田瑤，韓奇鵬，陳宇光，張佩華，王加啟，張仁富

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院畜禽遺傳改良湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)沙410128；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100094；3.湘西自治州畜牧工作站，湖南吉首416000）

液態(tài)奶乳果糖的研究與應(yīng)用

田瑤1，韓奇鵬1，陳宇光1，張佩華1，王加啟2，張仁富3

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院畜禽遺傳改良湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)沙410128；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100094；3.湘西自治州畜牧工作站，湖南吉首416000）

針對(duì)乳果糖的概念、結(jié)構(gòu)、檢測(cè)方法及其在不同加工工藝下含量變化規(guī)律的研究和乳品質(zhì)質(zhì)量評(píng)定中的應(yīng)用等方面進(jìn)行論述，為探尋與生產(chǎn)實(shí)際相結(jié)合的乳果糖檢測(cè)新方法體系提供理論參考。

液態(tài)奶；乳果糖；熱處理；

0 引言

很多國(guó)家（德國(guó)和奧地利等）對(duì)延長(zhǎng)新鮮液態(tài)乳的貨架期越來(lái)越重視[1-3]?，F(xiàn)在延長(zhǎng)新鮮液態(tài)乳貨架期（extended shelf life，ESL）一般采用巴氏滅菌、超高溫瞬時(shí)(ultra-high-temperature，UHT)滅菌、保持滅菌等加工工藝進(jìn)行熱處理[4-5]，進(jìn)而殺死新鮮液態(tài)乳中的腐敗菌和病原微生物等，但同時(shí)會(huì)引起一系列的化學(xué)反應(yīng)、某些營(yíng)養(yǎng)成分的變化及產(chǎn)生新的物質(zhì)等[6-7]，從而造成新鮮液態(tài)乳營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的下降。所以評(píng)價(jià)液態(tài)乳在熱加工處理中的受熱強(qiáng)度對(duì)監(jiān)測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量、規(guī)范生產(chǎn)規(guī)程和保護(hù)消費(fèi)者合法權(quán)益有著十分重要的意義[8]。目前新鮮液態(tài)奶熱處理工藝評(píng)定的重要指標(biāo)之一的乳果糖（4-0-β-galactopyranosyl-D-fructo-fura?nose，Lactulose）備受世界關(guān)注。本文主要針對(duì)乳果糖結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、檢測(cè)方法和不同熱處理下的變化規(guī)律及在評(píng)價(jià)體系中的應(yīng)用進(jìn)行探討。

1 液態(tài)奶乳果糖的概念與結(jié)構(gòu)

20世紀(jì)50年代Adachi首次發(fā)現(xiàn)，在加熱牛奶過(guò)程中，酪蛋游離氨基集團(tuán)催化乳糖（Lactose）堿基異構(gòu)化生成的一種合成雙糖叫乳果糖[9-10]，又被稱為乳酮糖（Lactulax；Constilac；Duphalac）、半乳糖苷果糖、1-4-β-半乳糖苷果糖，其可通過(guò)β-D半乳糖苷酶水解生成含一分子果糖和一分子半乳糖，反應(yīng)式如圖1[11]。隨后Andrews研究發(fā)現(xiàn)Amadori重排反應(yīng)和LA轉(zhuǎn)運(yùn)是乳果糖形成的主要條件。1960年Richards和Chan?drasekhara在55℃貯存21 d的脫脂乳粉中檢測(cè)到乳果糖[12]。當(dāng)然，乳糖異構(gòu)還會(huì)新生成一些其它物質(zhì)，如氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)生成糠氨酸及賴氨酸和丙氨酸交聯(lián)產(chǎn)生的賴丙氨酸等[13-15]。

