指標評估 專一研究人員對患者根據(jù)WOMAC進行評分，包括疼痛評分、肢體功能評分、關(guān)節(jié)僵硬評分、總體WOMAC評分。并對膝骨關(guān)節(jié)炎患者治療前行關(guān)節(jié)液取液，并進行相關(guān)治療，患者患膝的X線片由至少2名影像學專家根據(jù)KL分級標準進行分級。

1.4瘦素的檢測 所有膝骨關(guān)節(jié)炎患者在進行相關(guān)治療前穿刺抽取關(guān)節(jié)滑液，操作過程嚴格無菌，取液后離心去除關(guān)節(jié)液內(nèi)細胞和碎屑，-80℃保存。實驗設立標準管、樣品管、對照管。采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測關(guān)節(jié)液中瘦素水平，瘦素 ELISA試劑盒購自Metra Biosystems公司。按ELISA試劑盒說明進行操作，每個樣本重復檢測3次，取其平均值。根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再依據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應瘦素的含量。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0軟件行秩和檢驗，對相關(guān)性行秩相關(guān)系數(shù)檢驗和多元線性回歸分析。

2 結(jié) 果

2.13組WOMAC評分及瘦素水平比較 3組患者WOMAC疼痛評分、肢體功能評分、WOMAC總分比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，關(guān)節(jié)僵硬評分差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，3組患者關(guān)節(jié)液瘦素水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2關(guān)節(jié)液中瘦素水平與WOMAC評分的相關(guān)性 所有患者關(guān)節(jié)液瘦素水平與WOMAC疼痛評分、WOMAC肢體功能評分、WOMAC總評分呈正相關(guān)(r=0.499，0.379，0.413，P=0.001，0.026，0.015)；與WOMAC關(guān)節(jié)僵硬評分無明顯相關(guān)性(r=0.089，P=0.141)。見圖1。對關(guān)節(jié)液中瘦素水平與WOMAC評分進一步行回歸分析，二者在統(tǒng)計學上仍然存在相關(guān)性。見表2。

2.3瘦素與X線K-L分級的相關(guān)性 膝骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液瘦素水平越高，K-L分級顯示其OA越嚴重(r=0.550，P<0.001)，見圖2。

表1 3組一般資料比較〔M(P25，P75)〕

與Ⅱ級比較：1)P<0.05

WOMACPβP值WOMACFβP值WOMACTβP值年齡-0.0800.350-0.0440.599-0.0440.615BMI0.1300.1210.1090.1400.1060.146性別0.0790.3250.0590.5630.0730.299關(guān)節(jié)液瘦素1.4290.0011.2600.0011.3010.001

WOMAC P/F/T= WOMAC疼痛/肢體功能/總評分

圖2 OA患者關(guān)節(jié)液瘦素水平與X線K-L分級的相關(guān)性

3 討 論

OA是關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨進展性損害，原發(fā)性或者繼發(fā)性的滑膜反應為標志的一種慢性疾病〔8，9〕。約80%的OA患者存在不同程度運動障礙，25%的OA患者日常生活受到影響，疾病晚期出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大，持續(xù)性疼痛，嚴重者可致殘。目前的治療方法包括早期的保守治療和晚期的人工關(guān)節(jié)置換手術(shù)，手術(shù)治療有效，但費用昂貴，同時可能出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥。因此，如何更有效地早期診斷及預防，制定相應控制病情發(fā)展的治療方案，具有重要意義。但臨床研究發(fā)現(xiàn)〔10～12〕，在早期OA患者關(guān)節(jié)和軟骨出現(xiàn)損傷時，其影像學征象無明顯改變，當出現(xiàn)關(guān)節(jié)狹窄或者骨贅等表現(xiàn)時，多數(shù)已是OA 的晚期階段。由此可見OA的影像學改變比組織生物學的改變要晚，在患者出現(xiàn)影像學改變時，關(guān)節(jié)的正常功能以及患者的生活質(zhì)量已經(jīng)受到嚴重影響。在臨床上，目前仍缺乏具有敏感性及特異性的方法來監(jiān)測關(guān)節(jié)軟骨的變化。隨著分子生物學的發(fā)展，許多研究者都在尋找用于臨床評價OA 的BM，及時反映關(guān)節(jié)軟骨早期退變等有關(guān)病理變化，因此研究關(guān)節(jié)液中的BM以反映關(guān)節(jié)軟骨病變，在臨床上具有重要意義。

瘦素廣泛存在于體內(nèi)的各種組織中，在關(guān)節(jié)軟骨及關(guān)節(jié)滑膜中均發(fā)現(xiàn)存在瘦素受體。有學者〔13〕研究發(fā)現(xiàn)在OA患者的關(guān)節(jié)軟骨中表達的OB-R 比正常人群高，并且一定濃度的瘦素能促進軟骨細胞中的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-3、MMP-9 等的合成，致軟骨損傷并誘發(fā)骨質(zhì)增生，進一步導致骨性關(guān)節(jié)炎。有研究〔14〕發(fā)現(xiàn)在進展期的OA 關(guān)節(jié)軟骨及滑液中瘦素及瘦素受體的表達水平顯著增加。瘦素水平升高與能夠反映關(guān)節(jié)軟骨降解破壞和滑膜炎癥程度，有助于OA的早期診斷。

本研究表明OA患者關(guān)節(jié)液中瘦素水平與患者肢體疼痛、肢體功能受損程度呈正相關(guān)。同時還發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)液瘦素水平與骨關(guān)節(jié)炎影像學K-L分級程度呈正相關(guān)，關(guān)節(jié)液中瘦素水平越高，K-L分級顯示其OA患者關(guān)節(jié)損傷程度越明顯。這提示關(guān)節(jié)液中瘦素水平能反映關(guān)節(jié)損傷病變程度。

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