周艷玲 孫育平 曹俊明* 黃燕華* 王國霞 陳冰 王衛(wèi)民

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，武漢 430070；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所，廣州 510640；3.廣東省動物育種與營養(yǎng)公共實驗室，廣州 510640；4.廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室，廣州 510640)

飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長性能、體成分、血清生化指標(biāo)和抗氨氮應(yīng)激能力的影響

周艷玲1,2,3,4孫育平2,3,4曹俊明2,3,4*黃燕華2,3,4*王國霞2,3,4陳冰2,3,4王衛(wèi)民1

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，武漢 430070；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所，廣州 510640；3.廣東省動物育種與營養(yǎng)公共實驗室，廣州 510640；4.廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室，廣州 510640)

本試驗旨在研究飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)生長性能、體成分、血清生化指標(biāo)和抗氨氮應(yīng)激能力的影響。選用初始體重為(1.32±0.01) g的黃顙魚800尾，隨機分為5組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)40尾魚。對照組投喂基礎(chǔ)飼料，試驗組分別投喂基礎(chǔ)飼料中添加100、300、500、700 mg/kg谷胱甘肽的試驗飼料。飼養(yǎng)56 d后，利用氯化銨進行氨氮應(yīng)激試驗。結(jié)果表明：1)隨著飼料中谷胱甘肽添加量的增加，黃顙魚的增重、特定生長率和蛋白質(zhì)效率呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，均在添加量為300 mg/kg時達到最大值，且100～500 mg/kg組均顯著高于對照組(P<0.05)；各組之間的飼料系數(shù)、肥滿度和肝體比差異不顯著(P>0.05)。2)與對照組相比，300～700 mg/kg組全魚粗蛋白質(zhì)和100～700 mg/kg組全魚粗脂肪含量顯著升高(P<0.05)。3)飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚血清總蛋白、膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均無顯著影響(P>0.05)。4)氨氮應(yīng)激后，試驗組黃顙魚死亡時間較對照組延遲，96 h時，各試驗組黃顙魚累積死亡率均低于對照組，其中100和300 mg/kg組顯著降低(P<0.05)。綜上所述，飼料中添加谷胱甘肽可以提高黃顙魚幼魚的生長性能、全魚體粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量及抗氨氮應(yīng)激能力。利用二次回歸方程擬合特定生長率和谷胱甘肽添加量，得出谷胱甘肽在黃顙魚幼魚飼料中的適宜添加量為357.69 mg/kg。

谷胱甘肽；黃顙魚；生長性能；體成分；血清生化指標(biāo)；氨氮應(yīng)激

黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)又名黃臘丁，屬鲇形目、鲿科、黃顙魚屬，是我國淡水水體中分布較廣的底層經(jīng)濟雜食性魚類，含肉率較高，平均為67.53%，其中蛋白質(zhì)含量為15.37%，脂肪含量為1.61%，極低的脂肪含量使得它備受消費者歡迎[1]。隨著市場需求量的穩(wěn)步提升，規(guī)?；图s化養(yǎng)殖快速發(fā)展。但近年來，隨著黃顙魚養(yǎng)殖密度不斷擴大，養(yǎng)殖環(huán)境中出現(xiàn)了大量的應(yīng)激因子，使得魚體生長性能降低、氧化應(yīng)激增加，嚴重制約養(yǎng)殖產(chǎn)量的提升[2]。因此，運用營養(yǎng)免疫調(diào)控方式，在飼料中添加抗氧化物質(zhì)提高黃顙魚的生長性能和抗氧化應(yīng)激能力，將對黃顙魚的健康養(yǎng)殖產(chǎn)生積極作用。

