潘海敏，楊 梅，趙瑞婷

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 南京 210029；2.重慶市中醫(yī)院，重慶 400011)

溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)小鼠腸推進(jìn)和胃排空的影響①

潘海敏1，楊 梅2，趙瑞婷2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 南京 210029；2.重慶市中醫(yī)院，重慶 400011)

目的：觀察溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)小鼠腸推進(jìn)和胃排空的影響。方法：70只ICR小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、莫沙必利組(2mg/kg)、麻仁丸組(2.5g/kg)、溫胃調(diào)腸顆粒低、 中、 高(5g/kg、10g/kg、20g/kg)劑量組。用營養(yǎng)性半固體糊灌胃法觀察溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)在體小鼠小腸推進(jìn)率和胃排空率的變化。結(jié)果：溫胃調(diào)腸顆粒高、中、低劑量均能不同程度增加排便粒數(shù)及糞便質(zhì)量，促進(jìn)阿托品負(fù)荷小鼠胃排空，小腸推進(jìn)，與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論：溫胃調(diào)腸顆?？梢源龠M(jìn)胃排空及排便，增加小腸蠕動(dòng)，其機(jī)制可能與M膽堿受體有關(guān)。

溫胃調(diào)腸顆粒；腸推進(jìn)；胃排空

很多胃腸功能紊亂性疾病發(fā)病原因不明，重要在調(diào)節(jié)胃腸功能紊亂方面有著顯著優(yōu)勢(shì)。溫胃調(diào)腸顆粒主要是在柴胡疏肝散基礎(chǔ)上，經(jīng)拆方加減而成，其具有疏肝解郁、益氣健脾的功效，在臨床應(yīng)用中對(duì)于胃腸道功能的調(diào)節(jié)效果顯著。本研究通過觀察溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠排便、腸推進(jìn)和胃排空的影響，探討其可能的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR種小鼠70只，體重18～22g，雄性，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，生產(chǎn)許可證：SCXK(滬)2012-0002。

1.2 藥物和試劑

溫胃調(diào)腸顆粒(重慶市中醫(yī)院，批號(hào)：20150802)；麻仁丸(南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)：120207)；硫酸阿托品注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批號(hào)：20125376)；羧甲基纖維素鈉(重慶力宏精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：20124158)；奶粉(雅士利國際集團(tuán)有限公司，批號(hào)：1532060)；糖(安琪酵母(赤峰)有限公司，批號(hào)：2013486430)；淀粉(昆山臻樂門食品有限公司，批號(hào)：186310574)；活性炭(無錫市亞泰聯(lián)合化工有限公司，批號(hào)：20128527)。

2 實(shí)驗(yàn)方法[1～3]

2.1 對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠排便的影響

70只ICR小鼠隨機(jī)分為7組，每組10只，即正常對(duì)照組、模型組、西藥陽性藥莫沙必利組(2mg/kg)、中藥陽性藥麻仁丸組(2.5g/kg)、溫胃調(diào)腸顆粒低、 中、 高(5g/kg、10g/kg、20g/kg)劑量組。連續(xù)灌胃給藥3d，空白組給予等量的生理鹽水。3d后，各組小鼠禁食不禁水12h。第4天各組再給藥一次，30min后，除空白對(duì)照組外，余各組小鼠腹腔注射硫酸阿托品(2mg/kg)；30min后，各個(gè)小鼠灌胃半固體糊0.1mL/10g，動(dòng)物均單籠飼養(yǎng)，正常飲水進(jìn)食。半固體糊的配制方法為：精密稱取羧甲基纖維素鈉 10g ，溶于250mL蒸餾水中，加入奶粉16g，糖8g，淀粉8g，活性炭末2g攪拌均勻配制成300mL的黑色半固體糊狀物(1g/mL)，冰箱冷藏，用時(shí)恢復(fù)至室溫。從灌胃半固體糊開始，記錄每只動(dòng)物首粒排黑便時(shí)間，5h內(nèi)排便粒數(shù)、質(zhì)量，5h內(nèi)排黑便粒數(shù)、質(zhì)量。收集的糞便在105℃烘干至質(zhì)量恒定，測(cè)定糞便含水率。糞便含水率(%)=(1-烘干后質(zhì)量/烘干前質(zhì)量)×100。

