謝國旗，郝少君，蘇 峰，黎丹東，張正臣

?

清腦片對(duì)小鼠轉(zhuǎn)輪及轉(zhuǎn)棒平衡能力的影響

謝國旗，郝少君，蘇 峰，黎丹東，張正臣*

目的 觀察清腦片對(duì)小鼠轉(zhuǎn)輪平衡能力及轉(zhuǎn)棒平衡能力的影響。方法 取小鼠50只，隨機(jī)分為5組，即模型組，暈痛定組，大、中、小劑量清腦片組，每組10只。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液、暈痛定膠囊混懸液及同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)給藥7 d，于末次給藥后第2天進(jìn)行轉(zhuǎn)輪實(shí)驗(yàn)。將小鼠放在轉(zhuǎn)輪上，轉(zhuǎn)速調(diào)至20 r/min，每只小鼠重復(fù)測定3次，記錄小鼠在滾軸上持續(xù)運(yùn)動(dòng)不掉落的時(shí)間(以秒計(jì)數(shù))，并取其最長停留時(shí)間及三次停留時(shí)間的總和作為觀察指標(biāo)；另取小鼠50只，按上述方法分組、給藥，連續(xù)給藥10 d，于末次給藥后1 h進(jìn)行轉(zhuǎn)棒平衡實(shí)驗(yàn)。結(jié)果 與對(duì)照組比較，大劑量清腦片組最長停留時(shí)間明顯延長(P<0.05)，中、小劑量清腦片組的最長停留時(shí)間略有延長(P>0.05)；大劑量清腦片組三次停留時(shí)間總和明顯延長(P<0.05)；與對(duì)照組比較，清腦片組小鼠體重明顯增加(P<0.05)；大、中、小劑量清腦片組小鼠在轉(zhuǎn)棒上停留時(shí)間略有延長(P>0.05)。結(jié)論 大劑量清腦片可延長小鼠最長停留時(shí)間及三次停留時(shí)間總和，顯著增加小鼠體重。

清腦片；小鼠；平衡能力；暈痛定膠囊

0 引言

目前，我國18～65歲人群中，頭痛、頭暈的發(fā)病率為23.8%，且80%的頭痛頭暈患者中，有3.68%的患者因就醫(yī)而引發(fā)嚴(yán)重的心腦血管病及抑郁自殺行為。每年有1% (98.1萬)的頭痛、頭暈患者死于該病引起的嚴(yán)重疾病。頭痛、頭暈的治療藥物雖然多，但效果均不理想；而西藥雖見效快但持續(xù)時(shí)間短，且不良反應(yīng)大。本研究自擬清腦片的主要成分為白芷、當(dāng)歸、川芎、勾藤、細(xì)辛、龍骨、薄荷等8味中藥，具有活血、行氣通竅、止痛、清利頭目的功效，用于頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥。為驗(yàn)證其療效原理，筆者觀察并分析了清腦片對(duì)小鼠的轉(zhuǎn)輪平衡能力及轉(zhuǎn)棒平衡能力的影響[1-8]，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物試劑 清腦片(主要成分：白芷、當(dāng)歸、川芎、勾藤、細(xì)辛、龍骨、薄荷；功能主治：活血、行氣通竅、止痛、清利頭目，用于頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥的治療；用法用量：3次/d口服，3～5片/次)，我院自制。制法：取白芷50 g、當(dāng)歸75 g及川芎75 g粉碎成100目細(xì)粉備用。剩余白芷、當(dāng)歸、川芎及其余各味藥材粉碎成10目粗粉，加8倍水煎煮2次，首次2 h，二次2 h，合并煎煮液，濾過。濾液濃縮至相對(duì)密度1.15～1.30 (80 ℃)。加入上述細(xì)粉、淀粉適量，混勻，干燥成干膏，粉碎，用稀糖漿經(jīng)14～16目篩制粒，50～60 ℃烘干，用14目篩整粒，加入1%硬脂酸鎂混勻，壓片(每片0.3 g)，包衣，制成1 000片。批號(hào)：20141125。暈痛定膠囊(河南龍都藥業(yè)有限公司，批號(hào)：150309)。生理鹽水(河南雙鶴華利藥業(yè)有限公司，批號(hào)：130909 06B)，醫(yī)用乙醇(新鄉(xiāng)市三偉消毒制劑有限公司，批號(hào)：20140105)，純凈水(新鄉(xiāng)娃哈哈食品有限公司，批號(hào)：20130811)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 JM 1000電子秤，余姚記銘稱重校驗(yàn)設(shè)備有限公司；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；HHS-21-8型電熱恒溫水浴鍋，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；BCD-248T型冰箱，新飛電器有限公司；ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 KM小鼠，雌雄各半，18～22 g，級(jí)別：SPF，轉(zhuǎn)輪實(shí)驗(yàn)合格證號(hào)：3700920000904，轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)合格證號(hào)：3700920000903。提供單位：山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，許可證號(hào)：SCXK魯20130001。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證：SYXK(豫)2015-0005。恒溫23 ℃，濕度60%，人工照明12 h，白天與12 h黑夜交替，給予常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室飲食，不限制飲水。

