胥丹妮，靳贏，王越，宋利明，林曉萍

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院口腔科，沈陽(yáng) 110004）

肥胖伴牙周炎患者齦溝液及血清中脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的表達(dá)

胥丹妮，靳贏，王越，宋利明，林曉萍

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院口腔科，沈陽(yáng) 110004）

目的檢測(cè)肥胖伴牙周炎患者齦溝液及血清中脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的表達(dá)水平。方法本研究共納入80例我科就診患者，分為4組。其中對(duì)照組20例 （H組） 、牙周炎組20例 （CP組） 、肥胖組20例 （OB組） 、肥胖伴牙周炎組20例 （OB+CP組） ；記錄患者的一般信息和臨床指標(biāo)；收集齦溝液及靜脈血清樣本，采用ELISA法測(cè)定齦溝液及血清中脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的表達(dá)水平；利用SPSS 17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果CP組、OB組及OB+CP組血清中脂聯(lián)素的濃度低于H組 （P ＜ 0.05） 。OB+CP組血清中脂聯(lián)素的濃度低于CP組及OB組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及H組齦溝液中脂聯(lián)素的濃度高于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及H組血清中內(nèi)脂素的濃度低于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。結(jié)論肥胖可能通過(guò)抑制脂聯(lián)素表達(dá)、促進(jìn)內(nèi)脂素的表達(dá)加重牙周組織的破壞。

肥胖； 牙周炎； 脂聯(lián)素； 內(nèi)脂素

牙周炎是由多種因素引起的牙周組織的慢性炎癥反應(yīng)，它主要侵犯牙齦和牙槽骨等牙周支持組織，是牙齒缺失的重要原因之一［1］。肥胖作為全球范圍內(nèi)的流行病，與某些系統(tǒng)性疾病密切相關(guān)［2］。近年來(lái)，大量的研究［3］表明，肥胖和牙周炎具有相關(guān)性。脂聯(lián)素是所有脂肪因子中唯一呈負(fù)性調(diào)節(jié)的激素，具有抗炎、促進(jìn)葡萄糖的吸收、增加胰島素的敏感性等作用。內(nèi)脂素具有促炎、調(diào)節(jié)胰島素的敏感性等作用［4］，但有關(guān)脂聯(lián)素和內(nèi)脂素對(duì)牙周炎的影響報(bào)道較少。本研究通過(guò)檢測(cè)脂聯(lián)素與內(nèi)脂素在患者齦溝液及血清中的表達(dá)，探討肥胖作為危險(xiǎn)因素對(duì)牙周炎的影響，進(jìn)而為牙周炎的防治提供更多的客觀理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年1月至12月就診于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院口腔科的患者80例，將其分為4組。對(duì)照組20例 （H組，即未患牙周及肥胖疾病且符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)者） ，其中男8例，女12例，年齡 （44.50±7.8）歲；牙周炎組20例（ CP組） ， 其中男10例，女10例，年齡（ 49.25±10.59） 歲；肥胖組20例（ OB組，即未患牙周疾病且符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的肥胖患者） ，其中男13例，女7例，年齡（ 47.75±9.01） 歲，肥胖伴牙周炎組20例（ OB+CP組），其中男11例，女9例，年齡（49.50±8.57） 歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～60 周歲有能力理解并簽訂知情同意書(shū)的成年人；每位患者口腔內(nèi)牙齒≥15顆，每個(gè)象限至少有2顆磨牙牙周探診深度（ probing depth，PD） ≥4 mm，臨床附著喪失（ clinical attachment loss，CAL） ≥2 mm；正常體質(zhì)量指數(shù)（ body mass index，BMI） 為＞18.5 ～＜23.9 kg/m2，肥胖者BMI≥28 kg/ m2。排除標(biāo)準(zhǔn)：懷孕及哺乳期婦女，配戴正畸矯治器的患者；近半年內(nèi)接受過(guò)牙周治療及降脂治療者，近3個(gè)月內(nèi)應(yīng)用免疫抑制劑、非激素類抗炎藥物、抗生素者；心臟病患者、甲狀腺功能亢進(jìn)及減退患者和糖尿病患者。