2.2 對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠胃排空的影響

阿托品負(fù)荷小鼠排便實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，給予各組小鼠適量的食物和水，晚上開始禁食不禁水12h后，各組再給藥一次，30min后，除空白對(duì)照組外，余各組小鼠再次腹腔注射硫酸阿托品(2mg/kg)，30min后小鼠灌胃半固體糊0.1mL/10g，20min后頸椎脫臼處死小鼠，打開各小鼠腹腔分離腸系膜，用尼龍線結(jié)扎胃幽門和胃賁門，摘除小鼠胃，稱胃及其內(nèi)容物的總重。將取出的胃放入小燒杯中，加蒸餾水10mL，沿胃大彎將胃剪開，充分洗下胃內(nèi)及胃壁附著的糊狀物。洗干凈后用將附著的水用吸水紙吸干，稱胃凈重。計(jì)算胃內(nèi)殘留物質(zhì)量占所灌碳末營養(yǎng)半固體糊質(zhì)量百分比，即為胃殘留率。胃殘留率(% )= (胃全重-胃凈重) /碳末半固體糊質(zhì)量×100%。

2.3 對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠腸推進(jìn)的影響

在進(jìn)行阿托品負(fù)荷小鼠胃排空實(shí)驗(yàn)時(shí)，同時(shí)進(jìn)行阿托品負(fù)荷小鼠腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)。各組小鼠切除胃后，用眼科剪刀，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，將小腸輕輕拉成直線進(jìn)行長(zhǎng)度的測(cè)量。腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”，從幽門至碳末半固體糊前沿(半固體糊為黑色，肉眼可見)為“推進(jìn)長(zhǎng)度”。小腸推進(jìn)比(%) =(推進(jìn)長(zhǎng)度/小腸總長(zhǎng)度)×100%。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠排便的影響

模型組小鼠第1次排黑便時(shí)間顯著比正常對(duì)照組長(zhǎng)(P<0.01)，溫胃調(diào)腸顆粒高、中、低劑量能不同程度縮短排黑便時(shí)間，與模型組有顯著性差異(P<0.01)；在5h內(nèi)，便秘模型組小鼠的排便粒數(shù)及糞便質(zhì)量顯著低于正常對(duì)照組(P<0.01)，而溫胃調(diào)腸顆粒高、中、低劑量能不同程度增加排便粒數(shù)及糞便質(zhì)量(P<0.01)。見表1。

表1 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠排便的影響±s，n=10)

注：模型與空白組比較##P<0.01，給藥組組與模型組比較*P<0.05 ，**P<0.01。

3.2 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠胃排空的影響

阿托品負(fù)荷小鼠胃排空明顯降低，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.01)。溫胃調(diào)腸顆粒高、中、低劑量組對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠胃排空有促進(jìn)作用，與模型組比較有顯著差異(P<0.01)。見表2。

表2 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)小鼠胃排空的影響±s，n=10)

注：模型與空白組比較##P<0.01，給藥組組與模型組比較

*P<0.05 ，**P<0.01。

3.3 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠腸推進(jìn)的影響

阿托品負(fù)荷小鼠腸推進(jìn)率明顯降低，與空白組比較有顯著性差異(P<0.01)。溫胃調(diào)腸顆粒高、中、低劑量組對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠腸推進(jìn)有促進(jìn)作用，與模型組比較有顯著差異(P<0.01)。見表3。

