陳蕊肖 王立新 王慶海

(河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院心內(nèi)三科，河北 滄州 061001)

芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響

陳蕊肖 王立新1王慶海2

(河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院心內(nèi)三科，河北 滄州 061001)

目的觀察芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響，探討其防治冠心病的相關(guān)機(jī)制。方法將60只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組，正常對照組15只，造模組45只。造模組采用喂食高脂飼料聯(lián)合垂體后葉注射液腹腔注射的方法制備冠心病大鼠模型，造模后造模組剩余40只大鼠隨機(jī)分為模型對照組，芪參還五膠囊低、中、高劑量組，每組各10只，另設(shè)正常對照組10只。芪參還五膠囊低、中、高劑量組分別予芪參還五膠囊0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)灌胃給藥，正常對照組及模型對照組分別予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg灌胃，均每日1次，共4周。采用全自動生化分析儀檢測5組大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及脂蛋白(a)[LP(a)]水平。結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組及芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。與模型對照組相比，芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊低劑量組相比，芪參還五膠囊中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊中劑量組相比，芪參還五膠囊高劑量組TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均無明顯變化(P>0.05)。結(jié)論芪參還五膠囊可調(diào)節(jié)冠心病大鼠脂質(zhì)代謝，有利于冠心病的防治。

冠心?。患膊∧Ｐ?，動物；動物，實(shí)驗(yàn)；中藥療法；降血脂藥(中藥)

冠心病是指冠狀動脈粥樣硬化和(或)冠狀動脈功能性改變(痙攣)造成冠狀動脈管腔狹窄或阻塞，使心肌缺血、缺氧、壞死進(jìn)而引發(fā)的心臟病。冠心病是多病因性疾病，其公認(rèn)的危險(xiǎn)因素有性別、年齡、心血管病早發(fā)家族史、吸煙、高血壓、血脂異常、糖尿病、肥胖、缺少體力活動等。脂質(zhì)代謝異常是動脈粥樣硬化最重要的危險(xiǎn)因素，大量臨床研究及動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平升高以及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平降低是冠心病的主要危險(xiǎn)因素，而包括甘油三酯(TG)、脂蛋白(a)[LP(a)]水平升高在內(nèi)的其他類型血脂異常與冠心病的發(fā)生也有一定關(guān)聯(lián)[1-5]。芪參還五膠囊為河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院院內(nèi)制劑，以傳統(tǒng)中藥方劑“補(bǔ)陽還五湯”為基礎(chǔ)方加減而成。臨床及基礎(chǔ)研究表明，芪參還五膠囊能夠改善非癡呆型血管性認(rèn)知功能障礙患者的認(rèn)知功能，并能調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝；促進(jìn)周圍神經(jīng)修復(fù)和再生；有效抑制急性腦梗死患者病變區(qū)的炎癥反應(yīng)，減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷，對神經(jīng)功能的恢復(fù)有促進(jìn)作用[6-8]。但對于芪參還五膠囊是否具有通過調(diào)節(jié)血脂代謝而防治冠心病的作用，目前尚未清楚。本實(shí)驗(yàn)觀察芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響，進(jìn)一步探討芪參還五膠囊防治冠心病的相關(guān)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物 60只清潔級健康雄性SD大鼠，體質(zhì)量(200±20)g，由斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司提供，動物合格證號11401500012397，許可證號：SCXK(京)2016-0002。

1.1.2 動物飼料 普通大鼠維持飼料，由北京安貞醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。高脂飼料，由北京華阜康生物科技股份有限公司調(diào)配，其中3%為膽固醇、0.5%為膽酸鈉、0.2%為丙基硫氧嘧啶、5%為白糖、10%為豬油、81.3%為基礎(chǔ)飼料。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)藥物 芪參還五膠囊：由黃芪、太子參、桃仁、紅花、當(dāng)歸、赤芍、川芎、膽南星、清半夏、玄參、石決明、鉤藤、麥冬、牛膝、大黃、連翹、全蝎、地龍、水蛭共19味中藥組方而成。由河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院中藥制劑室配制，冀藥制字Z20050798，批號030310。垂體后葉注射液：南京新百藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H32026638，批號160302，規(guī)格1 mL：6單位/支。