2 液態(tài)奶乳果糖的檢測(cè)方法

眾所周知目前有很多適合檢測(cè)新鮮液態(tài)乳中乳果糖質(zhì)量濃度的方法[16-21]。乳果糖主要檢測(cè)方法有：生物傳感器法[22]、氣相色譜法（gas chromatography，GC）[23]、安培電流計(jì)法、離子交換色譜法[24]、MTT顯色法、微分pH計(jì)法[25]、及普及性和穩(wěn)定性較強(qiáng)的HPLC[26-28]和酶解法（測(cè)定產(chǎn)生果糖量計(jì)算生乳中乳果糖的質(zhì)量濃度）[29]及比高效液相色譜法(highperfor?mance liquid chromatography，HPLC)更加簡(jiǎn)單、快捷及成本較低的彌漫反射傅里葉變換紅外光譜學(xué)檢測(cè)法[30-31]等。目前我國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)使用的是乳果糖酶解法的檢測(cè)方法（標(biāo)準(zhǔn)NY/T 939-2005），而國(guó)際上則應(yīng)用的是ISO發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)：《Milk-determination of Lactu?lose Content-Enzymatic Method》（ISO 11285-2004）[29]和《Heat-treated Milk-determination of Lactulose Con?tent-method Using High-performance-liquid Chroma?tography》（ISO 11868-1997）[32]。此外，Renzo Marsili等[33]應(yīng)用陽(yáng)離子蒸發(fā)光散射檢測(cè)器及采用內(nèi)標(biāo)法精確地檢測(cè)了乳果糖。Simon C.Fleming等[34]通過(guò)陰離子脈沖安培檢測(cè)器檢測(cè)了乳果糖的質(zhì)量濃度等。

2.1 酶法

酶法根據(jù)酶促反應(yīng)原理，添加酶量和培養(yǎng)溫度不同可分為ISO標(biāo)準(zhǔn)酶法和快速酶法。有研究表明，添加酶量越大、培養(yǎng)溫度越高，乳果糖完全水解所需的時(shí)間越短[35]；溫度較低會(huì)影響β-半乳糖苷酶的水解作用（最適溫度為43～53℃，其中來(lái)源曲霉的最適溫度為55℃）；黃萌萌等（2007）參考上述研究結(jié)果和ISO標(biāo)準(zhǔn)酶法（β-半乳糖苷酶水解乳果糖的培養(yǎng)溫度為40℃）[29]，對(duì)ISO標(biāo)準(zhǔn)酶法中水解乳果糖的步驟進(jìn)行改進(jìn)，提出了快速測(cè)定牛乳乳果糖的方法，稱為快速酶法（5.00 mL樣品中加入300 Uβ-半乳糖苷酶懸浮液，50℃培養(yǎng)1 h）[36]?？焖倜阜蓽?zhǔn)確測(cè)定巴氏殺菌乳和生鮮牛乳的乳果糖質(zhì)量濃度，并可用做區(qū)分UHT滅菌乳和巴氏殺菌乳的指標(biāo)[37]。

但酶法對(duì)檢測(cè)用器皿清潔度和環(huán)境微生物含量要求很高；且培養(yǎng)時(shí)間決定了檢測(cè)周期，若大批測(cè)量需要較短的培養(yǎng)時(shí)間；同時(shí)，牛乳中微生物生長(zhǎng)所需的最適溫度一般為20～45℃，但酶法采用的培養(yǎng)溫度都會(huì)高于此溫度。所以酶法檢測(cè)的關(guān)鍵是器皿和環(huán)境的清潔、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間及酶的添加濃度。

2.2 高效液相色譜法

高效液相色譜法（HPLC）主要應(yīng)用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器和碳水化合物分析柱進(jìn)行定量分析乳果糖質(zhì)量濃度。此法可有效分離乳糖和乳果糖，并具有快速準(zhǔn)確的特點(diǎn)[38-39]。高效液相色譜法可采用4種不同的色譜柱分析底乳糖酸乳和滅菌乳中乳果糖的質(zhì)量濃度，其中陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱、氨基鍵合硅膠柱和氨基鍵合柱可有效分離乳糖（檢測(cè)限為3.8 mg/L）和乳果糖（檢測(cè)限2.5 mg/L）[40-41]。此外，先將樣品浸泡在乙醇中，待樣品沉淀后，再采用HPLC測(cè)定濾液中乳糖質(zhì)量濃度的外標(biāo)法（檢測(cè)限為0.013 mg/L，回收率為97.92%）也可測(cè)定牛乳中乳果糖質(zhì)量濃度。HPLC比酶法成本較低、更易掌握、快速準(zhǔn)確和操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)[42-43]。

