熊 家 袁 野 陸 游 馬紅娜 周歧存* 梁 超 宋宏斌 鄒 青

(1.寧波大學(xué)海洋學(xué)院魚類營(yíng)養(yǎng)研究室，寧波 315211；2.廣東海納川生物科技股份有限公司，廣州 510275)

酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)和血清非特異性免疫酶活性的影響

熊 家1袁 野1陸 游1馬紅娜1周歧存1*梁 超2宋宏斌2鄒 青2

(1.寧波大學(xué)海洋學(xué)院魚類營(yíng)養(yǎng)研究室，寧波 315211；2.廣東海納川生物科技股份有限公司，廣州 510275)

本試驗(yàn)旨在研究飼料中添加不同水平酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)和血清非特異性免疫酶活性的影響。選擇初始體重為(0.41±0.01) g的凡納濱對(duì)蝦幼蝦640尾，隨機(jī)分為4組(每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40尾)，酵母水解物的添加水平分別為0(對(duì)照組)、0.5%、1.0%、2.0%，共配制出4種等氮(42%粗蛋白質(zhì))等脂(8%粗脂肪)的試驗(yàn)飼料。進(jìn)行為期8周的養(yǎng)殖試驗(yàn)。結(jié)果表明：1)各添加組的成活率、增重率和特定生長(zhǎng)率與對(duì)照組相比，差異不顯著(P>0.05)。1.0%添加組增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于2.0%添加組(P<0.05)，而飼料系數(shù)顯著低于2.0%添加組(P<0.05)。1.0%添加組肝體比顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，各組肥滿度沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。2)飼料中添加不同水平酵母水解物對(duì)全蝦以及肌肉的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量無(wú)顯著性影響(P>0.05)。3)酵母水解物對(duì)腸道的皺襞寬度、微絨毛高度和上皮細(xì)胞高度影響不顯著(P>0.05)。而2.0%添加組的腸道皺襞高度顯著高于0.5%添加組(P<0.05)。4)與對(duì)照組相比，添加1.0%的酵母水解物顯著提高了血清酚氧化酶(PO)和溶菌酶(LZM)活性(P<0.05)，且一氧化氮合成酶(NOS)活性也在1.0%添加組達(dá)最大值。綜上所述，在飼料中添加1.0%的酵母水解物能提高凡納濱對(duì)蝦的血清非特異性免疫酶活性，同時(shí)對(duì)生長(zhǎng)性能和腸道形態(tài)健康不會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響。

酵母水解物；凡納濱對(duì)蝦；生長(zhǎng)性能；腸道形態(tài)；免疫酶

凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei，L.vannamei)，也稱南美白對(duì)蝦，原產(chǎn)于南太平洋沿岸的暖水水域，是一種具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的養(yǎng)殖品種，其營(yíng)養(yǎng)豐富，肉質(zhì)鮮美，深受消費(fèi)者的喜愛。但因其養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大以及養(yǎng)殖水域污染較為嚴(yán)重，使對(duì)蝦抗病力下降，感染疾病的幾率上升，存活率降低[1]，導(dǎo)致養(yǎng)殖過(guò)程中抗生素等化學(xué)品濫用，這不僅存在耐藥性和抗生素殘留的問(wèn)題，而且還會(huì)造成水體污染等一系列環(huán)境問(wèn)題[2]。所以尋求抗生素替代品對(duì)凡納濱對(duì)蝦的養(yǎng)殖意義重大，而且受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注。其中，酵母水解物(yeast hydrolysate)作為一種新型的飼料添加劑是抗生素的有效替代物之一。

1 材料與方法

1.1飼料配方與制作

酵母水解物由廣東海納川生物科技股份有限

公司提供，營(yíng)養(yǎng)水平如下：粗蛋白質(zhì)56.5%，粗脂肪0.50%，粗灰分7.10%，水分4.38%，氨基酸態(tài)氮2.32%，甘露寡糖6.75%，核酸14.0%，核苷酸5.12%。

