曾 錚,李瑞平,趙 敏,魏艷華,施中元

(江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院/江蘇省中醫(yī)藥研究院病理科 210028)

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·論 著·

HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌表達(dá)的臨床病理意義

曾 錚,李瑞平,趙 敏,魏艷華,施中元

(江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院/江蘇省中醫(yī)藥研究院病理科 210028)

目的 通過(guò)檢測(cè)HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌、濾泡性腺瘤和橋本甲狀腺炎組織學(xué)標(biāo)本的表達(dá)，探討3種抗體在甲狀腺乳頭狀癌鑒別診斷中的臨床價(jià)值。方法 收集該科2013年1月至2015年12月85例甲狀腺腺葉切除標(biāo)本，進(jìn)行HBME-1、CK19和CD117免疫組織化學(xué)染色，并對(duì)不同病變的染色結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌的陽(yáng)性表達(dá)率分別為87.3%、98.2% 和 7.3%，三者陽(yáng)性表達(dá)率在良性組與惡性組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，K值分別為0.582、0.551和0.874。結(jié)論 甲狀腺乳頭狀癌與良性病變的鑒別診斷，CD117檢測(cè)優(yōu)于HBME-1和CK19，實(shí)際工作中適于聯(lián)合使用。

甲狀腺癌； 免疫組織化學(xué)； HBME-1； CK19； CD117

甲狀腺癌是最常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，其中大部分為乳頭狀癌[1]。許多實(shí)驗(yàn)報(bào)道使用免疫組織化學(xué)染色方法進(jìn)行鑒別診斷，包括對(duì)多種抗體的聯(lián)合運(yùn)用，推薦HBME-1和CK19作為鑒別診斷抗體之一[2-4]。實(shí)際運(yùn)用中發(fā)現(xiàn)有一定程度的假陽(yáng)性和假陰性，現(xiàn)檢測(cè)HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌、濾泡性腺瘤和橋本甲狀腺炎組織學(xué)標(biāo)本的表達(dá)，探討3種抗體在甲狀腺乳頭狀癌鑒別診斷中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇該科2013年1月至2015年12月甲狀腺腺葉切除標(biāo)本85例，術(shù)后標(biāo)本經(jīng)組織學(xué)診斷為甲狀腺乳頭狀癌55例，包括45例經(jīng)典型和10例濾泡型；甲狀腺濾泡性腺瘤15例；橋本甲狀腺炎15例。所有組織學(xué)切片均經(jīng)2名高年資醫(yī)師重復(fù)確認(rèn)。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照WHO《內(nèi)分泌器官腫瘤病理學(xué)與遺傳學(xué)(2004年版)》標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法 腫瘤標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm切片。抗體CD117購(gòu)自Dako公司，1∶600稀釋；抗體HBME-1和CK19購(gòu)自邁新公司，即用型。采用Envision 2步法免疫組織化學(xué)染色法，操作步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) HBME-1陽(yáng)性定位于腫瘤細(xì)胞質(zhì)，為淡黃色至棕黃色胞漿或周邊毛刷樣著色；CK19陽(yáng)性呈細(xì)胞膜棕黃色線樣著色；CD117陽(yáng)性定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，為棕黃色胞質(zhì)細(xì)胞顆?；虬ぞ€樣著色。選取有代表性的區(qū)域，按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占腫瘤細(xì)胞的比例分級(jí)，<5%為陰性(-)，5%～25%為弱陽(yáng)性(+)，26%～50%為中等陽(yáng)性(++)，>50%為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；診斷學(xué)一致性檢驗(yàn)應(yīng)用Kappa一致性檢驗(yàn)，K值越大，吻合度越高，K≥0.7表示吻合度較強(qiáng)，0.4≤K<0.7表示吻合度一般，K<0.4表示吻合度較弱。