高效液相色譜法雖然可以直接檢測(cè)乳果糖質(zhì)量濃度，但實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中還存在很多問(wèn)題，如蛋白質(zhì)的去除（先離心分離，再超濾膜過(guò)濾，或用試劑沉降蛋白）、去除脂肪（離心可去除）、區(qū)分乳糖和乳果糖（選擇合適的色譜柱及合適的流動(dòng)相種類和配比）。

2.3 氣相色譜法

氣相色譜法可精確測(cè)量乳果糖及其他糖類。此法需先水解多糖，多糖變單糖后，采用衍生試劑將單糖衍生成易于氣化的物質(zhì)，再利用氣相色譜分離、定量。氣相色譜靈敏度高于HPLC，且易于分離乳果糖和其他碳水化物。研究發(fā)現(xiàn)，脫脂乳中乳果糖檢測(cè)限是50 mg/L或更低[37]。

氣相色譜法的檢測(cè)限可滿足眾多產(chǎn)品的檢測(cè)。此法關(guān)鍵技術(shù)是采取怎樣的制備方法，使碳水化合物合理的衍生，從而提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度和靈敏度。

2.4 離子色譜電化學(xué)方法（HPAEC-PAD）

離子色譜電化學(xué)方法是脈沖安培將測(cè)器和離子交換柱的結(jié)合，可定量分析乳果糖的質(zhì)量濃度。此法在強(qiáng)堿性淋洗液中離子化，然后利用陰離子交換柱分離，再利用金電極脈沖安培檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。離子色譜電化學(xué)方法可同時(shí)檢測(cè)乳果糖（檢測(cè)限0.02 mg/L）和乳糖質(zhì)量濃度（檢測(cè)限0.012 mg/L），實(shí)現(xiàn)了快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)無(wú)乳糖酸乳、原料乳和巴氏殺菌乳中乳果糖質(zhì)量濃度[44-45]。

3 液態(tài)奶乳果糖含量變化規(guī)律的研究與應(yīng)用

乳果糖的水平含量不但可以衡量新牛奶熱處理效應(yīng)，而且可以區(qū)分牛奶殺菌方法的類型[9]。但目前鮮有研究乳果糖質(zhì)量濃度隨熱處理程度變化的具體情況，主要是將其作為區(qū)分巴氏殺菌乳、超高溫瞬時(shí)處理（UHT滅菌乳采用的溫度一般在135～145℃，高的可達(dá)150℃[46]）和滅菌奶的鑒別指標(biāo)[47]。還有歐盟（EU）國(guó)際奶業(yè)聯(lián)合會(huì)（IDF）將乳果糖作為鑒別UHT滅菌乳或UHT滅菌乳中復(fù)原乳的指標(biāo)之一[48-51]。此外，有研究表明，乳果糖（lactulose，LCT）質(zhì)量濃度可用來(lái)辨別直接超高溫瞬時(shí)處理（UHT direct heating method，UHT-DM）和間接超高溫瞬時(shí)處理（UHT indirect heating method，UHT-IM）奶[52-53]。

3.1 鮮液態(tài)乳乳果糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化規(guī)律

據(jù)報(bào)道，生鮮乳經(jīng)75℃/15 s熱處理，乳果糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8.9 mg/100 g蛋白質(zhì)[11]。