本試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的酵母水解物，添加水平分別為0(對(duì)照組)、0.5%、1.0%、2.0%，配制成4種等氮等脂的試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。按照表1將各種固態(tài)原料粉碎后過(guò)80目篩，按配方比例準(zhǔn)確稱重，并混合均勻，其中維生素和礦物質(zhì)等微量原料采用逐級(jí)擴(kuò)大法混合，用雙螺桿擠條機(jī)壓制成粒徑為1.0～1.5 mm的飼料，90 ℃烘箱中熟化30 min后自然風(fēng)干，將飼料密封后放入-20 ℃冰箱中保存待用。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克維生素預(yù)混料含有 One kg of vitamin premix contained the following：VA 5 000 IU,VB160 g,VB250 g,VB120.1 g,VD32 000 IU,VE 100 IU,VK 60 g,肌醇 inositol 200 g,煙酸 nicotinic acid 100 g,生物素 biotin 6 g,葉酸 folic acid 10 g,維生素C磷酸鹽 VC phosphate 0.3 g,吡哆醇 pyridoxine 60 g。

2)每千克礦物質(zhì)預(yù)混料含有 One kg of mineral premix contained the following：C10H22N2O4S2Co 5.0 g, CuSO4·5H2O 10.204 1 g, KCl (99.5%) 191.62 g, FeC6H5O7·5H2O 6.8571 g,MnSO4·H2O 6.289 3 g, KI (0.99%) 1.7034 g, NaCl (99.5%) 76.69 g, MgSO4·7H2O (99%) 614.48 g, C6H10CaO6·5H2O (99.5%) 77.83 g, ZnSO4·7H2O 9.275 4 g, Na2SeO30.5 g。

3)營(yíng)養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值。Nutrient levels were measured values.

1.2試驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)所用凡納濱對(duì)蝦蝦苗購(gòu)自廣東恒興集團(tuán)蝦苗廠，于廣東恒興863基地進(jìn)行為期8周的養(yǎng)殖試驗(yàn)。試驗(yàn)前先將所需蝦苗于1 000 L玻璃鋼桶中暫養(yǎng)2周，以暫養(yǎng)料(粗蛋白質(zhì)含量42%，粗脂肪含量8%)飽食投喂。正式試驗(yàn)前24 h停止投喂，挑選規(guī)格一致的健康幼蝦640尾，初始體重為(0.40±0.01) g，試驗(yàn)共設(shè)置4組，每組4個(gè)重復(fù)，隨機(jī)分配于16個(gè)300 L的玻璃鋼桶中，每個(gè)養(yǎng)殖桶飼養(yǎng)40尾對(duì)蝦。根據(jù)不同生長(zhǎng)階段確定投餌量，并按體重的8%～10%投喂，每天分4次投喂，早晚的投喂量占總投餌量的60%～70%。分別在07:00、11:00、17:00和21:00進(jìn)行投喂，并根據(jù)當(dāng)日對(duì)蝦的進(jìn)食情況和天氣情況調(diào)整具體投喂量。養(yǎng)殖期8周。試驗(yàn)用水為經(jīng)沙濾、沉淀后的海水，前期每2天換水100 L，中后期每天換水200 L，連續(xù)充氧，每天記錄水溫、鹽度、溶解氧濃度及pH。試驗(yàn)期間水溫26～30 ℃，pH 8.0～8.2，鹽度28～32，溶解氧濃度>6 mg/L，氨氮濃度≤0.05 mg/L。

1.3樣品采集及分析

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后饑餓24 h，對(duì)每個(gè)桶的對(duì)蝦進(jìn)行計(jì)數(shù)、稱重，用于計(jì)算成活率、增重率和特定生長(zhǎng)率等生長(zhǎng)性能指標(biāo)。每桶隨機(jī)取5尾蝦，單獨(dú)量體長(zhǎng)、稱體重，剝離肝胰腺稱重后放入凍存管，肝胰腺重量、體長(zhǎng)和體重?cái)?shù)據(jù)用于計(jì)算肝體比和肥滿度等形態(tài)學(xué)指標(biāo)。每桶隨機(jī)取8尾蝦，4尾全蝦，4尾剝?nèi)ノr殼取肌肉，并保存于-20 ℃冰箱，用于對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)成分分析。隨機(jī)從每個(gè)桶中挑選4尾蝦并取其完整腸道，混樣于2 mL盛有4%多聚甲醛固定液的離心管中固定，用于腸道形態(tài)指標(biāo)分析。每桶取10尾蝦于第5步足基部血竇取血，盛于1.5 mL離心管中于4 ℃冰箱放置過(guò)夜后，5 000 r/min離心10 min，取上清液分裝至PCR管置于-80 ℃冰箱用于血清非特異性免疫酶活性分析。