2 結(jié) 果

2.1 HBME-1在3種組織標(biāo)本的表達(dá)結(jié)果比較 45例經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌中HBME-1陰性6例，弱陽(yáng)性4例，中等陽(yáng)性9例，強(qiáng)陽(yáng)性26例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中HBME-1陰性1例，弱陽(yáng)性2例，中等陽(yáng)性2例，強(qiáng)陽(yáng)性5例。15例濾泡型腺瘤，HBME-1陰性12例，弱陽(yáng)性2例，中等陽(yáng)性1例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。15例橋本甲狀腺炎中HBME-1陰性9例，弱陽(yáng)性6例，中等陽(yáng)性0例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。HBME-1的陽(yáng)性表達(dá)率在良性組與惡性組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=28.825，P<0.05)，一致性檢驗(yàn)Kappa=0.582。HBME-1檢測(cè)惡性組的敏感性為87.3%，特異性為70.0%。見圖1～4。

圖1 HBME-1在經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖2 HBME-1在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖3 HBME-1在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達(dá)

圖4 HBME-1在橋本甲狀腺炎的表達(dá)

2.2 CK19在3種組織標(biāo)本的表達(dá)結(jié)果比較 45例經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌中CK19陰性1例，弱陽(yáng)性3例，中等陽(yáng)性6例，強(qiáng)陽(yáng)性36例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中CK19陰性0例，弱陽(yáng)性1例，中等陽(yáng)性1例，強(qiáng)陽(yáng)性8例。15例濾泡型腺瘤中CK19陰性9例，弱陽(yáng)性2例，中等陽(yáng)性4例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。15例橋本甲狀腺炎中CK19陰性7例，弱陽(yáng)性6例，中等陽(yáng)性2例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。CK19的陽(yáng)性表達(dá)率在良性組與惡性組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=26.826，P<0.05)，一致性檢驗(yàn)Kappa=0.551。CK19檢測(cè)惡性組的敏感性為97.8%，特異性為53.3%。見圖5～8。

圖5 CK19在經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖6 CK19在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖7 CK19在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達(dá)

圖8 CK19在橋本甲狀腺炎的表達(dá)

2.3 CD117在3種組織標(biāo)本的表達(dá)結(jié)果比較 45例經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌中CD117陰性42例，弱陽(yáng)性3例，中等陽(yáng)性0例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中CD117陰性9例，弱陽(yáng)性1例，中等陽(yáng)性0例，強(qiáng)陽(yáng)性0例。15例濾泡型腺瘤中CD117陰性1例，弱陽(yáng)性1例，中等陽(yáng)性5例，強(qiáng)陽(yáng)性8例。15例橋本甲狀腺炎中CD117陰性0例，弱陽(yáng)性3例，中等陽(yáng)性6例，強(qiáng)陽(yáng)性6例。CD117的陽(yáng)性表達(dá)率在良性組與惡性組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=65.313，P<0.05)，一致性檢驗(yàn)Kappa=0.874。CD117檢測(cè)良性組的敏感性為96.7%，特異性為92.7%。見圖9～12。

圖9 CD117在經(jīng)典型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖10 CD117在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)

圖11 CD117在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達(dá)

圖12 CD117在橋本甲狀腺炎的表達(dá)

3 討 論

手術(shù)標(biāo)本中甲狀腺乳頭狀癌與橋本甲狀腺炎合并存在，橋本甲狀腺炎患者易患甲狀腺乳頭狀癌。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為橋本甲狀腺炎引發(fā)的甲狀腺濾泡上皮改變是乳頭狀癌的早期事件，該觀點(diǎn)還缺乏有力的直接證據(jù)。隨著超聲技術(shù)和細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)的不斷進(jìn)步及普遍應(yīng)用，越來(lái)越多的微小癌被檢出，其中大多數(shù)同樣合并橋本甲狀腺炎。甲狀腺乳頭狀癌的組織學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)無(wú)特異性和排他性，實(shí)際運(yùn)用中需要與多種良性疾病鑒別，最常見的是與橋本甲狀腺炎的不典型濾泡上皮細(xì)胞鑒別。當(dāng)甲狀腺微小癌直徑小于0.5 cm，如無(wú)典型乳頭狀結(jié)構(gòu)，鏡下表現(xiàn)為大量膠原組織散在分布的濾泡結(jié)構(gòu)，病理醫(yī)師將面對(duì)良惡性鑒別的挑戰(zhàn)[2]。