3.2 UHT滅菌乳乳果糖質(zhì)量濃度變化規(guī)律

目前采用UHT滅菌熱處理鮮奶的研究較多，但并未闡明乳果糖質(zhì)量濃度與處理溫度和時(shí)間的關(guān)系。UHT滅菌乳質(zhì)量濃度整體變化在50～106.5 mg/L，間接UHT滅菌乳（150℃）中乳果糖質(zhì)量濃度為226.8～1065.1 mg/L，直接UHT滅菌乳（140℃）中乳果糖質(zhì)量濃度為120～427.50 mg/L。張景亮等[54]發(fā)現(xiàn)滅菌奶的乳果糖質(zhì)量濃度高于600 mg/L。黃萌萌等[55]針對(duì)商業(yè)UHT滅菌乳（19℃±2℃）貯存期間（2個(gè)月）乳果糖變化規(guī)律做了相應(yīng)的研究。結(jié)果顯示，在貨架前期UHT滅菌乳中乳果糖質(zhì)量濃度相對(duì)穩(wěn)定，隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)，其質(zhì)量濃度逐漸增高，這可能與其生產(chǎn)工藝有關(guān)。

3.3 巴氏殺菌乳乳乳果糖含量變化規(guī)律的研究與應(yīng)用

巴氏殺菌乳中的乳果糖質(zhì)量濃度（范圍分布2.7～32.1 mg/L之間）低于高溫巴氏殺菌乳的乳果糖質(zhì)量濃度（范圍為6.7～58 mg/L）[56]，而Olano等[57]得出，巴氏殺菌工藝在低溫長(zhǎng)時(shí)使鮮乳產(chǎn)生的乳果糖含量較少（63℃加熱30 min，乳果糖含量為5.2 mg/L）。由于巴氏殺菌乳的生產(chǎn)工藝不同，導(dǎo)致乳果糖含量存在差異。Pellegrino等[58]和Feinberg等[59]研究發(fā)現(xiàn)，巴氏殺菌乳中乳果糖隨加工溫度和時(shí)間的增加而增高，但具體變化規(guī)律尚不清楚。

3.4 復(fù)原乳乳果糖質(zhì)量濃度變化規(guī)律

全脂乳粉或/和煉乳與水配比形成的原料乳被稱作“復(fù)原乳”或“原料乳”（reconstituted milk），其由于加工過(guò)程中濃縮和干燥階段的處理強(qiáng)度較低及干燥過(guò)程中熱處理溫度比超高滅菌等工藝較溫和，所以生成的乳果糖含量較少[58]。有研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)原乳中乳果糖質(zhì)量濃度在23.0～78.5 mg/L或24.2～48.8 mg/L之間[60]，由于檢測(cè)方法的不同，復(fù)原乳中乳果糖質(zhì)量濃度存在差異。目前乳果糖作為測(cè)定UHT滅菌乳中復(fù)原乳質(zhì)量濃度的指標(biāo)之一，但UHT滅菌乳和巴氏殺菌乳中乳果糖質(zhì)量濃度與復(fù)原乳質(zhì)量濃度的關(guān)系尚無(wú)研究。

3.5 其他因素對(duì)乳果糖質(zhì)量濃度變化規(guī)律的影響

除加工工藝影響乳果糖質(zhì)量濃度外，還有pH值、貯存條件和添加劑（磷酸鹽和檸檬酸鹽）[61]等。有研究顯示，當(dāng)牛乳中pH值范圍為6.7～6.8之間時(shí)，乳果糖質(zhì)量濃度的變化較小，而低于6.7時(shí)，乳果糖質(zhì)量濃度降低，高于6.8時(shí)，乳果糖質(zhì)量濃度增加[62]。貯存溫度與時(shí)間同樣影響乳果糖質(zhì)量濃度，UHT滅菌乳貯存時(shí)間在6個(gè)月以上，乳果糖質(zhì)量濃度不變，但保持法滅菌乳則40 d乳果糖質(zhì)量濃度持續(xù)增加[9]，且直接滅菌乳比間接滅菌乳較穩(wěn)定[63]。還有研究發(fā)現(xiàn)，UHT滅菌乳在22℃和30℃貯存90 d，乳果糖質(zhì)量濃度分別為（20±4）mg/L和（95±10）mg/L[60]；持續(xù)滅菌法只有在35℃下，每貯存60 d，乳果糖質(zhì)量濃度增加126 mg/L；而酶法在25℃和35℃下乳果糖質(zhì)量濃度均有所增加。