參照AOAC(1995)[14]中的方法，飼料、全蝦及肌肉干物質(zhì)含量采用105 ℃常壓干燥法測(cè)定，粗蛋白質(zhì)含量采用蛋白質(zhì)測(cè)定儀(Leco，F(xiàn)B-528)測(cè)定，粗脂肪含量采用脂肪測(cè)定儀(OPSIS，SX-360)測(cè)定，粗灰分含量采用550 ℃馬弗爐灼燒法測(cè)定。制備對(duì)蝦腸道組織切片，采用蘇木精-伊紅

(HE)染液染色，中性樹膠封片，在光學(xué)顯微鏡(Olympus，DP-72)下觀察并測(cè)量對(duì)蝦腸道的皺襞高寬、微絨毛高度和上皮細(xì)胞高度。對(duì)蝦血清酚氧化酶(PO)、一氧化氮合成酶(NOS)和溶菌酶(LZM)的活性采用南京建成生物工程研究所的試劑盒經(jīng)全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(Thermo,Multiskan GO-1510)測(cè)定。

1.4計(jì)算公式

成活率(%)=100×終末尾數(shù)/初始尾數(shù)；增重率(%)=100×(終末均重-
初始均重)/初始均重；特定生長(zhǎng)率(%/d)=100×(ln終末均重-
ln初始均重)/試驗(yàn)天數(shù)；飼料系數(shù)=攝食飼料干重/(終末總重-
初始總重)；蛋白質(zhì)效率=(終末體重-初始體重)/
攝入飼料蛋白質(zhì)總量；肝體比(%)=100×
肝胰腺重/蝦體重；肥滿度(g/cm3)=100×體重/體長(zhǎng)3。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

2 結(jié) 果

2.1飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

由表2可知，各添加組的成活率、增重率和特定生長(zhǎng)率與對(duì)照組相比，沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。雖然各組成活率沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)，但隨著酵母水解物添加水平的增加，成活率呈先升高后下降趨勢(shì)，且在0.5%添加組達(dá)最大值90.00%。1.0%添加組的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于2.0%添加組(P<0.05)，而飼料系數(shù)顯著低于2.0%添加組(P<0.05)，同時(shí)1.0%添加組的蛋白質(zhì)效率略高于其他各組，但差異不顯著(P>0.05)。飼料中添加1.0%的酵母水解物時(shí)，肝體比顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但各組肥滿度沒(méi)有顯著性影響(P>0.05)。

表2 飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Values in the same row with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表3可知，飼料中添加不同水平酵母水解物對(duì)全蝦以及肌肉的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均無(wú)顯著性影響(P>0.05)。

2.3飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道形態(tài)的影響

由表4可知，2.0%添加組的腸道皺襞高度顯著高于0.5%添加組(P<0.05)。各組腸道的皺襞寬度、微絨毛高度和上皮細(xì)胞高度均無(wú)顯著性差

異(P>0.05)，但隨著飼料中酵母水解物添加水平的增加，腸道皺襞寬度和上皮細(xì)胞高度均呈先降低后上升的趨勢(shì)，2.0%添加組在數(shù)值上高于對(duì)照組。

2.4飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶活性的影響

由表5可知，1.0%添加組血清的PO和LZM活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而其NOS活性顯著高于0.5%添加組(P<0.05)。

表3 飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦全蝦和肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響