1.1.4 主要儀器 福州華志科學(xué)儀器有限公司電子天平PTZ-224，海爾(Haier)BCD-242BF冰箱，德國Hettich MIKRO220離心機(jī)，日本日立7600-010全自動生化分析儀，德國eppendorf移液器，日本奧林巴斯BX51T-PHD-J11光學(xué)顯微鏡及其照相裝置，常州市郝思琳醫(yī)用儀器有限公司TEC-2500病理組織漂烘儀，德國萊卡RM2015石蠟切片機(jī)。

1.1.5 實(shí)驗(yàn)條件 本實(shí)驗(yàn)于北京安貞醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心進(jìn)行，室溫23～27 ℃，濕度44%～51%，通風(fēng)，分籠飼養(yǎng)(3～4只/籠)，動物飲水由北京安貞醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 分組及造模方法 先將60只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為2個實(shí)驗(yàn)組，正常對照組15只，造模組45只。造模組采取喂食高脂飼料聯(lián)合垂體后葉注射液腹腔注射的方法制備冠心病大鼠模型。即造模組大鼠每日喂食高脂飼料，自由飲水，共計(jì)8周，最后3 d予垂體后葉注射液30單位/(kg·d)腹腔注射。正常對照組大鼠喂食普通飼料，自由飲水。8周后，2組分別取5只大鼠，取其心臟及冠脈組織，觀察正常對照組與造模組大鼠冠脈及心肌病理變化，確認(rèn)造模是否成功。造模成功的標(biāo)準(zhǔn)[9]：①一般情況：小鼠體質(zhì)量減輕，活動和飲食減少，反應(yīng)遲鈍，毛色暗淡無光澤，爪趾和口唇發(fā)紺。②冠脈及心肌病理改變：冠脈內(nèi)膜損傷，內(nèi)皮細(xì)胞排列紊亂，管壁脂質(zhì)沉積，管腔縮窄；心肌細(xì)胞腫脹、排列紊亂，心肌間質(zhì)纖維化，部分區(qū)域可見顯著的局灶性壞死，細(xì)胞核萎縮。結(jié)果造模組大鼠均造模成功(給藥結(jié)束后病理觀察均證實(shí))。造模后將造模組剩余40只大鼠隨機(jī)分為4組，即模型對照組、芪參還五膠囊低劑量組、芪參還五膠囊中劑量組及芪參還五膠囊高劑量組，每組各10只。正常對照組5只大鼠冠脈及心肌病理正常，剩余10只進(jìn)行下一步研究。

1.2.2 給藥方法 芪參還五膠囊成人給藥劑量為2.4 g/d，根據(jù)成人(60 kg)和大鼠按照體表面積折算的等效劑量比值換算出大鼠給藥劑量為0.25 g/(kg·d)，定為中劑量給藥量，按1∶2∶4比例計(jì)算出芪參還五膠囊低、中、高劑量組給藥量分別為0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)。按照以上劑量，將藥物溶于0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg中按照分組分別對應(yīng)灌胃給藥。正常對照組及模型對照組予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg灌胃。均每日1次，共4周。實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠自由飲水，普通飼料喂養(yǎng)，每周定時稱體質(zhì)量，并依據(jù)體質(zhì)量的變化調(diào)整用藥劑量。

1.2.3 觀察指標(biāo) 各組大鼠末次灌胃后，禁食、水12 h，空腹測體質(zhì)量，予水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔推注麻醉。麻醉成功后仰臥位固定，沿腹正中線剪開皮膚，暴露腹主動脈，取血4 mL，置于分離膠試管，3 500 r/min，離心15 min，取血清以全自動生化分析儀檢測TC、LDL-C、HDL-C、TG、LP(a)水平。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠死亡情況 灌胃過程中，正常對照組及芪參還五膠囊高、低劑量組均無大鼠死亡，模型對照組及芪參還五膠囊中劑量組各死亡1只。

2.2 5組大鼠血脂水平比較 見表1。

表1 5組大鼠血脂水平比較

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型對照組比較，△P<0.05；與芪參還五膠囊低劑量組比較，#P<0.05；與芪參還五膠囊中劑量組比較，☆P<0.05

由表1可見，與正常對照組相比，模型對照組及芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。與模型對照組相比，芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊低劑量組相比，芪參還五膠囊中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊中劑量組相比，芪參還五膠囊高劑量組TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均無明顯變化(P>0.05)。