1.4 試液配制 空白組用藥：蒸餾水；給藥組用藥：藥粉+蒸餾水。配制方法：將清腦片碾碎打粉，按臨床劑量的7.5、15、30倍稱取藥粉，均按0.1 mL/10 g的灌胃體積。儲(chǔ)存方法：冷藏，用時(shí)隔水溫?zé)帷?/p>

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 對(duì)小鼠轉(zhuǎn)輪平衡能力的影響 取昆明種小鼠50只，體重18～21 g，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)室正常飼養(yǎng)3 d，隨機(jī)分為5組，即模型組、暈痛定組及大、中、小劑量清腦片組，每組10只(雌雄各半)。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、暈痛定膠囊混懸液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同體積的生理鹽水(0.1 mL/10 g)，每天給藥1次，連續(xù)給藥7 d，于末次給藥后第2天進(jìn)行轉(zhuǎn)輪實(shí)驗(yàn)。將小鼠放在轉(zhuǎn)輪上，轉(zhuǎn)速調(diào)至20 r/min，每只小鼠重復(fù)測定3次，記錄小鼠在滾軸上持續(xù)運(yùn)動(dòng)不掉落的時(shí)間，并取其最長停留時(shí)間及3次停留時(shí)間的總和作為觀察指標(biāo)。由表1所示，與模型組比較，大劑量清腦片組及暈痛定膠囊組的最長停留時(shí)間明顯延長(P<0.05)，中、小劑量清腦片組略有延長(P>0.05)；大劑量清腦片組的3次停留時(shí)間總和明顯延長(P<0.05)，暈痛定組3次停留時(shí)間總和延長(P<0.01)，中、小劑量清腦片組3次停留時(shí)間略有延長，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 對(duì)小鼠轉(zhuǎn)棒平衡能力的影響 取昆明種小鼠50只，體重18～21 g，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)室正常飼養(yǎng)3 d，隨機(jī)分為5組，即模型組、暈痛定組及大、中、小劑量清腦片組，每組10只。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、暈痛定膠囊混懸液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同體積的生理鹽水(0.1 mL/10 g)，每天給藥1次，連續(xù)給藥10 d，于末次給藥后1 h進(jìn)行轉(zhuǎn)棒平衡實(shí)驗(yàn)。先將疲勞轉(zhuǎn)棒儀調(diào)整到訓(xùn)練狀態(tài)，放上小鼠進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練10 min，然后調(diào)整疲勞轉(zhuǎn)棒儀于測試狀態(tài)，轉(zhuǎn)速為30 r/min，將訓(xùn)練過的小鼠依次放在轉(zhuǎn)棒上，記錄小鼠在疲勞轉(zhuǎn)棒儀上停留的時(shí)間。由表2可見，各組初始體重比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說明分組均勻。第10天，與模型組比較，清腦片組和暈痛定組可增加小鼠體重(P<0.05)；暈痛定組小鼠在轉(zhuǎn)棒的停留時(shí)間明顯延長(P<0.05)，清腦片組小鼠在轉(zhuǎn)棒上停留時(shí)間略有延長，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討論

清腦片方中白芷，辛、溫，具有解表散風(fēng)、通竅止痛的作用，為君藥。當(dāng)歸，辛、溫，歸肝、心脾經(jīng)，具有補(bǔ)血、活血、止痛的作用；川芎，辛、溫，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效；鉤藤，性味甘、微寒，具有息風(fēng)止痙、清熱平肝之功效；細(xì)辛，性味辛、溫，具有祛風(fēng)散寒、通竅止痛的功效。四藥合用為臣藥。龍骨，性味甘、澀、平，歸心、肝、腎經(jīng)，具有鎮(zhèn)驚安神、平肝潛陽、收斂固澀的作用，為佐藥。薄荷，性味辛、涼，具有疏散風(fēng)熱、清利頭目之功效，為使藥。以上七藥合用，具有活血、行氣、通竅止痛、清利頭目的作用，用于治療頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥。臨床研究顯示，清腦片的療效較好[9]；范莉莉等[10]也對(duì)其藥劑進(jìn)行了研究。本研究結(jié)果表明，大劑量清腦片可延長最長停留時(shí)間及3次停留時(shí)間總和，顯著增加小鼠體重，大、中、小劑量清腦片僅使小鼠在轉(zhuǎn)棒上停留的時(shí)間略有延長(P>0.05)，提示自擬清腦片有抗平衡失調(diào)的作用，為臨床應(yīng)用墊定了基礎(chǔ)。