表4 飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道形態(tài)的影響

表5 飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶活性的影響

3 討 論

3.1飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

有研究表明，酵母水解物中含有豐富的氨基酸、核酸及甘露寡糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以通過(guò)維護(hù)腸道健康，促進(jìn)其對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和飼料利用[15]。有研究表明，飼料中添加適量的酵母水解物能夠顯著提高草魚(Ctenopharyngodonidellus)[16]、異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)[17]和加州鱸魚(Micropterussalmoides)[18]水產(chǎn)動(dòng)物的增重率和特定生長(zhǎng)率，并顯著降低飼料系數(shù)。本試驗(yàn)中，添加1.0%的酵母水解物沒(méi)有對(duì)凡納濱對(duì)蝦的增重率、特定生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)產(chǎn)生顯著影響，這表明1.0%的酵母水解物并不會(huì)降低對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能和飼料利用。這與遲淑艷等[19]在研究酵母水解物替代魚粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦影響上的結(jié)果一致，其試驗(yàn)結(jié)果得出飼料中添加5%酵母水解物替代16.67%的魚粉時(shí)，對(duì)凡納濱對(duì)蝦的增重率、特定生長(zhǎng)率、成活率和飼料系數(shù)不會(huì)產(chǎn)生顯著性影響。郭小云等[20]報(bào)道出酵母水解物對(duì)早期斷奶仔豬生長(zhǎng)性能也無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)。李自金等[21]研究發(fā)現(xiàn)，酵母培養(yǎng)物對(duì)草魚的增重率和飼料系數(shù)無(wú)顯著影響。不同試驗(yàn)導(dǎo)致結(jié)果差異的原因可能是酵母水解物添加水平的不同，或者是試驗(yàn)飼料蛋白質(zhì)來(lái)源以及蛋白質(zhì)含量的不同。另一個(gè)重要原因可能是酵母菌株的來(lái)源、酵母水解物的生產(chǎn)工藝和營(yíng)養(yǎng)成分的不同。本試驗(yàn)結(jié)果表明，1.0%的酵母水解物不會(huì)影響對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能，但當(dāng)酵母水解物添加水平超過(guò)一定量時(shí)，對(duì)蝦的增重和蛋白質(zhì)效率有下降趨勢(shì)，而飼料系數(shù)上升，這表明過(guò)量的酵母水解物可能會(huì)影響凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能。這與何遠(yuǎn)法等[22]對(duì)酵母培養(yǎng)物的研究結(jié)果類似,這可能是由于添加過(guò)量的酵母水解物導(dǎo)致飼料中非淀粉多糖增加，抗?fàn)I養(yǎng)作用加劇，從而抑制了動(dòng)物的正常消化功能，影響了凡納濱對(duì)蝦對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，造成維持機(jī)體生長(zhǎng)所需的能量減少[23]，具體原因有待進(jìn)一步考證。同樣的結(jié)果出現(xiàn)在崔敏等[24]的研究中，該研究表明飼料中較高比例的生物飼料酵母替代魚粉會(huì)降低大菱鲆(Scophthalmusmaximus)的生長(zhǎng)性能，干擾其脂肪和蛋白質(zhì)的代謝。在本試驗(yàn)中，1.0%添加組的對(duì)蝦肝體比顯著高于對(duì)照組，在遲淑艷等[19]的試驗(yàn)中也表示飼料中添加2.5%和5.0%酵母水解物組的肝體比顯著高于對(duì)照組。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼料中添加酵母水解物對(duì)全蝦和肌肉的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均無(wú)顯著影響，這與粟雄高[25]在研究酵母培養(yǎng)物對(duì)凡納濱對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)成分影響的結(jié)果類似,說(shuō)明飼料中添加酵母水解物不會(huì)影響凡納濱對(duì)蝦體成分。綜上所述，本試驗(yàn)條件下，飼料中添加1.0%的酵母水解物不會(huì)對(duì)凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)和飼料利用產(chǎn)生顯著影響，但高水平酵母水解物的添加可能會(huì)對(duì)其生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面效果，這需要更深入的研究探討。

3.2飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道形態(tài)的影響

腸道是水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場(chǎng)所，腸道的生長(zhǎng)發(fā)育狀況直接影響機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，而腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)指標(biāo)可以在一定程度上反映腸道是否健康[26]。有研究表明，酵母水解物對(duì)早期斷奶仔豬[20]和肉雞[27]的腸道黏膜形態(tài)有一定影響，促進(jìn)腸道生長(zhǎng)和健康。而在本試驗(yàn)中，各組凡納濱對(duì)蝦腸道的皺襞寬度、微絨毛高度和上皮細(xì)胞高度均無(wú)顯著性差異，但酵母水解物添加水平為2.0%時(shí)，對(duì)蝦腸道皺襞寬度和上皮細(xì)胞高度有上升趨勢(shì)。此外，酵母水解物含有豐富的核苷酸(5.12%)，有研究報(bào)道在飼料中補(bǔ)充一定含量的核苷酸，可以保護(hù)腸道，改善腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)和發(fā)育，從而促進(jìn)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[28-29]。苗新等[30]在大黃魚(Pseudosciaenacrocea)上的研究結(jié)果顯示，當(dāng)核苷酸添加水平為150 mg/kg時(shí)，不同程度地提高了腸道皺襞高度。許丹丹等[31]試驗(yàn)也指出，添加0.1～0.8 g/kg的酵母核苷酸可以顯著提高對(duì)蝦皺襞厚度。朱天和等[32]的研究表明，在無(wú)魚粉飼料中添加核苷酸可以顯著提高鯉魚的腸絨毛高度和上皮細(xì)胞高度。而本試驗(yàn)中，酵母水解物的添加對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道的皺襞寬度、微絨毛高度和上皮細(xì)胞高度無(wú)顯著性影響，但有上升趨勢(shì)，這可能與酵母水解物添加水平較低而不足以補(bǔ)充腸道所需的核苷酸有關(guān)。酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道形態(tài)影響的具體機(jī)制還需深入研究。

