高 潔 賴(lài)普輝

(陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院，咸陽(yáng)，712046)

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中藥研究

五味子花中脂溶性成分的GC/MS分析研究

高 潔 賴(lài)普輝

(陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院，咸陽(yáng)，712046)

目的：對(duì)五味子花中的脂溶性成分進(jìn)行分析。方法：采用索氏提取法對(duì)脂溶性成分進(jìn)行了提取，結(jié)合GC/MS法對(duì)五味子花中脂溶性成分進(jìn)行分析。結(jié)果：共鑒定出11種成分，五味子花中的活性成分維生素E含量為1.066%。結(jié)論：從五味子花中得出的角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分，經(jīng)分析五味子的花和果實(shí)含有相似的脂溶性成分。

五味子花；索氏提取；氣相色譜-質(zhì)譜連用；脂溶性成分

五味子作為中藥在臨床上有很大的治療效果，秦嶺山區(qū)各縣均有出產(chǎn)，資源豐富。主要用于肺腎兩虛所致的虛咳、氣喘，經(jīng)常與補(bǔ)腎藥合用，還可用于陰液不足所致的口干渴，盜汗以及一切氣血耗散之休克、虛脫等癥，與其他中藥配伍用于治療肝炎、肝腎功能不足、月經(jīng)失調(diào)、神經(jīng)衰弱等[1-7]。五味子中所含的化學(xué)成分主要有木脂素類(lèi)和揮發(fā)油類(lèi)和多糖類(lèi)，本研究運(yùn)用GC-MS分析技術(shù)對(duì)五味子花中的脂溶性成分進(jìn)行了分析研究，并將其與五味子果實(shí)中的脂溶性成分進(jìn)行了比較分析[8-9]。

1 材料與方法

1.1 試藥 五味子花(采自陜西秦嶺南側(cè)留壩縣)，五味子果實(shí)(采自陜西秦嶺南側(cè)留壩縣)，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室雷國(guó)蓮教授鑒定為木蘭科植物五味子的花和果實(shí)。

1.2 試劑 石油醚；正己烷(色譜標(biāo)準(zhǔn))；維生素E標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)生物制品鑒定所)；其他試藥均為分析純。

1.3 儀器與設(shè)備 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Hp5989B型)；高效氣相色譜儀(日本島津GC-14A)，KQ2200DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津鑫博得儀器有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)；索氏提取裝置。

1.4 測(cè)試樣品的制備 五味子花干燥粉碎，五味子果實(shí)粉碎后置于索氏提取器中用石油醚提取，揮去溶劑后，殘余物用濃乙醇溶解，溶液置于冰箱中冷凍，然后過(guò)濾分去沉淀，減壓蒸去乙醇得黃褐色油狀物。

1.5 色譜條件 1)氣相色譜-質(zhì)譜連用：色譜柱HP-5，毛細(xì)管柱30 m×0.25 mm，氣化室溫度260 ℃，柱溫50～250 ℃(4 ℃/min)，載氣氮?dú)?，柱前?.5 kg/cm2，電離方式EI，電子能量70 ev，離子源溫度260 ℃，收集電流300 MA，掃描速度0.41次/秒。2)高效氣相色譜：玻璃柱2 m×3 mm，填充劑：1.890 silicon ov，溫度265 ℃，檢測(cè)器及進(jìn)樣品溫度300 ℃，氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，氣體流速：氮?dú)?.8 m/min，氫氣0.5 kg/cm2，空氣1 kg/cm，量程103，流速1 mm/min，進(jìn)樣量2 μL。

1.6 保留時(shí)間，色譜柱塔板數(shù)的測(cè)定 維生素E的理論塔板數(shù)為2 432，保留時(shí)間為21.7 min，內(nèi)標(biāo)峰為13.417 min。

1.7 定量校正因子的測(cè)定 1)內(nèi)標(biāo)溶液的配制：精密稱(chēng)取0.046 6 g，正三十二烷置于50 mL容量瓶中，加正己烷使溶解并稀釋至刻度，搖勻。2)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：精密稱(chēng)取維生素E標(biāo)準(zhǔn)品0.045 2 g，置于20 mL容量瓶中，用內(nèi)標(biāo)液稀釋?zhuān)ㄈ荨?)校正因子的測(cè)定：分別注入標(biāo)準(zhǔn)溶液3 μL進(jìn)行測(cè)定3次，取平均值為1.066。

1.8 樣品的制備與測(cè)定 五味子果實(shí)干燥粉碎，精密稱(chēng)取0.999 2 g，根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇用25 mL正己烷，在室溫下，用超聲提取20 min，過(guò)濾，濾渣再用超聲提取20 min，合并提取液，揮去溶劑，將黃色油狀物用內(nèi)標(biāo)溶液使溶解稀釋?zhuān)ㄈ葜? mL，分別取2 μL測(cè)定2次，取其平均值用校正因子計(jì)算其含量，結(jié)果為1.500 9‰。

1.9 對(duì)比試驗(yàn) 精密稱(chēng)取五味子果實(shí)樣品0.9994 g，加25 mL正己烷加熱回流提取3 h，過(guò)濾，濾渣用25 mL正己烷再加熱回流提取1 h，用上述方法測(cè)定，含量為0.487‰。