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

表2 清腦片對(duì)小鼠轉(zhuǎn)棒平衡能力的影響(g)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

志謝：本實(shí)驗(yàn)在河南中醫(yī)學(xué)院苗明三教授指導(dǎo)下完成，特此致謝！

[1] 郭連瑩,王曉紅,周波,等.葉酸對(duì)砷中毒小鼠腦部認(rèn)知功能和運(yùn)動(dòng)損傷的保護(hù)作用[J].山東醫(yī)藥,2014,54(21):33-34.

[2] 陳永紅,鄒志飛,許崇輝,等.元秘-D抗疲勞作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J].食品科學(xué),2005,26(9):482-483.

[3] 陸榮柱,陳自強(qiáng),金復(fù)生.丙烯腈對(duì)大鼠神經(jīng)行為功能的影響[J].工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病,2002,28(3):137-140.

[4] 李彥冰,耿慧春,李庭利,等.黃連阿膠湯抗焦慮作用的藥效學(xué)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2004,32(5):21-22.

[5] 馬依努爾·拜克力,陳君,阿吉艾克拜爾·艾薩.玫瑰花多酚抗小鼠軀體疲勞研究[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2015,31(3):441-442.

[6] 孫建,羅慧英.肉蓯蓉水煎劑對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞能力的影響[J].甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,26(4):10-12.

[7] 耿秀麗，趙京生，王希東.抗眩顆粒對(duì)小鼠耳廓細(xì)靜脈管徑及細(xì)動(dòng)脈管徑的影響[J].實(shí)用藥物與臨床,2015,8:904-905.

[8] 王希東,郝少君,李文俊,等.抗眩顆粒對(duì)小鼠腦膜微循環(huán)的影響[J].實(shí)用藥物與臨床,2015,6:653-655.

[9] 耿秀麗,段光明,郝少君.自制清腦片與養(yǎng)血清腦顆粒治療腦震蕩后頭痛的效果比較[J].實(shí)用醫(yī)藥雜志,2013,3:238-239.

[10]范莉莉,王靈,李文俊,等.清腦片中阿魏酸的HPLC含量測定方法[J].河南中醫(yī),2015,4:909-911.

Effect of Qingnao tablet on the balance of wheel running and rotating rod of mice

XIE Guo-qi,HAO Shao-jun,SU Feng,LI Dan-dong,ZHANG Zheng-chen*(the 371 Chinese People′s Liberation Army Hospital of Xinxiang,Xinxiang 453000,China)

Objective To observe the effect of Qingnao tablets on the balance of rotating rod and wheel running of mice.Methods Fifty mice were randomly divided into 5 groups:model group,yuntongding group and high,middle-and low-dose Qingnao tablet group,10 mice in each group.High,middle and low dose of Qingnao tablet suspension,Yuntongding capsule suspension and the same volume of physiological saline were intragastrically administered for 7 d of continuous administration,once daily;all the mice were given wheel running on the second day after the last dose of medication.The mice were put in the runner,and the rotating speed was adjusted to 20 r/min,and each mice was repeated for 3 times.The time of mice rolling without falling was recorded,and the longest residence time and the sum of three residence time were recorded as the observation index.Fifty mice were grouped and administered through the same method for 10 d,and the rotating rod balance experiment was given at 1 h after the last administration.Results Compared with control group,the longest residence time in high dose Qingnao tablet group was longer (P<0.05),and the time in middle-and small-dose of Qingnao tablet group was slightly longer (P>0.05);the sum of three residence time of Qingnao tablet group was longer (P<0.05);the body weight of mice in Qingnao tablet groups increased (P<0.05);The time of mice staying on the rotating rod in Qingnao tablet groups was slightly longer (P>0.05).Conclusion High-dose Qingnao tablet can significantly prolong the longest residence time and the sum of three residence time,and increase the body weight of mice.

Qingnao tablet;Mice;Balance;Yuntongding capsule

2016-03-23

中國人民解放軍第三七一醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000

河南新鄉(xiāng)市重點(diǎn)科技項(xiàng)目(ZG11014)

10.14053/j.cnki.ppcr.201610005

*通信作者