谷胱甘肽(glutathione，GSH)是廣泛存在于細胞中的生物活性肽，在機體中發(fā)揮著重要的生理功能。研究表明，谷胱甘肽能參與機體自由基清除、解毒、物質(zhì)吸收、細胞生長、細胞免疫及DNA生物合成等，對魚類的促生長、增強抗氧化應(yīng)激能力有著重要作用[3]。研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加谷胱甘肽能顯著提高奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus×O.aureus)[4]、吉富羅非魚(GIFT)[5]、凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei)[6-7]的生長和抗應(yīng)激能力，但對皺紋盤鮑(Haliotisdiscushannai)[8]的促生長效果不顯著；亦有研究發(fā)現(xiàn)，不同添加量的谷胱甘肽對奧尼羅非魚[9]、牙鲆(Paralichthysolivaceus)[10]的促生長和抗氧化性能作用效果不同，一定添加量的谷胱甘肽能顯著改善魚體的生長和抗氧化性能，過高的添加量會對機體造成負面影響。這表明，谷胱甘肽對水產(chǎn)動物具有良好的促生長和抗氧化應(yīng)激效果，但其作用效果與動物的種類和添加量不同有關(guān)。目前，關(guān)于谷胱甘肽對黃顙魚的營養(yǎng)生理作用尚未見報道。為此，本試驗以黃顙魚為研究對象，通過研究基礎(chǔ)飼料中不同添加量谷胱甘肽對黃顙魚生長性能、體成分、血清生化指標(biāo)和抗氨氮應(yīng)激能力的影響，以期為谷胱甘肽在黃顙魚養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試驗飼料

參考Chen等[11]的飼料配方，以魚粉、豆粕為主要蛋白質(zhì)源，高精面粉為主要糖源，魚油和豆油為主要脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，其組成及營養(yǎng)水平見表1。在基礎(chǔ)飼料中分別添加100、300、500、700 mg/kg谷胱甘肽，配制4種試驗飼料，4種試驗飼料的粗蛋白質(zhì)水平分別為41.17%、41.43%、41.44%、41.50%，粗脂肪水平分別為7.02%、7.35%、6.97%、7.03%。谷胱甘肽購自美國AMRESCO公司，還原型，純度>98.0%。所有原料過60目篩，微量成分遵照逐級放大原則加入，谷胱甘肽溶水后加入各組飼料中。全部混合后用SLX-80型雙螺桿擠壓機制成直徑為1.5 mm顆粒飼料，在55 ℃下烘干，冷卻后放入密封袋中，于-20 ℃冰箱中保存待用。

1.2試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗用黃顙魚購自廣東省清遠市黃沙漁業(yè)基地。魚苗先在室外水泥池暫養(yǎng)至1.3 g左右，每天投喂商品飼料2次。飼養(yǎng)試驗在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所水產(chǎn)研究室室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖桶(體積約為300 L)內(nèi)進行。選取體重為(1.32±0.02) g黃顙魚幼魚800尾，隨機分成5個組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)40尾魚。對照組投喂基礎(chǔ)飼料，試驗組分別投喂4種試驗飼料，各組標(biāo)記為G0、G100、G300、G500和G700組。每天08:30和18:30各投喂1次，投喂量為體重的4%～6%，根據(jù)攝食情況調(diào)整投喂量。每天排污，每2 d換1次水，換水量為1/3左右。試驗期間水溫28～32 ℃，氨氮濃度<0.2 mg/L，亞硝酸鹽濃度<0.01 mg/L，溶氧含量>6.0 mg/L，pH為7.5～8.0。飼養(yǎng)試驗為期56 d。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克礦物質(zhì)預(yù)混料中含有 One kilogram of mineral premix contained the following：MgSO4·H2O 12 g，Ca(IO3)29 g，KCl 36 g，Met-Cu 1.5 g，ZnSO4·H2O 10 g，F(xiàn)eSO4·H2O 1 g，蛋氨酸銅Met-Co 0.25g，NaSeO30.003 6 g,水分 moisture≤10%。

2)每千克維生素預(yù)混料中含有 One kilogram of vitamin premix contained the following：VA 3 200 000 IU，VB14 g，VB28 g，VB64.8 g，VB120.016 g，VD 1 600 000 IU，VE 16 g，VK 4 g，煙酸 nicotinic acid 28 g，泛酸鈣 calcium pantothenate 16 g，葉酸 folic acid 1.28 g，肌醇 inositol 40 g，生物素 biotin 0.064 g,水分 moisture≤10%。

3)營養(yǎng)水平為實測值。Nutrient levels were measured values.

