張媛媛

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 淮安 223300）

淮安市兒童急性呼吸道感染病原學(xué)分析

張媛媛

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 淮安 223300）

目的 探討急性呼吸道感染（ARI）患兒呼吸道病原體的感染情況及季節(jié)流行特點(diǎn)，為臨床實(shí)施行之有效地預(yù)防和診治提供依據(jù)。方法 應(yīng)用間接免疫熒光法（IFA）檢測(cè)該院2015年1月-2015年12月3 461例0～12歲ARI患兒血清中呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）、副流感病毒（PIV）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）、嗜肺軍團(tuán)菌（LP）IgM抗體。結(jié)果 3 461份血清中呼吸道感染病原體IgM抗體陽性檢出率為69.17%，最常檢測(cè)到的病原體是FluB（51.11%）、FluA（36.38%）、MP（25.14%）和RSV（9.04%）。FluA、FluB和MP感染無明顯季節(jié)性，檢出率整年均較高；RSV呈現(xiàn)流行高峰在冬、春季；ADV和CP為春、夏季多發(fā)；PIV和LP發(fā)病率終年較低。隨年齡增長(zhǎng)RSV發(fā)病率下降，而其他病原體則相反。病原體混合感染檢出1 627例，占47.01%；混合感染最常見病原體為FluA+FluB和FluA+FluB+MP。結(jié)論 淮安地區(qū)2015年8種呼吸道病原體陽性率達(dá)69.17%，以FluB檢出率最高；呼吸道病原體感染的流行季節(jié)各有不同；伴隨年齡的增長(zhǎng)RSV陽性率降低，而其他病原體陽性率則逐步增長(zhǎng)；以FluA和FluB的混合感染為最多見；早期檢測(cè)呼吸道病原體，將有助于兒科醫(yī)生診治和控制呼吸道感染。

兒童；急性呼吸道感染；病原體；間接免疫熒光法

Abstract:Objective To investigate respiratory pathogensand seasonalepidemic featuresofacute respiratory tract infections in children so as to provide the basis for effective clinical prevention and treatment.Methods Indirect immunofluorescence assay was utilized to detect serum IgM antibodies against respiratory viruses and atypical pathogens from 3,461 children of 0-12 years with acute respiratory tract infections in our hospital between January 2015 and December 2015.The pathogens includedRespiratory syncytial virus(RSV),Adenovirus(ADV),Influenza A virus(FluA),Influenza B virus(FluB),Parainfluenza virus(PIV),Mycoplasma pneumonia(MP),Chamydophila pneumonia(CP),andLegionella pneumophila(LP).Results Of 3,461 serum samples detected,the total IgM positive rate of respiratory tract infection pathogens was 69.17%.The most frequently detected pathogens were FluB (51.11%),FluA (36.38%),MP (25.14%)and RSV (9.04%).The detection rates of FluA,FluB and MP infections did not exhibit a pronounced seasonality and kept at a high level almost throughout the year.RSV epidemic peak appeared in winter and spring.ADV and CP had higher detection rates in spring and summer.PIV and LP kept at a low level throughout the year.While RSV incidence decreased significantly along with the age growth,the opposite was observed for infections of other pathogens.Mixed-infections of pathogens were detected in 1,627 cases with the positive rate of 47.01%.The most common pathogens in the co-infections were FluA+FluB and FluA+FluB+MP.Conclusions The total positive rate of 8 kinds of respiratory pathogens was 69.17%in Huaian in 2015,andthe positive rate of FluB was the highest.The incidences of the infections caused by the respiratory pathogens varied in the seasons.With the growth of the age,the positive rate of RSV was significantly decreased,while the positive rates of other pathogens were gradually increased.FluA and FluB were the most common in mixed infections.Early detection of respiratory pathogens will be helpful for pediatricians to diagnose,treat and control respiratory tract infections.

Keywords:children;acute respiratory tract infection;pathogen;indirect immunofluorescence

急性呼吸道感染（acute respiratory infection，ARI）是兒科常見的感染性疾病，在發(fā)展中國(guó)家更是對(duì)兒童健康主要的、嚴(yán)重的威脅。病毒、非典型性病原體是引發(fā)ARI的多見病因[1-3]。本研究檢測(cè)2015年淮安地區(qū)本院兒科門診和住院3 461例ARI兒童血清8種呼吸道病原體免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）抗體，并分析其檢測(cè)結(jié)果，旨在探討本地區(qū)兒童急性呼吸道感染的病因，更深刻地了解各種呼吸道病原體的流行特點(diǎn)，指導(dǎo)兒科實(shí)施早期臨床診治和控制呼吸道感染。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年1月-2015年12月南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院兒科門診和住院ARI患兒3 461例。其中，男性2 236例，女性1 225例；年齡0～12歲；年齡 ＜1歲組1 215例，1～＜3歲組 977例，3～＜6歲組 676例，6～12歲組 593例。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