HBME-1是間皮細(xì)胞表面微絨毛的一種抗原成分，是一種酸性氨基多聚糖蛋白，主要成分是透明質(zhì)酸，有研究報(bào)道在甲狀腺乳頭狀癌中高表達(dá)[5-6]。本研究結(jié)果顯示，HBME-1在惡性組的表達(dá)率顯著高于良性組，且強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)病例集中于惡性組，一致性檢驗(yàn)顯示其診斷效能一般，但具有較好的敏感性，特異性不高，主要原因是橋本甲狀腺炎中會(huì)有弱陽(yáng)性表達(dá)，導(dǎo)致假陽(yáng)性偏高。

CK19在甲狀腺乳頭狀癌高表達(dá)，但在甲狀腺良性病變中的表達(dá)也被學(xué)者關(guān)注[2]。本研究結(jié)果表明，CK19在良惡性組之間的表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但一致性檢驗(yàn)顯示診斷效能一般，敏感性及特異性分別為97.8%和53.3%，雖然敏感性高于HBME-1，但特異性顯著低于HBME-1，兩者都不適合單獨(dú)用于甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷。

CD117是由c-kit基因(4q11～q21)編碼的Ⅲ型跨膜酪氨酸激酶受體家族成員，是白色斑點(diǎn)(W)位點(diǎn)的等位基因，已知W位點(diǎn)在肥大細(xì)胞、生殖細(xì)胞、黑色素細(xì)胞的分化中起重要作用。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)CD117表達(dá)于人體多種細(xì)胞中，目前CD117廣泛應(yīng)用于胃腸道間質(zhì)腫瘤、精原細(xì)胞瘤、嫌色性腎細(xì)胞癌、腺樣囊性癌等多種腫瘤的診斷與鑒別診斷中[7]。本研究結(jié)果證實(shí)，CD117在甲狀腺乳頭狀癌的表達(dá)率較良性病變顯著降低，且陽(yáng)性表達(dá)病例均未出現(xiàn)中等及強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，其在良惡性組間的表達(dá)水平與HBME-1和CK19完全相反，兩者聯(lián)合可以反向驗(yàn)證，提高良惡性鑒別的準(zhǔn)確性。即使單獨(dú)參考CD117的表達(dá)，其與良惡性組的診斷一致性Kappa=0.874，CD117檢測(cè)良性組的敏感性為96.7%，特異性為92.7%，提示其診斷價(jià)值優(yōu)于HBME-1和CK19。

綜上所述，甲狀腺乳頭狀癌與良性病變鑒別診斷時(shí)，CD117診斷效能優(yōu)于HBME-1和CK19，且CD117與HBME-1、CK19陽(yáng)性表達(dá)率均相反，實(shí)際工作中可聯(lián)合使用，提高診斷的準(zhǔn)確性。

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Expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid carcinoma and its significance

ZENGZheng,LIRuiping,ZHAOMin,WEIYanhua,SHIZhongyuan

(DepartmentofPathology,JiangsuProvinceHospitalofIntegratedTraditionalChineseMedicineandWesternMedicine/JiangsuProvinceAcademyofTraditionalChineseMedicine,Nanjing,Jiangsu210028,China)

Objective To explore the value of three antibodies in the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma,by detecting the expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis tissues.Methods Totally 85 cases were collected from January 2013 to December 2015,including papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis.They were immunohistochemical stained by HBME-1,CK19 and CD117.SPSS16.0 software was used to analyze the relationship between the staining results with different pathological changes.Results The positive rates of HBME-1,CK19 and CD117 were 87.3%,98.2%,and 7.3%,respectively.The positive expression of them in benign and malignant groups had significant difference (P<0.05) and their consistency checking Kappa were 0.582,0.551,and 0.874,respectively.Conclusion In the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma and benign lesions,CD117 is better than HBME-1 and CK19.It′s possible to use a combination of them in practice.

thyroid carcinoma； immunohistochemistry； HBME-1； CK19； CD117

曾錚，男，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤病理研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.009

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1673-4130(2016)20-2825-04

2016-03-22

2016-06-06)