表3 溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠腸 推進(jìn)的影響

注：模型與空白組比較##P<0.01，給藥組組與模型組比較

*P<0.05 ，**P<0.01。

4 討論

胃腸道運(yùn)動(dòng)是消化系生理功能的重要組成部分。 在完整的機(jī)體內(nèi)環(huán)境中，胃腸道運(yùn)動(dòng)同時(shí)受到內(nèi)在神經(jīng)叢、外來神經(jīng)和多種體液因素的共同調(diào)節(jié)，其功能紊亂也是引起消化系統(tǒng)癥狀的重要因素之一。阿托品作為非選擇性M膽堿能受體的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑，通過產(chǎn)生抑制乙酰膽堿的作用，從而降低胃腸道平滑肌的興奮性，降低腸道蠕動(dòng)的幅度和頻率[4]。生理狀態(tài)時(shí)的胃腸動(dòng)力的調(diào)節(jié)機(jī)制就非常復(fù)雜，包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)遞質(zhì)、腸神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸激素等在內(nèi)的多種因素共同調(diào)節(jié)胃腸的動(dòng)力。就目前而言，并無特定的動(dòng)物模型來研究胃腸動(dòng)力障礙。但是胃排空和腸蠕動(dòng)又是胃腸動(dòng)力的基礎(chǔ)，是研究胃腸動(dòng)力的關(guān)鍵指標(biāo)，因此模擬出胃腸動(dòng)力不足也是眾多學(xué)者所追求的，所以本研究中應(yīng)用了較多學(xué)者使用的阿托品負(fù)荷小鼠模型。另外，本試驗(yàn)采用的營養(yǎng)性半固體糊食物，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)接近日常食物，能更接近反映藥物對(duì)胃排空生理機(jī)能的影響。同時(shí)在營養(yǎng)性半固體糊中加入炭末，可以察藥物對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響，同時(shí)節(jié)省成本[5]。通過將溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品負(fù)荷小鼠的作用的實(shí)驗(yàn)證實(shí)：溫胃調(diào)腸顆?？梢燥@著促進(jìn)阿托品負(fù)荷小鼠的小腸推進(jìn)作用，將模型小鼠的腸推進(jìn)率從32.24%提高至39.28%～45.34%?？s短其排便時(shí)間約40min，并顯著增加阿托品負(fù)荷小鼠的糞便粒數(shù)。同時(shí)，提高阿托品小鼠的胃動(dòng)力，溫胃調(diào)腸顆粒中高劑量組的胃內(nèi)殘留物顯著減少。由此說明溫胃調(diào)腸顆粒對(duì)阿托品小鼠都具有促進(jìn)胃腸動(dòng)力的作用，為其臨床應(yīng)用提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1]朱麗娜,劉賢武,朱紅云,等.五種不同基源石斛對(duì)小鼠腸推進(jìn)及胃排空的影響[J].中藥與臨床,2012,3(1):11-14

[2]張三印,孫改俠,馮蓓.不同山楂炮制品對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的影響研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2010,5(31):60

[3]楊超燕,廖華衛(wèi),陳艷芬,等.銀絲草水提取物對(duì)小鼠胃排空和小腸推進(jìn)的影響[J].中藥材,2013,36(5):801-803

[4]楊建中,高冉冉,孫樹強(qiáng),等.兩種不同阿托品給藥方式治療有機(jī)磷中毒的臨床療效Meta分析[J].中國全科醫(yī)學(xué), 2014,17(6):671-674

[5]邢建峰,封衛(wèi)毅,侯家玉.小鼠胃排空及小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法的探討[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2003,26(4):50-52

Highlights: Objective: To observe the effects of Wenweitiaochang Granules on small intestinal propulsive and gastric emptying in mice. Method: 70 ICR mice were randomly divided into normal control group, model group, mosapride group (2mg/kg), the maren pills group (2.5g/kg), high, medium and low concentration of Wenweitiaochang Granules (5g/kg, 10g/kg, 20g/kg) group. Nutritional semisolid paste was used to observe the change of small intestinal propulsive ratio and gastric emptying rate. Result: High, medium and low concentration of Wenweitiaochang Granules could increase grain number and quality of feces, promote the gastric emptying and small intestinal propulsive rate in atropine load mice, as compared to model group (P<0.01). Conclusion:Wenweitiaochang Granules can promote gastric emptying, increase the movement of small bowel. These results may be related to M cholinergic receptor.

Effects of Wenweitiaochang Granules on small intestinal propulsive and gastric emptying in mice

PANHai-min1,YANGMei2,ZHAORui-ting2

(1.Affiliated Hospital of Nanjing University of TCM, Nanjing 210029,China；2.Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital,Chongqing 400011,China)

Wenweitiaochang Granules; small intestinal propulsive; gastric emptying

潘海敏(1982～)女，江蘇南京人，大學(xué)本科，主管中藥師。

R285.6

B

1008-0104(2017)04-0101-02

2017-03-12)