4 結(jié)束語(yǔ)

乳果糖是UHT滅菌乳、復(fù)原乳和巴氏殺菌乳等不同加工工藝下乳糖異構(gòu)化的產(chǎn)物，是評(píng)定奶品質(zhì)量及衡量牛奶熱處理?yè)p傷程度和區(qū)分加工工藝的重要指標(biāo)之一。隨著科技的不斷發(fā)展與進(jìn)步，為快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、高效的探尋不同加工工藝下乳果糖質(zhì)量濃度與處理時(shí)間及溫度的變化關(guān)系成為可能，從而為建立液態(tài)乳標(biāo)準(zhǔn)新體系打下基礎(chǔ)。但由于成本、技術(shù)等問(wèn)題乳果糖的測(cè)定方法尚未能投入實(shí)際生產(chǎn)中去，所以探尋適合生產(chǎn)實(shí)際使用的乳果糖檢測(cè)方法有著實(shí)際生產(chǎn)意義。

[1]AMA.Jahresbericht der AgrarMarkt Austia fur den Milch und Milch-produkte,Osterreich fur das Jahr 2012[D].Austrin Marketing Agency,2013.

[2]MAYER H K,RABA B,MEIER J,et al.RP-HPLC analysis of furo?sine and acid-solubleβ-lactoglobulin to assess the heat loat of extend? ed shelf life milk samples in Austria[J].Dairy Science and Technology, 2010,90(09):413-428.

[3]LISA I,BOITZ,HELMUT K.Mayer.Evaluation of furosine,lactulose and acid-solubleβ-lactoglobulin as time temperature integrators for whipping cream samples at retail in Austria[J].International Dairy Journal,2015,17(03):24-31.

[4]WALSTRA P,WOUTERS J T M,GEURTS T J.Boca Raton,FL: CRC Press Taylor and Francis Group[J].Dairy Science and Technoly, 2006,(02):297-314,513-535.

[5]MOATSOU G.Sanitary procedures,heat treatments and packaging [J].In Milk and Dairy Products in Human Nutrition,2013,25(05): 289-309.

[6]CLAEYS W L,VAN LOEY A M,HENDRICKX M E.Intrinsic time temperature integrators for heat treatment of milk[J].Trends in Food Science and Technology,2002,13(14):293-311.

[7]SAKKAS L,MOUTAFI A,MOSCHOPOULOU E,et al.Assessment of heat treatment of various typs of milk[J].Food Chemitry,2014,159 (12):293-301.

[8]KAROUI R,DE Beardemaeker J.A review of the analytical methods coupled with chemometric tools for the detemination of the quality and identity of dairy products[J].Food Chemistry,2007,102(04): 621-640.

[9]ANDREWSGR.Distinguishing Pasteurized,UHT and Sterilized Milks by Lactulose Content[J].Journal of the Society of Dairy Tech?nology,1984,37(03):92-95.

[10]CEOZON,OLABIA,MARTINZ CASTRO I.Diferenciaction de Leches Sometidas a Distintostratamientos temicos Mediante elanalisis de la Composicion en Discaridos Libres Por Cromatografla de Gases [J].Revista de Agroquimicay Tecnologla de los Alimentos,1986.26 (09):565-570.

[11]汪慧.不同熱加工處理的生鮮乳與復(fù)原乳產(chǎn)品鑒別方法的研究[D].揚(yáng)州大學(xué),2014.