2 結(jié)果

2.1 五味子花中脂溶性成分的GC/MS分析結(jié)果 結(jié)果如表1所示，通過(guò)GC-MS聯(lián)用儀標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)NIST2.0進(jìn)行檢索，確認(rèn)各化合物；通過(guò)GC-MS聯(lián)用儀工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法計(jì)算各化合物相對(duì)的量，共檢出20個(gè)色譜峰，鑒定出了11個(gè)化合物，其中脂肪酸有3種：棕櫚酸，亞油酸，硬脂酸，其中角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分。

2.2 五味子花中維生素E的含量測(cè)定結(jié)果 可獲取正三十二烷、維生素E的保留時(shí)間，正三十二烷的保留時(shí)間為13.417 min，維生素E的保留時(shí)間為21.7 min。用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算五味子花中維生素E的含量，3次測(cè)定的結(jié)果分別為：1.066%，1.068%，1.065%，平均值為1.066%，RSD為1.48%。

2.3 五味子果實(shí)中脂溶性成分的GC/MS分析結(jié)果 結(jié)果如表2所示，通過(guò)GC-MS聯(lián)用儀標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)NIST2.0進(jìn)行檢索，確認(rèn)各化合物，共檢出29個(gè)色譜峰，鑒定出了14個(gè)化合物，占樣品總量的83.445%，檢出組分中脂肪酸含量較高，占總成分的81.56%，其中亞油酸含量最高，達(dá)總量的58.11%，飽和脂肪酸含量占23.45%，不飽和脂肪酸占71.57%。

表1 花中脂溶性成分GC/MS分析結(jié)果

表2 果實(shí)中脂溶性成分GC/MS分析結(jié)果

2.4 五味子花和果實(shí)脂溶性成分的比較 根據(jù)所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)五味子花和果實(shí)中的脂溶性成分進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果如表3所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)對(duì)比，得出表3，可知五味子果實(shí)中的脂溶性成分較五味子花中的脂溶性成分都含有萜類(lèi)化合物，但它們的具體結(jié)構(gòu)與分子式不相同，且五味子果實(shí)中的脂溶性成分種類(lèi)明顯多于花中。在五味子花中首次檢測(cè)出鯊烯，在果實(shí)中未檢出該化學(xué)組分。

3 結(jié)論

從五味子花的氣相色譜圖中，共測(cè)定出20個(gè)色譜峰，鑒定出11種化合物，其中脂肪酸有3種：棕櫚酸，亞油酸，硬脂酸，其中角鯊烯為首次從五味子花中獲取的活性成分。

表3 五味子花和果實(shí)中主要脂溶性成分的比較

從五味子果實(shí)中的色譜圖中，共測(cè)定29個(gè)色譜圖，鑒定出14種化合物，檢出組分中脂肪酸含量較高，占總成分的81.56%，其中亞油酸含量最高，達(dá)總量的58.11%，飽和脂肪酸含量占23.45%，不飽和脂肪酸占71.57%。

通過(guò)試驗(yàn)對(duì)比得知五味子花中維生素E相對(duì)比果實(shí)中多，并含有一定量的脂肪酸和揮發(fā)油類(lèi)。含揮發(fā)油的中草藥或提取出的揮發(fā)油大多具有發(fā)汗、理氣、止痛、抑菌、矯味等作用。五味子花中的α-可巴烯是一種三環(huán)倍半萜類(lèi)的化合物，它是蒿草里芳香油中的成分之一，具有抗真菌，利尿，鎮(zhèn)靜等作用；石竹烯可用作藥草調(diào)配香精[10-11]；亞油酸能降低血液膽固醇，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化；鯊烯可用作殺菌劑、口服營(yíng)養(yǎng)藥、皮膚柔軟滑潤(rùn)劑及制備藥物、橡膠、香料、有機(jī)色料和表面活性劑的原料[12-15]。五味子花中的其他脂溶性成分也具有一定的藥理活性，有待于進(jìn)一步研究。

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(2015-11-23收稿 責(zé)任編輯：張文婷)

GC/MS Analysis of Fat-soluble Components in Schisandra Sphenanthera Flower

Gao Jie，Lai Puhui

(CollegeofMedical，ShaanxiInstituteofInternationalTrade&Commerce，XianYang712046，China)

Objective:To study the fat-soluble components of the Schisandra sphenanthera flower.Methods:Fat-soluble components of the Schisandra sphenanthera flower were extracted by Soxhlet extraction and were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry.Results:The eleven compounds were identified and the determination the content of vitamin E with the yields was 1.066%.Conclusion:The squalene was reported for the first time，and there are same fat-soluble components in fructus schisandrae flower and fruit.

Schisandra sphenanthera flower； Soxhlet extraction； GC/MS； Fat-soluble components

陜西省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目(編號(hào)：12JK1044)——板栗殼棕色素清除“腦部缺血后再灌流氧自由基”效果評(píng)價(jià)模式的建立；陜西省咸陽(yáng)市科學(xué)技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：2015k04-20)——板栗殼棕色素清除“肝臟缺血后再灌流氧自由基”效果評(píng)價(jià)模式的建立

高潔(1984.11—)，女，碩士，講師，研究方向：生物制藥及藥物活性成分分析及應(yīng)用，E-mail：251536749@qq.com

R284.1；R284.2

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.11.056