1.3樣品采集

飼養(yǎng)試驗結(jié)束時禁食24 h，記錄每個重復(fù)的魚尾數(shù)，并稱量總重，計算增重和特定生長率。每個重復(fù)隨機取15尾魚，用MS-222麻醉，3尾置于-20 ℃冰箱中保存，用于全魚體成分測定，6尾用于測定體重、體長、肝臟重和內(nèi)臟重；6尾用于尾靜脈取血，室溫靜置4 h，3 500 r/min離心10 min，取上清液制備血清，于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4指標(biāo)測定

1.4.1 生長性能指標(biāo)計算

成活率(survival rate，SR，%)=
[(終末尾數(shù)-初始尾數(shù))/初始尾數(shù)]×100；增重(weight gain，WG，g)=末均重-初均重；特定生長率(specific growth rate，SGR，%/d)=
100×(ln末均重-ln初均重)/飼養(yǎng)天數(shù)；飼料系數(shù)(feed coefficient ratio，F(xiàn)CR)=
攝入飼料總量/(終末體重-初始體重)；蛋白質(zhì)效率(protein efficiency rate，PER，%)=
[(終末總重-初始總重)/(攝入飼料總量×
飼料粗蛋白質(zhì)含量)]×100；蛋白質(zhì)沉積率(protein deposition rate，PDR，%)=
(體組織蛋白質(zhì)沉積量/
蛋白質(zhì)攝入量)×100；肥滿度(condition factor，CF，g/cm3)=
(體重/體長3)×100；肝體比(hepatosomatic index，HIS，%)=
(肝臟重/體重)×100。

1.4.2 常規(guī)成分分析

粗蛋白質(zhì)含量利用半自動凱氏定氮儀采用凱氏定氮法(GB/T 6432—1994)測定；粗脂肪含量采用乙醚抽提的方法(GB/T 6433—1994)測定；粗灰分含量采用550 ℃灼燒至恒重的方法(GB/T 6438—1992)測定；水分含量采用105 ℃烘箱烘干至恒重的方法(GB/T 6435—1986)測定[12]。

1.4.3 血清生化指標(biāo)分析

血清總蛋白、膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性由廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗中心(廣州)采用日立7600全自動生化分析儀測定。

1.5氨氮應(yīng)激試驗

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每個重復(fù)隨機選取20尾魚，以氯化銨作為應(yīng)激源進行應(yīng)激試驗。向水體(體積約為150 L)中加入氯化銨母液(濃度為10 g/L)，使總氨氮濃度達到105 mg/L，此時非離子氨的濃度為2.58 mg/L[pH為7.5，溫度為(27±1) ℃]，非離子氨的計算方法參考李波等[13]。試驗開始時，每隔6 h檢測水體溫度、pH和氨氮濃度，并及時用氯化銨母液調(diào)整水體非離子氨濃度。觀察并記錄黃顙魚的發(fā)病和死亡情況，及時清理死魚，計算72和96 h內(nèi)的累積死亡率(cumulative mortality rate，CMR)：

累積死亡率(%)=100×應(yīng)激結(jié)束時黃顙魚
死亡尾數(shù)/應(yīng)激前黃顙魚總尾數(shù)。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準差(mean±SD,n=4)表示。采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，組間差異顯著，再作Duncan氏多重比較法檢驗，差異顯著性水平為P<0.05。其中，累積死亡率經(jīng)過反正弦轉(zhuǎn)換后再進行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長性能的影響

由表2可知，隨著飼料中谷胱甘肽添加量的增加，黃顙魚的增重、特定生長率、蛋白質(zhì)效率均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，均在G300組達到最大值，其中G100、G300、G500組均顯著高于對照組(P<0.05)。與對照組相比，試驗組肥滿度和肝體比均升高，但差異不顯著(P>0.05)。以特定生長率為評價指標(biāo)，得出黃顙魚特定生長率(y)與谷胱甘肽添加量(x)之間的一元二次回歸方程為y=-(8.3871E-007)x2+0.000 6x+5.295 4 (R2=0.722 2)(圖1)。經(jīng)計算，得出谷胱甘肽在黃顙魚幼魚飼料中的適宜添加量為357.69 mg/kg。

2.2飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚體成分的影響

由表3可知，各試驗組全魚體粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量均高于對照組，其中G300、G500、G700組全魚體粗蛋白質(zhì)含量顯著高于對照組(P<0.05)，G100、G300、G500、G700組全魚體粗脂肪含量顯著高于對照組(P<0.05)。各組的全魚體干物質(zhì)和粗灰分含量均無顯著差異(P>0.05)。