[12]RICHARDS E L,CHANDRASEKHARA M R.Chemical changes in dried skim-milk during storage.J.Dairy Res,1960.

[13]H GLIGUEM,I BIRLOUEZ,ARAGON.Effects of Sterilization, Packagjng,and Storage on Vitamin C,Degradation,Protein Dena?turation,and Glycation in Fortitied M1ks[J].J Dairy Sci,2005,88 (04):891-899.

[14]金瑛，劉艷琴.復(fù)原乳鑒別指標(biāo)探討[J].中國(guó)乳品工業(yè),2006,34(8): 43-46.

[15]MAITE RADA,MENDOZA.Chemical Indicators of Heat Treat?ment in Fortified and special IVtilks[J].J Agri Food Chem,2005,53 (06):2995-2999.

[16]NOLLET L,M L,TOLDRA F.Handbook of dairy food analysis CRC press Taylor and Francis Group[D].FL:Boca Raton,2010.

[17]ZHANG Z,WANG H,YANG R,et al.A novel spectrophotomet?ric method for quantitative determinantion of lactulose in food indus?tries[J].International Journal of Food Science and Technology,2010, 45(07):258-264.

[18]ZHANG S,HUA X.Deternination of lactulose in foods:a review of recent research[J].International Journal of Food Science and Tech?nology,2010,45(03):1081-1087.

[19]ETZION Y,LINKER R,COGAN U,et al.Determination of pro?tein concentration in raw milk by mid-infrared fourier transform in?frared/attenuated total reflectance spectroscopy[J].Journal of Dairy Science,2004,87(05):2779-2788.

[20]COPPAOPPA M,REBELLO CHION A,GIACCONE D,et al.Comparison of near and medium infrared spectroscopy to predict fat?ty acid composition on fresh and thawed milk[J].Journal of Dairy Science,2014,97(08):1171-1186.

[21]DE MARCHI M,TOFFANIN V,CASSANDRO M,et al.Invited review:Mid-infrared spectoscopy as phenotyping tool milk traits[J]. Journal of Dairy Science,2014,29(05):1171-1186.

[22]MOSCONE D,PALLESCHI G,A.BERNARDO R,et al.Rapid determination of lactulose in milk by microdialysis and biosensors[J]. Analyst,1999,124(03):325-329.

[23]MONTILLA F J,MORENO A,OLANO.A reliable gas capillary chromatographic determination of lactulose in dairy samples[J]. Chromatogaphia,2005,62(5-6):311-314.

[24]曾文芳,時(shí)巧翠,陳永欣,等.離子色譜電化學(xué)測(cè)定牛奶中的乳糖和乳果糖[J].食品科學(xué)，2006,27(5):205-208.

[25]LUZZANA M,AGNELLINI D,CREMONESI P,et al.Milk lac?tose and lactulose determination by the differential pH technique[J]. Lait,2003,83(05):409-416.

[26]ISO 11868-2007 Heat-treated milk-Determination of lactulose con?tent Method using high-performance liquid chromatography[S].

[27]MANZI P,PIZZOFERRATO L.HPLC Determination of Lactu?lose in Heat Treated Milk[J].Food and Bioprocess Technology, 2013,6(03):851-857.

[28]MICHELLE F S,LOURDES M P,JOSE F P M,et al.Simultaneous Determination of Lactulose and Lactose in Conserved Milk by HPLC-RID[J].Journal of Chemistry,2015,Article ID 185967:1-6.

[29]ISO 11285-2004 Milk,Determination of Iactulose content,Enzy?matic method[S].

[30]PAPPAS C S,TARANTILIS P A,MOSCHOPOULOU E,et al. Identifition and differentiation of goat and sheep milk based on dif?fuse reflectance infrared Fourier transform spectrocopy(DRIFTS)us?ing cluster analysis[J].Food Chemistry,2008,106(06):647-659.