3 討 論

近年來，我國心血管疾病的發(fā)病率和死亡率逐年增高，2013年較2009年我國冠心病死亡人數(shù)增加了90.9%[10-11]。近年來發(fā)現(xiàn)的冠心病新的危險(xiǎn)因素包括超敏C反應(yīng)蛋白、高同型半胱氨酸血癥、高尿酸、高內(nèi)脂素及心理因素等[12]。血脂代謝紊亂是冠心病主要的危險(xiǎn)因素[13]，與冠心病的發(fā)病關(guān)系密切。王薇等[1]通過前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，在急性冠心病發(fā)病人群中，11.7%歸因于血清TC水平升高；TC≥7.28 mmol/L(280 mg/dL)的人群急性冠心病事件發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)比TC<3.64 mmol/L(140 mg/dL)的人群增加1.63倍。Koba等[2]通過多元Logistic回歸分析顯示，小而密低密度脂蛋白膽固醇(sd-LDL-C)與嚴(yán)重冠心病密切相關(guān)，且這種相關(guān)性獨(dú)立于LDL-C水平，對嚴(yán)重穩(wěn)定型冠心病的預(yù)測價(jià)值高于LDL-C水平。動脈粥樣硬化的形成起始于內(nèi)皮損傷，而脂質(zhì)代謝紊亂及其在血管內(nèi)皮的沉積在動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展中具有重要的作用。在長期高脂血癥的情況下，氧自由生成增多，使脂質(zhì)過氧化進(jìn)而促使氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)含量增多，一氧化氮(NO)合成受到抑制，內(nèi)皮素-1(ET-1)分泌增加，血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損。HDL能通過膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，把外周組織及血管壁中的膽固醇轉(zhuǎn)移到肝臟，經(jīng)肝臟分解代謝排出體外，使血管壁中聚積的膽固醇減少，從而抗動脈粥樣硬化的發(fā)生、進(jìn)展。血清TG水平與冠心病發(fā)病有一定關(guān)聯(lián)，但是否為冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素尚需進(jìn)一步探討[14-16]。LP(a)水平升高使冠心病患病風(fēng)險(xiǎn)增加[17-19]。雖然LP(a)的生理功能目前尚不十分清楚，但目前一些研究表明LP(a)能夠促進(jìn)急性炎癥的發(fā)生以及泡沫細(xì)胞的形成，這可能與其促進(jìn)氧化修飾及抗纖維蛋白溶解的作用有關(guān)[20]。

本實(shí)驗(yàn)采用喂食高脂飼料聯(lián)合腹腔注射垂體后葉注射液的方法制備冠心病大鼠模型。喂食高脂飼料使大鼠出現(xiàn)脂質(zhì)代謝紊亂，進(jìn)而出現(xiàn)動脈粥樣硬化，然后注射垂體后葉注射液誘發(fā)心肌缺血。該制備方法接近臨床上冠心病的病理生理學(xué)改變，造模成功率高，操作簡單，管理方便，大鼠創(chuàng)傷小、病死率低，但造模時間長、缺血程度難統(tǒng)一是其局限性。本研究顯示，與正常對照組相比，模型對照組大鼠TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。而采用芪參還五膠囊干預(yù)后，TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，且芪參還五膠囊中、高劑量組的調(diào)脂效果優(yōu)于芪參還五膠囊低劑量組(P<0.05)，芪參還五膠囊中劑量組與芪參還五膠囊高劑量組組間比較顯示，TC、LDL-C、HDL-C水平無明顯差異(P>0.05)，故臨床上推薦以中劑量作為治療劑量。芪參還五膠囊無明顯降低LP(a)的作用。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，冠心病屬于中醫(yī)學(xué)胸痹、心痛等范疇，其基本病理變化為本虛標(biāo)實(shí)，本虛主要為氣血虧虛，標(biāo)實(shí)主要為痰濁血瘀。芪參還五膠囊以“補(bǔ)陽還五湯”為基礎(chǔ)方加太子參、膽南星、清半夏、玄參、石決明、鉤藤、麥冬、牛膝、大黃、連翹、全蝎、水蛭而成，具有益氣活血、化瘀通絡(luò)、熄風(fēng)化痰、清熱養(yǎng)陰之效，主要用于冠心病、腦梗死、高脂血癥等證屬氣虛血瘀、痰熱蘊(yùn)結(jié)者，證見胸悶、胸痛、憋氣、頭暈、頭痛、半身不遂、氣短乏力等。其中黃芪、太子參為君藥，意在使氣推血行，化瘀通絡(luò)；當(dāng)歸補(bǔ)血活血，通經(jīng)活絡(luò)，為臣藥；桃仁、紅花、赤芍、川芎、牛膝協(xié)同當(dāng)歸以活血祛瘀；膽南星、清半夏、石決明、鉤藤熄風(fēng)化痰；玄參、麥冬、大黃、連翹合用可清熱養(yǎng)陰；全蝎、地龍、水蛭活血通絡(luò)，善行專走，通行全身，以助藥力，為佐藥?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃芪具有強(qiáng)心、改善心肌代謝的作用，亦可以擴(kuò)張冠脈血管，增加心肌供血；緩解高游離脂肪酸對血管內(nèi)皮功能的損傷，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞；調(diào)節(jié)小鼠血脂代謝，增強(qiáng)機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化的作用[21-22]。太子參含有皂甙、多糖、環(huán)肽、氨基酸、磷脂、微量元素等多種活性物質(zhì)，能夠降低血脂、血糖，且具有清除氧自由基、保護(hù)細(xì)胞內(nèi)膜、改善心肌代謝等作用[23]。當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花均具有擴(kuò)張冠脈、抗凝、抗血小板聚集及降低心肌耗氧量的作用[24]。牛膝總皂苷對心肌缺血大鼠具有擴(kuò)張血管、抗血小板聚集、抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、保護(hù)血管內(nèi)皮的作用[25]。地龍含有蚓激酶、蚓膠原酶、地龍纖維蛋白溶解酶、地龍溶栓酶、游離氨基酸等活性成分，全蝎的活性成分包括蝎毒、三甲胺、核苷類等，水蛭含有水蛭素、肝素、組織胺、氨基酸、吻蛭素等成分，全蝎、地龍、水蛭三種藥物均具有抗凝、抗血小板聚集、溶栓的作用[26-28]。