表2 飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

圖1 飼料中谷胱甘肽水平與黃顙魚幼魚特定生長率的關(guān)系

2.3飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚血清總蛋白、膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均無顯著影響(P>0.05)。

2.4飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚抗氨氮應(yīng)激能力的影響

氨氮應(yīng)激后，黃顙魚在72 h時出現(xiàn)較大量死亡。由表5可知，應(yīng)激72和96 h時，各試驗組的累積死亡率均低于對照組，且隨著谷胱甘肽添加量的增加累積死亡率呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，并均在G300組達到最低，其中96 h時，G100和G300組均顯著低于對照組(P<0.05)。比較2個時間點各組魚的累積死亡率可以發(fā)現(xiàn)，對照組在72 h時累積死亡率達到45.0%，而試驗組達到40%以上的累積死亡率出現(xiàn)在96 h。

3 討 論

3.1谷胱甘肽對黃顙魚幼魚生長性能的影響

本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加一定量的谷胱甘肽能顯著提高黃顙魚幼魚的增重、特定增長率和蛋白質(zhì)效率，表明谷胱甘肽能改善黃顙魚的生長性能，結(jié)果與焦彩虹[4]在奧尼羅非魚、周婷婷等[14]在吉富羅非魚、趙紅霞等[15]在草魚(Ctenopharyngodonidellus)、王芳倩等[10]在牙鲆、任勝杰等[16]在異育銀鯽(CarassiusauratusSibelio)和Zambonino等[17]在鱸魚(Lateolabraxjaponicus)中的研究結(jié)果一致。目前，關(guān)于谷胱甘肽的促生長作用已有不少報道，其促生長的作用機制可能是多方面的。趙紅霞等[15]在草魚和王芳倩等[10]在牙鲆的研究中指出，谷胱甘肽的促生長機制可能與其分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，谷胱甘肽中的半胱氨酸是輔酶A的組成成分，它可以破壞生長抑素分子的二硫鍵，解除生長抑素對生長激素(GH)等激素的抑制，最終發(fā)揮促生長作用。另外，在豬、羊的研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，谷胱甘肽可促進垂體GH的分泌，而GH可以上調(diào)肝臟生長激素受體(GHR)基因轉(zhuǎn)錄水平，提高肝臟、半腱肌類胰島素生長因子1(IGF-1)基因轉(zhuǎn)錄水平，使血清IGF-1含量提高，進而促進蛋白質(zhì)合成和提高養(yǎng)分利用率[18-19]。周婷婷[5]在吉富羅非魚的試驗中發(fā)現(xiàn)，飼料中添加一定量的谷胱甘肽能提高血清GH、IGF-1的含量及肝臟GH、IGF-1 mRNA的表達量，并推測谷胱甘肽可通過消耗生長抑制素來促進GH分泌，作用于GHR產(chǎn)生IGF-1，由IGF-1作用于靶器官，最終促進動物生長。亦有報道顯示，谷胱甘肽能在動物腸腔中起保護腸黏膜免受毒物和過氧化物損傷的作用，這可能將有助于腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，這在凡納濱對蝦和牙鲆中得到了證實。關(guān)于谷胱甘肽的促生長作用機制還有待進一步研究。

表3 飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚體成分的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))