3.3飼料中添加酵母水解物對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶活性的影響

血清PO、NOS和LZM的活性是對(duì)蝦非特異性免疫力指標(biāo)，一定程度上反映了機(jī)體的免疫能力，在對(duì)蝦機(jī)體的免疫和防御中占有重要的地位[33]。PO在甲殼動(dòng)物中以酶原的形式存在，PO原激活系統(tǒng)是一種重要的免疫識(shí)別和免疫防御系統(tǒng)，在抵抗外來(lái)病原物質(zhì)入侵中起著關(guān)鍵作用，是衡量機(jī)體免疫能力的重要指標(biāo)[34-35]。NOS在生物機(jī)體免疫中的作用近來(lái)得到了學(xué)者的廣泛關(guān)注，經(jīng)催化可以產(chǎn)生一氧化氮(NO)，NO除具有已知的神經(jīng)傳導(dǎo)、松弛平滑肌等功能外，還具有抗菌、抗寄生蟲、抗病毒和調(diào)節(jié)多種免疫活性物質(zhì)等作用，影響著機(jī)體的免疫功能[36]。LZM廣泛存在于甲殼動(dòng)物血細(xì)胞和體液中，能水解革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁中黏肽的乙酰氨基多糖，并使之裂解、釋放出來(lái)，形成一個(gè)水解酶體系，并防止它們?nèi)肭?，從而?dān)負(fù)起機(jī)體的免疫防御功能，是生物體內(nèi)重要的非特異性免疫的指標(biāo)之一[37]。柳茜等[38]研究發(fā)現(xiàn)，1%～2%的酵母水解物可提高大菱鲆幼魚的血清LZM和NOS活性。王武剛等[39]研究表明，用酵母提取物替代飼料15%的魚粉可以使凡納濱對(duì)蝦血清的LZM活性顯著提高。在遲淑艷等[19]的試驗(yàn)中，飼料中添加2.5%～7.5%的酵母水解物能在一定程度上提升對(duì)蝦的非特異性免疫能力，其血清PO、NOS和LZM的活性均高于魚粉對(duì)照組，這說(shuō)明一定量的酵母水解物可以使機(jī)體處于較高的免疫防御水平。在何遠(yuǎn)法等[22]對(duì)酵母培養(yǎng)物的研究結(jié)果中也顯示，飼料中添加0.3%、0.5%或1.0%的酵母培養(yǎng)物可顯著提高對(duì)蝦血清的LZM和PO活性以及肝胰腺的LZM活性，進(jìn)而提示飼料中添加0.3%～0.5%的酵母培養(yǎng)物可顯著提高凡納濱對(duì)蝦的非特異性免疫力。在本試驗(yàn)中也表現(xiàn)出類似的效果，1.0%的添加組的血清PO、NOS和LZM活性均高于對(duì)照組，這表明飼料中添加1.0%的酵母水解物能提高對(duì)蝦的血清非特異性免疫酶活性，提示相對(duì)于對(duì)照組，攝食一定量的酵母水解物可以使機(jī)體處于較高的免疫防御水平。

本研究中凡納濱對(duì)蝦非特異性免疫酶活性的提升還可能與酵母水解物中含有豐富的β-葡聚糖、甘露寡糖和核苷酸等功能性物質(zhì)有關(guān)。劉立鶴等[40]指出，酵母水解物粉狀或膏狀產(chǎn)品中均含有17%～30%的β-葡聚糖和甘露寡糖，這對(duì)于改善腸道微生態(tài)、增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的非特異性免疫能力具有重要的作用。同時(shí)也有研究表明β-葡聚糖和甘露寡糖在提高免疫能力的同時(shí)并不會(huì)影響機(jī)體對(duì)其消化利用的效果[11,41]。一些學(xué)者研究證明，酵母核苷酸能提高凡納濱對(duì)蝦[33]、真鯛(Pagrusmajor)[42]、美國(guó)紅魚(Sciaenopsocellatus)[28]、異育銀鯽[43]和羅非魚(Oreochromisniloticus)[44]的非特異性免疫能力，與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。Sajeevan等[45]表明核苷酸作為水產(chǎn)動(dòng)物的免疫增強(qiáng)劑，在提高機(jī)體免疫功能方面具有重要意義，但核苷酸在甲殼類動(dòng)物體內(nèi)的非特異性免疫機(jī)制尚不清楚。