1.2 牙周臨床指標(biāo)的檢測(cè)

牙周檢查6顆指數(shù)牙 （16、11、26、36、31、46） ，指數(shù)牙檢查6個(gè)位點(diǎn) （近頰、正中頰、遠(yuǎn)頰、近舌、正中舌、遠(yuǎn)舌） 的PD、CAL、牙齦指數(shù) （gingival index，GI）和齦溝出血指數(shù) （sulcular bleeding indx，SBI） 。

1.3 齦溝液及血清樣本的收集

1.3.1 齦溝液收集：選擇1、2象限第一磨牙頰舌正中2個(gè)位點(diǎn) （個(gè)別第一磨牙不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者用相鄰的第二磨牙或第二前磨牙代替） 。去除受試牙的大塊齦上牙石，用尖探針側(cè)面刮除齦上菌斑，受試牙以棉卷隔濕，氣槍吹干，將25號(hào)吸潮紙尖輕輕插入牙周袋底，遇阻力即止，停留1 min取出，如被血或唾液污染，則棄除。將所取紙尖放入EP管中，加入300 μ L PBS緩沖液，放置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 血清收集：采集2 mL外周血，充分凝血后，2 000 r/min 離心20 min、收集上清，-80 ℃保存待檢。

1.4 脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的檢測(cè)

將待測(cè)樣本于室溫下解凍20 min，4 ℃、3 000 r /min離心10 min，離心后取上清液待查，采用人脂聯(lián)素、內(nèi)脂素ELISA試劑盒，檢測(cè)血清及齦溝液中脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的水平，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)，測(cè)定吸光度值，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出脂聯(lián)素與內(nèi)脂素的濃度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)用x-±s表示，若每組資料完全符合正態(tài)分布且方差齊，采用單因素方差分析 （One-way ANOVA） ；不符合則采用秩和檢驗(yàn)，檢測(cè)水準(zhǔn)為雙側(cè)α=0.05；組間采用LSD檢驗(yàn)，P ＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究對(duì)象一般資料的比較

各組患者在年齡、性別方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05） ，見(jiàn)表1。

表1 各組一般情況的比較 （±s）Tab.1 Comparison of basic information in each group （±s）

表1 各組一般情況的比較 （±s）Tab.1 Comparison of basic information in each group （±s）

Item H group CP group OB group OB+CP group Age （year）44.50±7.8049.25±10.5947.75±9.0149.50±8.57 Sex ［n （%）］Male 8（40） 10（50） 13（65） 11（55）Female 12（60） 10（50） 7（35） 9（45）

2.2 研究對(duì)象的臨床指標(biāo)

本研究中CP組患者與OB+CP組患者PD、CAL、GI、SBI均顯著高于H組及OB組 （P ＜ 0.05） ，OB+CP組患者牙周臨床指數(shù)高于CP組患者 （P ＜ 0.05） ，OB+CP 組及 OB組BMI高于CP組及H組 （P ＜ 0.05） ，OB組與H組患者牙周臨床指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05） ，OB+CP組與OB組患者BMI差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＞ 0.05），CP組與H組患者BMI差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＞ 0.05） ，見(jiàn)表2。

2.3 脂聯(lián)素和內(nèi)脂素在血清及齦溝液中的表達(dá)水平

CP組、OB組及H組齦溝液中脂聯(lián)素的濃度高于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及OB+CP組血清中脂聯(lián)素的濃度低于健康對(duì)照組 （P ＜ 0.05） ，OB+CP組血清中脂聯(lián)素的濃度低于CP組及OB組 （P ＜0.05）。CP組、OB組及H組齦溝液中內(nèi)脂素的濃度低于OB+CP組，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＞0.05） 。CP組、OB組及H組血清中內(nèi)脂素的濃度低于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。H組血清中內(nèi)脂素的濃度低于CP組及OB組，3組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＞0.05） 。