表4 飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響

表5 飼料中添加谷胱甘肽對黃顙魚幼魚抗氨氮應(yīng)激能力的影響

本試驗以特定生長率為評價指標(biāo)，計算出黃顙魚幼魚飼料中谷胱甘肽的適宜添加量為357.69 mg/kg，這一結(jié)果與草魚(350.00 mg/kg)[15]、吉富羅非魚(355.13 mg/kg)[14]的研究結(jié)果接近，但低于牙鲆(368.92 mg/kg)[10]和高于凡納濱對蝦(174.13 mg/kg)[21]的適宜添加量，由此說明，動物飼料中谷胱甘肽的適宜添加量可能會因動物種類的不同存在差異。在本試驗中還發(fā)現(xiàn)，黃顙魚的生長性能與飼料中谷胱甘肽添加量不是呈現(xiàn)直線相關(guān)關(guān)系，而是在適宜范圍內(nèi)，促生長效果明顯，過高的添加量反而會使生長性能降低，這與劉曉華等[20]在凡納濱對蝦和王芳倩等[10]在牙鲆的研究結(jié)果類似，其原因可能在于過高的添加量會對黃顙魚體產(chǎn)生毒性作用。有研究表明，雖然谷胱甘肽是良好的抗氧化劑，但過多的谷胱甘肽能與多種化合物(如醛類、醌類、鹵烯烴等)結(jié)合產(chǎn)生毒性代謝物，這些代謝物可與DNA共價結(jié)合產(chǎn)生氧自由基，毒性代謝產(chǎn)物的長期積累對機體產(chǎn)生不利影響[21]。Sah等[22]和高姝娟等[23]還報道，谷胱甘肽作為氧化物的前體，濃度過高時會產(chǎn)生毒性，引起DNA損傷。

研究認為，魚類的肝體比是魚類短期和長期營養(yǎng)的敏感指標(biāo)。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，植物蛋白質(zhì)能使虹鱒[24]和黑鯛[25]的肝體比升高。本試驗中，各試驗組的黃顙魚肝體比較對照組均有不同程度的升高，這可能是由于谷胱甘肽促進了肝臟RNA的表達，進而促進蛋白質(zhì)在肝臟的合成。全魚體成分分析顯示，谷胱甘肽能顯著提高全魚體粗蛋白質(zhì)含量，這進一步證明谷胱甘肽能增強黃顙魚的蛋白質(zhì)合成作用，周婷婷等[14]在吉富羅非魚的研究中也有相似的報道。

3.2谷胱甘肽對黃顙魚幼魚體成分和血清生化指標(biāo)的影響

本試驗結(jié)果顯示，各試驗組全魚體粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量均高于對照組，其中G300～G700組全魚體粗蛋白質(zhì)、G100～G700組全魚體粗脂肪含量達到顯著水平，且養(yǎng)殖過程中各組試驗飼料的粗蛋白質(zhì)(41.17%～41.50%)和粗脂肪水平(6.97%～7.50%)基本一致，這說明，飼料中添加谷胱甘肽可顯著提高黃顙魚全魚體粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量，該結(jié)果與趙紅霞等[15]在草魚、周婷婷等[14]在吉富羅非魚和儲霞玲等[26]在凡納冰對蝦上的結(jié)果類似，但梁春梅等[9]在奧尼羅非魚飼料中添加谷胱甘肽并沒有發(fā)現(xiàn)有顯著差異。關(guān)于谷胱甘肽對黃顙魚體成分的影響還有待進一步研究。

葡萄糖是機體主要的供能物質(zhì)，飼料的營養(yǎng)素會影響機體葡萄糖含量，總蛋白含量是反映機體蛋白質(zhì)代謝和營養(yǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)，Kaushik等[27]研究表明，飼料蛋白質(zhì)源的質(zhì)量能顯著影響血清總蛋白的含量，從而顯著影響機體蛋白質(zhì)代謝。本試驗中，在飼料中添加谷胱甘肽并未對黃顙魚血清葡萄糖和總蛋白含量產(chǎn)生顯著影響，這與在草魚[15]和吉富羅非魚[14]上的研究結(jié)果一致，其原因可能與試驗中各組飼料原料和營養(yǎng)水平基本一致有關(guān)。膽固醇和甘油三酯是體內(nèi)重要的脂類物質(zhì)，膽固醇可以合成膽汁和各種固醇類激素，而甘油三酯是細胞重要的代謝供能物質(zhì)，它們含量的高低反映了脂類吸收狀況和肝臟脂肪代謝狀況。本試驗中，G100～G500組血清膽固醇和甘油三酯含量均較對照組有不同程度的升高，結(jié)果與在草魚[15]和吉富羅非魚[14]上的研究一致。原因可能是谷胱甘肽促進GH的分泌，增強了脂肪代謝，進而升高了血清膽固醇和甘油三酯的含量。轉(zhuǎn)氨酶在三大營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和非必需氨基酸合成過程中有重要作用，谷丙轉(zhuǎn)氨酶反映肝功能，谷草轉(zhuǎn)氨酶反映心臟和肌肉的受損程度[28]。本試驗中，飼料中添加谷胱甘肽對2種轉(zhuǎn)氨酶均沒有顯著影響，但G300～G700組的轉(zhuǎn)氨酶均高于對照組，這可能有助于轉(zhuǎn)氨基作用，增強機體非必須氨基酸的合成能力。尿素氮與蛋白質(zhì)代謝有關(guān)，是嘌呤代謝的終產(chǎn)物，尿素氮含量可以反映出蛋白質(zhì)的代謝情況和氨基酸的平衡情況。在草魚[15]、羅非魚[14]和鯉魚[29]上的研究發(fā)現(xiàn)，活性肽可以顯著降低血清尿素氮的含量，但在斷奶仔豬[30]上的研究并未發(fā)現(xiàn)有顯著影響，本試驗的研究結(jié)果與后者相似，其原因可能與試驗對象、飼料蛋白質(zhì)水平有關(guān)。