綜上所述，芪參還五膠囊具有通過調(diào)節(jié)血脂代謝防治冠心病的作用。但由于冠心病是多病因性疾病，芪參還五膠囊的組成藥物較多，作用機(jī)制復(fù)雜，對于其防治冠心病的作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

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EffectofQishen-huanwucapsuleonserumlipidlevelinratswithcoronaryheartdisease

CHENRuixiao*,WANGLixin,WANGQinghai.*

ThirdDepartmentofCardiology,CangzhouHospitalofIntegrativeChineseandWesternMedicineinHebeiprovince,Hebei,Cangzhou061001

ObjectiveTo observe the effects of Qishen-huanwu capsule on the level of serum lipid in rats with coronary heart disease (CHD), and explore its mechanism of prevention and treatment of CHD.Methods60 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups, 15 rats in the normal control group and 45 ratsin the model group.The model group was treated by high fat diet and intraperitoneal injection of Pituitrin to establish the rat model of CHD, and then the model rats were randomly divided into model control group, the low, middle and high dose of Qishen-huanwu capsule groups,10 rats in each group，another 10 rats were selected as the normal control group.The low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group were respectively given Qishen-huanwu capsule by 0.125 g/(kg·d), 0.25 g/(kg·d) and 0.5 g/(kg·d). The normal control group and model control group were given 0.9% sodium chloride injection gavage by 10 mL/kg, once a day for 4 weeks. The levels of total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and Lipoprotein alpha [LP(a)] were detected by the automatic biochemical analyzer.ResultsCompared with the normal control group, the levels of TC, LDL-C, TG and LP(a) increased in the model control group, the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C reduced (P<0.05). Compared with the model control group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C increased (P<0.05), the LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the low dose of Qishen-huanwu capsule group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the middle and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the levels of HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the middle dose of Qishen-huanwu capsule group, the level of TG reduced (P<0.05), the levels of TC, LDL-C, HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P<0.05).ConclusionQishen- huanwu capsule can regulate lipid metabolism of rats, and it is conducive to the prevention and treatment of CHD.

Coronary heart disease; Disease models; Animal; Experiment; Traditional Chinese medicine therapy; Hypolipidemic drugs (traditional Chinese medicine)

10.3969/j.issn.1002-2619.2017.12.022

R541.4；R285.5；R972.6

A

1002-2619(2017)12-1857-05

1 河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院政務(wù)部，河北 滄州 061001

2 河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院科教部，河北 滄州 061001

陳蕊肖(1990—)，女，醫(yī)師，碩士。從事心內(nèi)科臨床診療工作。研究方向：心血管病。

2017-09-04)

曹志娟)