[31]CHRISTOS S,LAMBROS S,EKATERINI M,et al.Dirct determi?nation of lactulose in heat-treated milk using diffuse reflectance infra?red fourier transform spectoscopy and partial least squares regression [J].Internation Journal of Dairy Technology,2015,68(03):448-453.

[32]ISO 11868-1997 Heat-treated milk-determination of lactulose con?tent-method using high-performance-liquid chromatography[S].

[33]RENZO M,LORENZO I,LUCIA I,et al.Simultaneous HPLC de?termination with lightscattering detection of lactulose and mannitol in studies of intestinal permeability in pediatrics[J].Clinical Chemis?try,1998,44(09):1685-1691.

[34]SIMON C Fleming,MOSES S Kapembwa,IVlICHAEL F Laker. Rapid and Simultaneous Determination of Lactulose and Mannitol in Urine,by FiPLC withPulsed Amperometric Detection,for Use in Studies of Intestinal Permeability[J].CLIN CHE,1990,36(05): 797-799.

[35]ANINE D,MOSCONE R A,BERNARDO E,et al.A new enzy?matic spectrophotometric assay for the determination of lactulose in milk[J].Analytica Chimica Acta,2000,406(04):217-224.

[36]黃萌萌.乳中乳果糖測(cè)定方法的優(yōu)化及其在乳品質(zhì)量評(píng)定中的應(yīng)用[D].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2007.

[37]DE BLOCK J,MERCHIERF M,VAN RENTERGHEM R,et al. Evaluation of two methods for the determination of lactulose in milk [J].International Dairy Journal,1996,34(6):217-222.

[38]SCHUSTER W B R,WCHEL R,HINRICHS J.A new liquid cli?romatograpliy metliod for the simultaneous and sensitive quantifica?tion of lactose and lactulose in milk[J].Dairy Science&Teclinology. 2010.91(01):27-37.

[39]PAMELA M,LAUA P.HPLC Determination of Lactulose in Heat Treated Milk[J].Food Bioprocess Technol,2013,(06):851-857.

[40]王鳳仙,劉博亞.乳制品中異構(gòu)化乳糖的色譜法檢測(cè)研究進(jìn)展[J].乳業(yè)科學(xué)與技術(shù),2015,36(05):33-36.

[41]王加啟,黃萌萌,韓振春,等.UHT滅菌乳中乳果糖的HPLC測(cè)定[J].中國(guó)奶牛,2006,54（4）：8-11.

[42]莫海濤,余娟,謝彩鋒,等.高效液相色譜法分析牛奶及含乳飲料中的糖分[J].食品工業(yè)科技,2007,28(08):229-232+226.

[43]姜金斗,周紅,張麗宏,等.HPLC法蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定UHT滅菌奶中乳果糖方法的研究[J].中國(guó)乳品工業(yè),2006,34(03):51-53.

[44]CHRISTISON T,FISHER C,YANG H,et al.Fast Determinations of lactose and lactulose in milk products using HPAE-PAD[EB/ OL].littp://www.Tliermoscientific.com/content/dam/tfs/ ATG/CMD/cmddocuments/sci-res/app/cliron＞/ic/svs/ TN-146-IC.

[45]曾文芳,吳龍,楊忠喬,等.牛奶中乳糖和乳果糖離子色譜電化學(xué)修飾法測(cè)定[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2008,18(05):810-812.

[46]FMH.Milk and dairy products.Ausrrian Food Codex.Vienna,Aus?tria:Federal Ministry of Health[J].Austrian Food Codex,Chapter B32,BMG75210/0010-II/B/13/2011.

[47]蘭心怡.不同加熱條件和添加復(fù)原乳對(duì)牛奶熱敏感指標(biāo)的影響長(zhǎng)沙[D].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士畢業(yè)論文，2010.

[48]EC.Dairy Chemists Group.Doc.VI/5726,Rev.2.Projet de decision dela Commision fixantles limitesetles methodes pemeeant de distingu?er les differents types de lait de consom nuation traites temiquement [S].1992.