3.3谷胱甘肽對黃顙魚幼魚抗氨氮應(yīng)激能力的影響

生物體存在完整的抗氧化防御系統(tǒng)，正常情況下，機體的自由基能被抗氧化系統(tǒng)清除，從而相對的動態(tài)平衡；當(dāng)機體受到環(huán)境脅迫時，大量的活性氧會攻擊附近的細胞，對機體造成氧化脅迫，使細胞中DNA斷裂、酶失活，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化，引起細胞凋亡[31]。隨著高密度集約化養(yǎng)殖，水產(chǎn)養(yǎng)殖動物殘餌和排泄物等氨化作用產(chǎn)生大量氨態(tài)氮，這會干擾魚體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)，從而誘發(fā)水產(chǎn)動物病害發(fā)生[32]。氨氮是離子氨和非離子氨的總稱，氨氮的致毒性主要來自于非離子氨[33]。相關(guān)研究表明，機體受到氨氮脅迫會使體內(nèi)抗氧化酶活力受到抑制，使大量的自由基不能清除，對機體產(chǎn)生毒副作用[34]；亦有研究表明，長期處于氨氮應(yīng)激下的魚生長受阻、免疫力下降，甚至死亡[33]。本試驗結(jié)果顯示，氨氮應(yīng)激72和96 h，添加谷胱甘肽組的黃顙魚累積死亡率均低于對照組，其中G300組在2個時間點均顯著低于對照組，隨著添加量的增加，累積死亡率有所升高；而且，對照組在72 h時累計死亡率達到45.0%，而添加組達到40.0%以上的累積死亡率在96 h才出現(xiàn)。這說明，谷胱甘肽能夠提高黃顙魚幼魚抗氨氮應(yīng)激的能力，不僅能夠降低氨氮應(yīng)激后一定時間內(nèi)黃顙魚的死亡率，而且能夠延緩黃顙魚發(fā)生死亡的時間，同時，其對抗氨氮應(yīng)激能力的提升與添加量有關(guān)，過高的添加量可能會降低黃顙魚的抗氨氮應(yīng)激能力，這與高添加量不利于黃顙魚生長性能的提升效應(yīng)相似，這與在凡納濱對蝦[6]上的研究結(jié)果一致。谷胱甘肽提高黃顙魚抗氨氮應(yīng)激能力可能與谷胱甘肽自身的活性基團及其激活的酶(超氧化物氣化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶等)系統(tǒng)在體內(nèi)發(fā)揮的解毒作用有關(guān)[6,35]。研究發(fā)現(xiàn)，谷胱甘肽作為一種抗氧化劑，能通過提高動物機體抗氧化酶活性來提高抗氧化性能[36]。谷胱甘肽能降低氨氮應(yīng)激下黃顙魚的死亡率，可能源于谷胱甘肽提高了魚體內(nèi)各種抗氧化酶活性，表現(xiàn)為提高抗氧化能力，進而減輕氨氮應(yīng)激的氧化損傷，最終降低死亡率。此外，也有研究發(fā)現(xiàn)，谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶能催化谷胱甘肽的硫醇基與各種親電化合物相結(jié)合，增加親電化合物的可溶性，從而有利于其從細胞內(nèi)排出[37]。目前，對谷胱甘肽的解毒機制的研究還不夠系統(tǒng)，且關(guān)于谷胱甘肽對黃顙魚抗氨氮應(yīng)激能力影響的研究尚未見報道，其作用機理有待深入。