4 結(jié) 論

在飼料中添加1.0%的酵母水解物能提高凡納濱對(duì)蝦的血清非特異性免疫酶活性，同時(shí)對(duì)生長(zhǎng)性能和腸道形態(tài)健康不會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響。

[1] THITAMADEE S,PRACHUMWAT A,SRISALA J,et al.Review of current disease threats for cultivated penaeid shrimp in Asia[J].Aquaculture,2016,452:69-87.

[2] MUROGA K.Viral and bacterial diseases of marine fish and shellfish in Japanese hatcheries[J].Aquaculture,2001,202(1/2):23-44.

[3] FERREIRA I M P L V O,PINHO O,VIEIRA E,et al.Brewer’sSaccharomycesyeastbiomass:characteristics and potential applications[J].Trends in Food Science & Technology,2010,21(2):77-84.

[4] VAN HEUGTEN E,FUNDERBURKE D W,DORTON K L.Growth performance,nutrient digestibility,and fecal microflora in weanling pigs fed live yeast[J].Journal of Animal Science,2003,81(4):1004-1012.

[5] NOCEK J E,HOLT M G,OPPY J.Effects of supplementation with yeast culture and enzymatically hydrolyzed yeast on performance of early lactation dairy cattle[J].Journal of Dairy Science,2011,94(8):4046-4056.

[6] YU H H,HAN F,XUE M,et al.Efficacy and tolerance of yeast cell wall as an immunostimulant in the diet of Japanese seabass (Lateolabraxjaponicus)[J].Aquaculture,2014,432:217-224.

[7] GOPALAKANNAN A,ARUL V.Enhancement of the innate immune system and disease-resistant activity inCyprinuscarpioby oral administration of β-glucan and whole cell yeast[J].Aquaculture Research,2010,41(6):884-892.

[8] WELKER T L,LIM C,YILDIRIM-AKSOY M,et al.Immune response and resistance to stress andEdwardsiellaictalurichallenge in channel catfish,Ictaluruspunctatus,fed diets containing commercial whole-cell yeast or yeast subcomponents[J].Journal of the World Aquaculture Society,2007,38(1):24-35.

[11] MESHRAM S J,MURTHY H S,ALI H,et al.Effect of dietary β-glucan on immune response and disease resistance againstAeromonashydrophilain giant freshwater prawn,Macrobrachiumrosenbergii(de Man.1879)[J].Aquaculture International,2015,23(2):439-447.

[12] SUBRAMANIAN M,ALIKUNHI N M,KANDASAMY K.Immunostimulatory effect of mangrove-derived marine yeasts inPenaeusmonodon[J].Aquaculture Research,2014,45(3):389-396.

[13] BURGENTS J E,BURNETT K G,BURNETT L E.Disease resistance of Pacific white shrimp,Litopenaeusvannamei,following the dietary administration of a yeast culture food supplement[J].Aquaculture,2004,231(1/2/3/4):1-8.

[14] AOAC.Official methods of analysis of AOAC international[M].16th ed.Arlington:Association of Analytical Chemist,Inc.,1995.

[15] 楊凡,易建華,聶琴,等.酵母水解物在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用[J].中國(guó)飼料,2016(16):41-43.

[16] 遲淑艷,聶琴,黃吳文,等.凡納濱對(duì)蝦飼料中酵母水解物替代魚粉適宜比例的研究[J].水生生物學(xué)報(bào),2016,40(4):728-735.

[17] 郭小云,吳信,謝春艷,等.酵母水解物對(duì)早期斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血清生理生化指標(biāo)和激素水平以及腸道黏膜形態(tài)的影響[J].飼料工業(yè),2015,36(8):61-64.

[18] 李自金,邱波,童運(yùn)彬,等.啤酒酵母取代魚粉在草魚上的應(yīng)用[J].飼料工業(yè),2009,30(20):25-26.