表2 各組臨床指標(biāo)的比較Tab.2 Comparison of clinical indicators in each group

圖1 脂聯(lián)素和內(nèi)脂素在齦溝液及血清中的表達(dá)Fig.1 The expression of adiponectin and visfatin in the GCF and serum

3 討論

牙周炎不僅僅是口腔的局部炎癥，同時(shí)也與全身的疾病和健康狀況相關(guān)。肥胖作為牙周炎的危險(xiǎn)因素，主要通過(guò)促進(jìn)氧化應(yīng)激的發(fā)生和炎性細(xì)胞因子的分泌來(lái)破壞牙周組織的健康［5-6］。脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞特異性分泌的一種蛋白質(zhì)，在肥胖患者體內(nèi)含量較低［7］。同時(shí)脂聯(lián)素作為一種保護(hù)性因子，在促進(jìn)抗炎介質(zhì)排放的同時(shí)也能抑制促炎細(xì)胞因子的刺激［8］。有研究［9-10］發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素在促進(jìn)白細(xì)胞介素 （interleukin，IL） 10分泌的同時(shí)能夠抑制活性氧的表達(dá)，從而對(duì)牙周組織起到一定的保護(hù)作用。

內(nèi)脂素是由內(nèi)臟脂肪細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)細(xì)胞因子，是某些炎癥相關(guān)疾病的重要介質(zhì)［11］。近年來(lái)，有學(xué)者［12］發(fā)現(xiàn)，內(nèi)脂素在牙周組織中有較高的表達(dá)，并且在牙周炎的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要的作用。體外實(shí)驗(yàn)的研究［13-16］表明，內(nèi)脂素能夠促進(jìn)炎癥細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子α （tumor necrosis factor α，TNF-α）、IL-6、IL-1β，反之，TNF-α、IL-6、IL-1β也能上調(diào)內(nèi)脂素的表達(dá)。 肥胖和牙周炎均與某些炎性細(xì)胞因子的分泌有關(guān)，故二者的相關(guān)性可能通過(guò)中間的炎癥機(jī)制聯(lián)系起來(lái)。

本研究結(jié)果顯示，OB+CP組血清中脂聯(lián)素的降低幅度最大。提示脂聯(lián)素作為抑炎性細(xì)胞因子，在肥胖伴牙周炎患者體內(nèi)的表達(dá)水平呈降低趨勢(shì)，與齦溝液中脂聯(lián)素的表達(dá)水平具有一致性。因此，推測(cè)肥胖和牙周炎對(duì)患者齦溝液及血清中脂聯(lián)素的降低具有協(xié)同效應(yīng)，肥胖可能通過(guò)抑制某些抑炎性因子的分泌而影響牙周炎的發(fā)生發(fā)展。SUPANEE等［17］研究發(fā)現(xiàn)肥胖以及重度牙周炎患者血漿中脂聯(lián)素的濃度低于體質(zhì)量正常以及輕、中度牙周炎者，而C反應(yīng)蛋白、瘦素以及細(xì)胞間黏附分子等促炎因子的含量較高。伴放線放線桿菌是牙周炎的主要致病菌之一，能產(chǎn)生多種毒力因子，脂聯(lián)素能夠抑制伴放線放線桿菌的活性，本研究中肥胖伴牙周炎患者血清中脂聯(lián)素濃度的降低，可能改變了機(jī)體對(duì)伴放線放線桿菌的免疫應(yīng)答，同時(shí)也降低了免疫球蛋白抗體對(duì)牙周組織的保護(hù)性作用，使肥胖患者更容易罹患牙周炎。脂聯(lián)素在OB+CP組的表達(dá)低于OB組及CP組患者，OB組脂聯(lián)素的濃度與CP組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示肥胖與牙周炎雖分別為全身和口腔局部的炎癥性疾病，但局部炎癥反應(yīng)與全身炎癥反應(yīng)相互促進(jìn)，從而造成OB+CP組患者脂聯(lián)素的表達(dá)水平最低，使肥胖作為危險(xiǎn)因素加快了牙周炎的發(fā)展進(jìn)程。