低速臺(tái)式離心機(jī)為北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司產(chǎn)品，EUROStarⅢ增強(qiáng)型熒光顯微鏡由德國(guó)呂貝克EUROIMMUN公司提供，8種呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒（間接免疫熒光法）由德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司提供。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 取患兒外周靜脈血2 ml，3 500 r/min離心5 min，留取血清。

1.3.2 呼吸道病原體譜IgM抗體檢測(cè) 采用間接免疫熒光法同時(shí)檢測(cè)血清中的呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、甲型流感病毒（fluenza A virus，F(xiàn)lu-A）、乙型流感病毒（influenza virusB，F(xiàn)luB）、副流感病毒（parainfluenza virus，PIV）、肺炎支原體（mycoplasma pneumonia，MP）、肺炎衣原體（chamydophila pneumonia，CP）、嗜肺軍團(tuán)菌 （legionella pneumophila，LP）IgM抗體，嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行操作。將稀釋的患兒血清與包被有檢測(cè)基質(zhì)的載片溫育，如果樣本陽性，特異性IgM抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合；在第二步溫育時(shí)，結(jié)合的抗體與熒光素標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體反應(yīng)，然后在熒光顯微鏡下觀察特異性的熒光模型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以率表示，用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病原體I gM抗體陽性率

3 461例患兒血清中檢出呼吸道病原體IgM抗體陽性2 394例，總陽性率為69.17%；其中FluB IgM檢出陽性率居首位，達(dá)51.11%，其他依次為FluA、MP、RSV、ADV、PIV、CP及 LP。見表 1。

表1 8種呼吸道病原體I gM抗體陽性檢出率

2.2 呼吸道感染病原體季節(jié)分布

FluA、FluB及MP感染無明顯季節(jié)性，整年均表現(xiàn)出高發(fā)趨勢(shì)；RSV感染高峰在冬、春季；ADV和CP為春、夏季多發(fā)；PIV和LP發(fā)病率終年較低。見表2。

2.3 呼吸道病原體I gM抗體不同月份分布

FluA、FluB及MP感染終年陽性檢出率均較高，F(xiàn)luA于3～6月多發(fā)，F(xiàn)luB高峰呈現(xiàn)于10和11月份，MP以1和5月份多見，RSV好發(fā)于1、4和5月份，ADV在5和7月份高發(fā)，PIV、CP、LP檢出率整年均較低。見圖1。

表2 不同季節(jié)8種呼吸道病原體I gM抗體檢出陽性率 例（%）

圖1 不同月份8種呼吸道病原體I gM抗體分布情況

2.4 不同年齡段患兒呼吸道病原體I gM抗體檢出情況

年齡 ＜1歲、1～＜3歲、3～＜6歲及 6～12歲陽性檢出率分別為41.23%、72.88%、93.05%及92.24%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。8種呼吸道病原體IgM抗體陽性率在各年齡段之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。伴隨年齡的增長(zhǎng)，RSV陽性率降低，而其他病原體IgM抗體陽性率則逐步增長(zhǎng)。見表3和圖2。

2.5 呼吸道病原體混合感染情況

同時(shí)檢出≥2種病原體混合感染的患兒1 627例，占47.01%；FluA+FluB 2種病原體混合感染的構(gòu)成比最高，達(dá)33.56%，其次是FluB+MP，占10.02%；3種病原體多重感染中以FluA+FluB+MP為最多，占22.50%，其次是 ADV+FluA+FluB，占 2.95%；4種病原體多重感染以FluA+FluB+MP+CP為最多，占1.91%；5種病原體混合感染中以ADV+FluA+FluB+MP+CP為最多，占0.25%；其余模式混合感染構(gòu)成比均較低，占7.68%。見表4。

表3 不同年齡段患兒呼吸道病原體I gM抗體檢出情況 例（%）

圖2 不同年齡段患兒呼吸道病原體I gM抗體檢出情況

表4 呼吸道病原體混合感染的分布情況 例（%）

續(xù)表4

3 討論

兒童急性呼吸道感染發(fā)病急，病情進(jìn)展迅速，容易反復(fù)，可導(dǎo)致多系統(tǒng)、多器官的損傷[4]，癥象輕重不一，臨床難以區(qū)分[5-8]，因而呼吸道病原的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)有助于兒科醫(yī)生做出早期診斷及對(duì)應(yīng)治療方案。