[19] 曾本和,向梟,楊文嬌,等.酵母水解物對(duì)草魚生長(zhǎng)性能和體成分的影響[J].飼料工業(yè), 2015,36(16):16-19.

[20] 楊凡,陳昌福,易建華,等.酵母水解物對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)和免疫性能的影響[J].飼料工業(yè),2015,36(4):60-64.

[21] 曾本和,楊文嬌,吳振,等.酵母水解物對(duì)加州鱸幼魚生長(zhǎng)性能及免疫酶指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè),2016,37(14):11-15.

[22] 何遠(yuǎn)法,郁歡歡,遲淑艷,等.酵母培養(yǎng)物對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、非特異性免疫力和抗病力的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(12):4063-4072.

[23] 邱燕.三種微生態(tài)制劑對(duì)草魚(Ctenopharyngodonidellus)生長(zhǎng)性能、生理機(jī)能及腸道黏膜的影響[D].碩士學(xué)位論文.蘇州:蘇州大學(xué),2010.

[24] 崔敏,郭冉,夏輝.生物飼料酵母替代魚粉對(duì)大菱鲆的影響[J].飼料研究,2011(5):65-68.

[25] 粟雄高.檸檬酸和微生態(tài)制劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、消化酶活性和免疫性能的影響[D].碩士學(xué)位論文.上海:上海海洋大學(xué),2012.

[26] 楊洪森,戴晉軍.酵母核苷酸對(duì)動(dòng)物腸道的保護(hù)及在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].國(guó)外畜牧學(xué)：豬與禽,2012,32(1):83-85.

[27] 賀淼,黃鑫,戴晉軍,等.兩種不同類型酵母水解物對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、腸黏膜形態(tài)的影響[J].飼料工業(yè),2015,36(16):60-63.

[28] CHENG Z Y,BUENTELLO A,GATLIN D M.Dietary nucleotides influence immune responses and intestinal morphology of red drumSciaenopsocellatus[J].Fish & Shellfish Immunology,2011,30(1):143-147.

[29] TSUJINAKA T,KISHIBUCHI M,IIJIMA S,et al.Nucleotides and intestine[J].Journal of Parenteral and Enteral Nutrition,1999,23(5S):S74-S77.

[30] 苗新,曹娟娟,徐瑋,等.核苷酸對(duì)大黃魚生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)和抗氧化能力的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2014,38(8):1140-1148.

[31] 許丹丹,曹俊明,黃燕華,等.飼料中添加核苷酸對(duì)凡納濱對(duì)蝦幼蝦生長(zhǎng)、腸道形態(tài)及抗氧化酶活力的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2011,18(5):1115-1124.

[32] 朱天和,吉紅,王麗宏,等.酵母核苷酸對(duì)鯉魚生長(zhǎng)性能、生化指標(biāo)和腸道發(fā)育的影響[J].飼料研究,2010(9):1-4.

[33] GUO J P,GUO B Y,ZHANG H L,et al.Effects of nucleotides on growth performance,immune response,disease resistance and intestinal morphology in shrimpLitopenaeusvannameifed with a low fish meal diet[J].Aquaculture International,2016,24(4):1007-1023.

[34] MENG F,ZHANG Y,KONG J,et al.The research review of prophenoloxidase activating system in crustacean[J].Oceanologia et Limnologia Sinica,1999,30(1):110-116.

[35] 楊留冰,潘魯青.注射磷脂酰絲氨酸對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2013,37(9):1378-1388.

[36] 姜國(guó)建,于仁誠(chéng),王云峰,等.中國(guó)明對(duì)蝦(Fenneropenaeuschinensis)血細(xì)胞中一氧化氮合成酶的鑒定及其在白斑綜合癥病毒感染過(guò)程中的變化[J].海洋與湖沼,2004,35(4):342-350.

[37] ELLIS A E.Immunity to bacteria in fish[J].Fish & Shellfish Immunology,1999,9(4):291-308.

[38] 柳茜,楊文嬌,吳振,等.酵母水解物對(duì)大菱鲆幼魚非特異性免疫及抗應(yīng)激能力的影響[J].飼料工業(yè),2015,36(18):33-37.

[39] 王武剛.酵母提取物替代魚粉在凡納濱對(duì)蝦飼料中的應(yīng)用研究[D].碩士學(xué)位論文.上海:上海海洋大學(xué),2012.