TABARI等［18］研究發(fā)現(xiàn)牙周炎患者唾液中內(nèi)脂素的濃度高于牙周健康者，且唾液中內(nèi)脂素的濃度與患者CAL的水平呈正相關(guān)。本研究檢測(cè)內(nèi)脂素其在肥胖及牙周炎患者血清及齦溝液中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素在H組、OB組、CP組、OB+CP組患者齦溝液中濃度較小，而在各組患者的血清中含量較高。結(jié)果顯示，OB+CP組患者血清中內(nèi)脂素的濃度較OB組、CP組以及H組高，OB組與CP組血清中內(nèi)脂素的表達(dá)水平較H組有所升高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示影響因素的疊加，使肥胖伴牙周炎患者的固有免疫機(jī)制受到影響，從而使全身對(duì)炎癥的反應(yīng)水平升高。OB組、CP組較H組血清中內(nèi)脂素的含量高，這可能是由于牙周袋內(nèi)牙周致病菌及其毒性產(chǎn)物刺激牙周組織產(chǎn)生高濃度的促炎因子，這些促炎因子可通過(guò)牙周袋內(nèi)上皮進(jìn)入血液循環(huán)，從而上調(diào)血清中內(nèi)脂素的表達(dá)。肥胖患者的脂肪組織除產(chǎn)生內(nèi)脂素、TNF-α、IL-6外，還產(chǎn)生瘦素、抵抗素、C反應(yīng)蛋白等促炎因子，這些促炎因子與內(nèi)脂素相互作用，使相應(yīng)的炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，這可能是肥胖患者易患牙周炎的另一因素。此結(jié)論仍需其他方面的研究進(jìn)一步證實(shí)，增強(qiáng)研究結(jié)果的可靠性。

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Expression of Adiponectin and Visfatin in the Gingival Crevicular Fluid and Serum of Patients with Obesity and Chronic Periodontitis

XU Danni，JIN Ying，WANG Yue，SONG Liming，LIN Xiaoping
（Department of Stomatology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate the expression levels of adiponectin and visfatin in the gingival crevicular fluid （GCF） and serum of patients with obesity and chronic periodontitis.MethodsThe study included 80 patients. Among them，20 were healthy controls （H group） ，20 had periodontitis （CP group） ，20 had obesity （OB group） ，and 20 had both obesity and periodontitis （OB+CP group） . The patients’ baseline information and clinical parameters were recorded，and the GCF and serum were collected. The concentration of adiponectin and visfatin in the GCF and serum were then assayed using ELISA. Use the SPSS 17.0 software package for statistical analysis.ResultsThe concentration of adiponectin in the serum of the CP group，the OB group，and the OB+CP group were significantly lower than that of the H group （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the serum of the OB+CP group was lower than that of both the CP and OB groups （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the GCF of the CP group，the OB group，and the H group were higher than that of the OB+CP group （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the GCF of the CP group，the OB group，and the H group were lower than that of the OB+CP group （P ＜ 0.05） .ConclusionObesity may aggravate the destruction of periodontal tissue by inhibiting the expression of adiponectin and promoting the expression of visfatin.

obesity； periodontitis； adiponectin； visfatin

R781.4

A

0258-4646 （2017） 12-1129-04

http://kns.cnki.net/kcms/detail/21.1227.R.20171130.1814.028.html

10.12007/j.issn.0258-4646.2017.12.015

胥丹妮 （1991-） ，女，醫(yī)師，碩士研究生.

林曉萍，E-mail：xiaoping_ba@126.com

2017-06-02

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2017-11-30 18:14

（編輯 于 溪）