□ 周 宇 遼寧省食品檢驗檢測院 管娜巍 鞍山市食品藥品檢驗所 賈宏新 遼寧省食品檢驗檢測院

毛細管柱氣相色譜法同時測定白酒中甲醇和單體物質(zhì)

□ 周 宇 遼寧省食品檢驗檢測院 管娜巍 鞍山市食品藥品檢驗所 賈宏新 遼寧省食品檢驗檢測院

建立毛細管氣相色譜法同時測定白酒中甲醇和乙酸乙酯等各種主要單體物質(zhì)。色譜柱為Aglient DBWAX（30 m×0.250 mm×0.25 μm），檢測器為氫火焰離子化檢測器（FID），采用程序升溫方式，甲醇和幾種單體物質(zhì)得到了很好的分離，回收率、檢出限均滿足日常檢測。此方法適用于目前各種香型白酒的分析。

毛細管氣相色譜；甲醇；單體物質(zhì)

白酒是中國傳統(tǒng)的蒸餾酒，因自然環(huán)境、釀造原料、糖化發(fā)酵劑種類和生產(chǎn)工藝等因素的不同，形成了各具特色、風格典型的各種香型的白酒，比如濃香型白酒、清香型白酒、米香型白酒、豉香型白酒等[1]。白酒的風格特征與其微量成分有密切的關(guān)系。不同香型白酒需對其特征單體物質(zhì)進行檢測、評價，例如濃香型白酒的己酸乙酯、清香型白酒的乙酸乙酯、米香型白酒的乳酸乙酯和β-苯乙醇等。甲醇作為發(fā)酵過程中的微量副產(chǎn)物，也是白酒衛(wèi)生標準中必檢的項目。因此，迫切需要一種有效、快速的檢測方法[2]。目前，GB/T5009.48-2003標準中甲醇的分析仍然使用填充柱氣相色譜法，柱效低，無法同時檢測白酒中多種單體物質(zhì)[3]。本實驗使用毛細管柱氣相色譜法同時檢測白酒中甲醇和各種特征單體物質(zhì)，通過標準物質(zhì)及回收率等驗證，取得滿意的分析效果[4,5]。本法具有分析速度快、效率高的特點，為白酒的檢測、評價提供了技術(shù)依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器：Scion 456-GC型氣象色譜儀（上海天美公司）、附氫火焰離子化檢測器（FID）、毛細管色譜柱，Aglient DB-WAX（30 m×0.250 mm×0.25 μm）。

試劑：乙醇（色譜純）。標準物質(zhì)：甲醇、乙酸乙酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和β-苯乙醇，均為色譜純。內(nèi)標物：乙酸正戊酯（色譜純）。

1.2 測定方法

色譜條件：柱溫40 ℃保持10 min，20 ℃/min升溫至230 ℃并保持5 min；進樣口溫度：250 ℃；分流比：50︰1；檢測器溫度250 ℃；柱流量：1.0 mL/min；氫氣：30.0 mL/min；空氣：300.0 mL/min；尾吹氣：30.0 mL/min；進樣量：1 μL。

標準溶液的配制：精密量取色譜純甲醇、乙酸乙酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和β-苯乙醇各1.00克，用50%乙醇（色譜純）稀釋至50.0 mL，各物質(zhì)濃度均為20.0 g/L，此溶液為標準貯備液。根據(jù)需要可將標準貯備液稀釋至各濃度標準上機液。本實驗根據(jù)白酒中各物質(zhì)限量要求，分別吸取標準貯備液0.50、1.00、2.00、5.00 mL和10.00 mL用50%乙醇（色譜純）稀釋至50.0 mL，濃度分別為 0.2、0.4、0.8、2.0 g/L 和 4.0 g/L。各上機液均加入1.00 mL乙酸正戊酯（色譜純）作為內(nèi)標。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件優(yōu)化

本實驗研究了柱溫等因素對分離的影響。柱溫對分離的影響最大，初始柱溫由100 ℃逐漸降到40 ℃，每10℃為一個梯度，發(fā)現(xiàn)直到初始柱溫為100 ℃時，乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酸乙酯4個組分的峰未分開，逐漸降低初始溫度，分離度逐漸變好。當初始溫度降到40 ℃時，七種物質(zhì)和內(nèi)標物均實現(xiàn)基線分離，見圖1。初始溫度可以使用小于40 ℃的溫度，但是分析速度較慢，且容易受環(huán)境溫度的影響。因此，將溫度條件設(shè)置為40 ℃保持10 min，20 ℃/min升溫至230 ℃并保持5 min。β-苯乙醇的沸點為219 ℃，且白酒中揮發(fā)性物質(zhì)較多，建議將進樣口溫度和檢測器溫度設(shè)置為250 ℃。柱流量對分離影響不顯著，設(shè)定柱流量為1.0 mL/min。

2.2 回歸方程、線性范圍和檢出限

圖1 8種混合物質(zhì)的色譜圖

表1 標準曲線及檢出限

表2 樣品分析結(jié)果

表3 三水平回收測定結(jié)果

按照上述配制標準溶液，以濃度為橫坐標，響應值為縱坐標，計算標準曲線、相關(guān)系數(shù)、檢出限，結(jié)果見表1。從表1數(shù)據(jù)可以看出，各物質(zhì)曲線相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，由于各種酒類標準中對單體物質(zhì)的要求均在0～4.0 g/L，因此本實驗的線性范圍滿足日常白酒的檢測。

2.3 標準物質(zhì)驗證

對GBW（E）100012-100013白酒色譜分析標準物質(zhì)進行了測試，結(jié)果見表2。測量結(jié)果均在證書標示值范圍內(nèi)。

2.4 回收率實驗

向樣品中加入三水平的標準品，分別進行回收率實驗，結(jié)果見表3?；厥章示?0%～110%，表明本法回收率滿足標準要求。

3 結(jié)論

本實驗使用毛細管柱測定白酒中的多種成分，實驗結(jié)果表明，本方法靈敏度高、準確度好、分析時間較短，適用于各種香型白酒單體物質(zhì)及有害物質(zhì)的分析，為各種白酒的分析及調(diào)配提供了檢測依據(jù)。

[1]李燕,張燕,張書文.氣相色譜法同時測定白酒中的特征香氣成分[J].化學分析計量,2008(6):59-61.

[2]王先桂,曾丹,郭坤亮.傳統(tǒng)十種白酒香型骨架成分的親緣性分析[J].中國釀造,2013(9):82-87.

[3]蔡嶸 ,朱杰 ,彭謙 ,等 .毛細管柱氣相色譜法同時測定白酒中12種有機物質(zhì)[J].中國衛(wèi)生檢驗雜質(zhì),2007(3):392-393.

[4]張倩,郝金竹.白酒色譜分析標準物質(zhì)在毛細管柱氣相色譜法中的應用[J].釀酒科技,2011(9):32-34.

[5]陳發(fā)河,吳光斌.毛細管氣相色譜法測定白酒中的甲醇、乙酸乙酯和雜醇油[J].食品科學,2007(1):232-233.

遼寧省科學實驗研究基金項目（編號：GY2014-D-028）。

周宇（1980—），男，遼寧沈陽人，本科，高級工程師。研究方向：食品檢驗（光譜、色譜分析）。