[49]ID F.Influence of technologyon the quality heat treated milk and flu?id milk products(B-Doc.222).Brussels:Intemational Dairy Federa?tion[S].1992.

[50]ID F.Influence of technologyon the quality of heat treated milk and fluid milk products(B-Doc.235).Brussels:Intemational Dairy Feder?ation[S].1993.

[51]中華人們共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 939-2005.巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中復(fù)原乳的鑒定[S].

[52]ELLIOTT A J,DATTA N,AMENU B,et al.Heat-induced and other chemical changes in commercial UHT milk[J].Journal of Dairy Research,2005,87(08):2779-2788.

[53]CATTANEO S,MASOTTI F,PELLEGRINO L.Effects of over?processing on heat damages of UHT milk[J].European Food Re?search and Technology,2008,226(07):1099-1106.

[54]張景亮,胡少新,孫瑩,等.復(fù)原乳檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J].食品科技, 2008,45(09):233-235.

[55]黃萌萌,王加啟,魏宏陽(yáng),等.UHT滅菌乳貯存期間乳果糖的變化規(guī)律[J].中國(guó)乳品工業(yè),2007,12(03):10-12.

[56]黃萌萌,王加啟,卜登攀,等.牛奶乳果糖的研究進(jìn)展[J].中國(guó)乳品工業(yè),2007,35(6):54-57.

[57]OLANO A,CALVO M M C N.Changes in the carbohydrate frac?tion of milk during heating processes[J].Food Chemistry,1989,31 (01):259-265.

[58]PELLEGRINO A,NONI D I,RESMINI P.Coupling of lactulose and furosine indices for quality evaluation of sterilized milk[J].Inter?national Dairy Journal,1995,38(05):647-659.

[59]FEINBERG M,DUPONT D,EFSTATHIOU T,et al.Evaluation of tracers for the authentication of thermal treatments of milks[J]. Food Chemistry,2006,98(07):188-194.

[60]CORZO N,DELGADO T,TROYANO,et al.Ratio of lactuloseto furosine as indicator of quality of commercial milks[J].Journal of Food Protection,1994,57(09):737-739.

[61]ANDREWS A A M,GOODENOUGH P.A study of the heat sta?bilities of a number of indigenous milk enzyme[J].Journal of Dairy Research,1987,54(08):237-246.

[62]NANGPAL A R H.Reference diagram for lactulose content in UHT milk[J].Kieler Milchwirtschaftliche Forschungsberichte,1990, 42(04):65-76.

[63]ANTHONY J ELLIOTT,NIVEDITA DATTA,BOKA AMENU, et al.Heat-induced and other chemical changes in commercial UHT milks[J].Journal of Dairy Research,2005,72(05):442-446.

Research and application of lactulose in liquid milk

TANG Yao1,HAN Qipeng1,CHEN Yuguang1,ZHANG Peihua1,WANG Jiaqi2,ZHANG Renfu3
(1.Hunan Provincial Key Laboratory for Genetic Improvement of Domestic Animal,College of Animal Science and Technology,Hunan Agricultural University,Changsha 410128，China;2.State Key laboratory of Animal Nutrition,Insti?tute of Animal Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Ministry of Agiculture Milk and Dairy Quality Super?vision and Inspection Evaluation Center(Beijing),Beijing 100094,China;3.Animal Husbandry Station of Xiangxi Au?tonomous Prefecture,Jishou 416000，China)

This paper mainly focuses on the discussion of the concept and testing method and structure of lactulose,and its concentration un?der different processing technology to research of change rule,and application of the quality evaluation of dairy products,etc.In order to pro?vide a theoretical reference for combined with production practice the detection system of lactulose concentration.

liquid milk;lactulose;heat treatment;

TS252.1

：B

：1001-2230（2017）06-0030-05

2016-09-27

田瑤（1992-），女，碩士，從事牛奶質(zhì)量評(píng)價(jià)及檢測(cè)方法研究。

陳宇光