作為近期感染標(biāo)志的特異性抗體是IgM，近年臨床廣泛利用血清呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測(cè)，以達(dá)到對(duì)兒童急性呼吸道感染快速早期診斷的目的[9]。本研究使用德國(guó)歐蒙公司研發(fā)的間接免疫熒光技術(shù)，同時(shí)檢測(cè)血清8種常見呼吸道病毒及非典型病原體特異性IgM抗體。該方法具備快速檢測(cè)、簡(jiǎn)易操作、熒光結(jié)果穩(wěn)定可信、低成本等優(yōu)勢(shì)，相宜臨床兒科須要[10]。

本研究表明，3 461例急性呼吸道感染患兒血清8種呼吸道病原體特異性IgM陽性率為69.17%，相對(duì)低于有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[11-12]。FluA、FluB、MP及RSV是引發(fā)淮安地區(qū)兒童急性呼吸道感染的首要病原體。呼吸道病原體感染狀況于不同的季節(jié)和不同的月份有差異。研究結(jié)果顯示，F(xiàn)luA、FluB及MP感染無明顯季節(jié)性，呈現(xiàn)出整年高發(fā)趨向；RSV感染高峰在冬春季，與FABBIANI等[13]報(bào)道相似，并于1和4月份各出現(xiàn)一檢出高峰，陽性率分別達(dá)11.68%和13.54%；ADV和CP均為春夏季多發(fā)，ADV于5和7 2個(gè)月份陽性率最高，陽性率分別為10.74%和14.22%，與LI等[14]研究發(fā)現(xiàn)，ADV伴隨溫度的升高而感染增加的結(jié)論相一致，而CP于5和6月份檢出率最高，分別為8.26%和7.24%；PIV和LP發(fā)病率終年較低。該項(xiàng)研究結(jié)果不與全國(guó)其他地區(qū)一致，這或許是呼吸道感染病原體在方法論、人群易感性及不同地域、年份、環(huán)境氣候等流行病學(xué)特征差異的緣故[12]。

本研究發(fā)現(xiàn)，8種呼吸道病原體IgM抗體陽性率在不同的年齡段間比較有差異，伴隨年齡的不斷增長(zhǎng)RSV陽性率降低，而其他病原體IgM抗體陽性率則在逐步增高。在年齡＜1歲和1～＜3歲年齡患兒RSV檢出陽性率最高，分別為19.09%和5.63%，與國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道的RSV是引發(fā)嬰幼兒呼吸道感染的主要病原體結(jié)論一致[15-18]。除RSV外的7種呼吸道病原體感染在學(xué)齡前和學(xué)齡期較嬰幼兒時(shí)期陽性檢出率高，也許是源于母親的抗體在學(xué)齡前和學(xué)齡期蕩然無存，幼兒園、學(xué)校的活動(dòng)范圍逐漸增大，自身免疫系統(tǒng)跟著年齡的增長(zhǎng)而逐步發(fā)育完善，特異性IgM抗體可在呼吸道病原體感染后充足產(chǎn)生，而造成發(fā)病率增高。

本研究顯示，同步檢測(cè)出≥2種病原體的多重感染患兒占44.87%；2種病原體混合感染以FluA+FluB多見，其次是FluB+MP，與PENG等[19]報(bào)道結(jié)論一致；3種病原體多重感染以FluA+FluB+MP最多，其次是ADV+FluA+FluB；4種病原體混合感染FluA+FluB+MP+CP較多見。造成多重感染的源由或許為某一種病原體感染后破壞呼吸道黏膜，呼吸系統(tǒng)免疫功能低下，促使其他病原體更輕易乘虛而入，引致繼發(fā)感染或交叉感染。

兒童呼吸道感染仍然是一個(gè)全世界范圍關(guān)注的健康問題。由于根據(jù)急性呼吸道感染患兒所表現(xiàn)出的臨床癥狀通常是不能區(qū)分病因?yàn)椴《净蚍堑湫筒≡w的感染，所以快速可靠的診斷工具將有利于更好地進(jìn)行抗生素管理和執(zhí)行適當(dāng)?shù)母腥究刂拼胧20]。綜上所述，本研究利用間接免疫熒光法檢測(cè)8種血清呼吸道病原體IgM抗體，不僅提供本地區(qū)兒童急性呼吸道感染的病因?qū)W證據(jù)，而且拓展對(duì)兒童ARI病原體流行病學(xué)特點(diǎn)的了解，將有助于兒科醫(yī)生更有效地診治和控制呼吸道感染。

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（童穎丹 編輯）

Etiology of acute respiratory tract infections in children in Huaian

Yuan-yuan Zhang
(Clinical Laboratory,Huaian First People's Hospital,Nanjing Medical University,Huaian,Jiangsu 223300,China)

R725.6

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.23.020

1005-8982（2017）23-0095-05

2016-05-31