[40] 劉立鶴,姚娟,李彪,等.酵母源生物飼料在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].國(guó)外畜牧學(xué)-豬與禽,2011,31(2):31-32.

[41] MURTHY H S,LI P,LAWRENCE A L,et al.Dietary β-glucan and nucleotide effects on growth,survival and immune responses of pacific white shrimp,Litopenaeusvannamei[J].Journal of Applied Aquaculture,2009,21(3):160-168.

[42] HOSSAIN M S,KOSHIO S,ISHIKAWA M,et al.Dietary nucleotide administration influence growth,immune responses and oxidative stress resistance of juvenile red sea bream (Pagrusmajor)[J].Aquaculture,2016,455:41-49.

[43] 魏文志,羅方妮,楊成,等.酵母核苷酸對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)和免疫酶活性的影響[J].淡水漁業(yè),2007,37(4):57-60.

[45] SAJEEVAN T P,PHILIP R,SINGH I S B.Immunostimulatory effect of a marine yeastCandidasakeS165 inFenneropenaeusindicus[J].Aquaculture,2006,257(1/2/3/4):150-155.

*Corresponding author, professor, E-mail: zhouqicun@nbu.edu.cn

EffectsofYeastHydrolysateonGrowthPerformance,IntestinalMorphologyandSerumNonspecificImmuneEnzymeActivitiesofLitopenaeusvannamei

XIONG Jia1YUAN Ye1LU You1MA Hongna1ZHOU Qicun1*LIANG Chao2SONG Hongbin2ZOU Qing2

(1.LaboratoryofFishNutrition,SchoolofMarineSciences,NingboUniversity,Ningbo315211,China; 2.GuangdongHinabiotechCo.,Ltd.,Guangzhou510275,China)

This experiment was conducted to estimate the effects of dietary supplemental levels of yeast hydrolysate on growth performance, intestinal morphology and serum nonspecific immune enzyme activities ofLitopenaeusvannamei. A total of 640 juvenileLitopenaeusvannameiwith an initial average body weight of (0.40±0.01) g were randomly divided into four groups with four replicates and 40Litopenaeusvannameiper replicate. Four isonitrogenous and isolipidic practical diets (42% crude protein and 8% crude lipid) were prepared by adding 0 (control group) , 0.5%, 1.0% and 2.0% yeast hydrolysate in a basal diet, respectively. The experiment lasted for 8 weeks. The results showed as follows: 1) there were no significant differences in survival rate (SR), weight gain rate (WGR) and specific growth rate (SGR) between experimental groups and control group (P>0.05). 1.0% supplemental group had significantly higher WGR and SGR than 2.0% supplemental group (P<0.05), and significantly lower feed conversion ratio (FCR) than 2.0% supplemental group (P<0.05). Hepatopancreas somatic index (HSI) in 1.0% supplemental group was significantly higher than that in control group (P<0.05), but condition factor (CF) was not significantly affected by yeast hydrolysate supplementation (P>0.05). 2) Dietary supplemental level of yeast hydrolysate had no significant influences on dry matter, crude protein, crude lipid and ash contents of whole shrimp and shrimp muscle (P>0.05). 3) Fold width, microvillus height and enterocyte height of shrimp intestine were not significantly affected by dietary supplementation of yeast hydrolysate (P>0.05). 2.0% supplemental group had a significantly higher fold height in intestine than in 0.5% supplemental group (P<0.05). 4) Compared with control group, serum activities of phenoloxidase (PO) and lysozyme (LZM) of shrimp were significantly increased by dietary supplementation of 1.0% yeast hydrolysate (P<0.05), and serum nitric oxidesynthase (NOS) activity reached the maximum in 1.0% supplemental group. In conclusion, dietary supplementation of 1.0% yeast hydrolysate can significantly increase serum nonspecific immune enzyme activities ofLitopenaeusvannamei, and will not exert negatively affect growth performance and intestinal morphology health ofLitopenaeusvannamei.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(11)：4207-4215]

yeast hydrolysate;Litopenaeusvannamei; growth performance; intestinal morphology; immune enzyme

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.11.045

S968.22

A

1006-267X(2017)11-4207-09

2017-04-10

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(41476125)

熊 家(1994—)，女，江西瑞金人，碩士研究生，從事水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail: 460212581@qq.com

*通信作者：周歧存，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: zhouqicun@nbu.edu.cn

(責(zé)任編輯 王智航)