4 結(jié) 論

飼料中添加谷胱甘肽可以提高黃顙魚幼魚的生長性能、全魚粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量以及抗氨氮應(yīng)激能力。利用二次回歸方程擬合特定生長率和谷胱甘肽添加量，分析表明谷胱甘肽在黃顙魚幼魚飼料中適宜添加量為357.69 mg/kg。

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*Corresponding authors: CAO Junming, professor, E-mail: junmcao@163.com; HUANG Yanhua, professor, E-mail: huangyh111@126.com

EffectsofDietaryGlutathioneonGrowthPerformance,BodyComposition,SerumBiochemicalIndicesandAnti-Ammonia-NitrogenStressAbilityofJuvenileYellowCatfish(Pelteobagrusfulvidraco)

ZHOU Yanling1,2,3,4SUN Yuping2,3,4CAO Junming2,3,4*HUANG Yanhua2,3,4*WANG Guoxia2,3,4CHEN Bing2,3,4WANG Weimin1

(1.CollegeofFisheries,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China; 2.InstituteofAnimalScience,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,Guangzhou510640,China; 3.GuangdongPublicLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,Guangzhou510640,China; 4.GuangdongKeyLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,Guangzhou510640,China)

This experiment was conducted to investigate the effects of dietary glutathione on growth performance, body composition, serum biochemical indices and anti-ammonia-nitrogen stress ability of juvenile yellow catfish (Pelteobagrusfulvidraco). A total of 800 juvenile yellow catfish with the mean body weight of (1.32±0.01) g were randomly divided into 5 groups with 4 replicates per group and 40 fishes per replicate. Fish in the control group were fed a basal diet, and others in the experimental groups were fed the basal diets supplemented with 100, 300, 500 and 700 mg/kg glutathione, respectively. After 56 d feeding, ammonium chloride was used to conduct an ammonia nitrogen stress test in each group. The results showed as follows: 1) with the dietary glutathione additive amount increased, the weight gain rate, specific growth rate and protein efficiency rate increased at first but then decreased, achieving the maximum value at 300 mg/kg group, and 100 to 500 mg/kg groups were significantly higher than control group (P<0.05); the feed conversation ratio, condition factor and hepatosomatic index had no significant difference among all groups (P>0.05). 2) Compared with the control group, the whole-body crude protein content in 300 to 700 mg/kg groups and whole-body crude lipid content in 100 to 700 mg/kg groups were significantly increased (P<0.05). 3) Dietary glutathione had no significant effects on serum total protein, serum cholesterol and triglyceride, glucose, urea nitrogen contents and aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase activities (P>0.05). 4) After ammonia-nitrogen stress, the death time of juvenile yellow catfish of experimental groups was delayed than that of the control group, and at 96 h, the cumulative mortality rate of juvenile yellow catfish of experimental groups was decreased compared with the control group, and it was significantly decreased in 100 and 300 mg/kg groups (P<0.05). In conclusion, dietary glutathione can increase growth performance, whole-body crude protein and crude lipid contents and anti-ammonia-nitrogen stress ability. A quadratic regression analysis on specific growth rate against dietary glutathione additive amount indicated that the optimal additive amount of glutathione in the diet of juvenile yellow catfish was 357.69 mg/kg.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(11)：4189-4197]

glutathione; yellow catfish (Pelteobagrusfulvidraco); growth performance; body composition; serum biochemical indices; ammonia-nitrogen stress

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.11.043

S963.73

A

1006-267X(2017)11-4189-09

2017-05-11

2016年省級現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟建設(shè)項目(2016LM082，2016LM083)；2017年海洋和漁業(yè)發(fā)展專項資金(科技攻關(guān)與研發(fā))——“水產(chǎn)飼料添加劑GSH新產(chǎn)品研制及其護肝關(guān)鍵技術(shù)應(yīng)用示范”項目

周艷玲(1992—)，女，云南大理人，碩士研究生，從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料的研究。E-mail: lingguidandan@163.com

*通信作者:曹俊明，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail: junmcao@163.com；黃燕華，研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: huangyh111@126.com

(責(zé)任編輯 武海龍)