王永昌，翟雙雙，李孟孟，王參參，楊琳，王文策

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州510642）

不同產(chǎn)地桑枝莖葉營(yíng)養(yǎng)成分分析及四川白鵝對(duì)其養(yǎng)分利用率的測(cè)定

王永昌，翟雙雙，李孟孟，王參參，楊琳*，王文策

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州510642）

試驗(yàn)采集了14個(gè)桑枝莖葉樣品，測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分并通過(guò)代謝試驗(yàn)方法評(píng)定四川白鵝對(duì)其養(yǎng)分利用率。結(jié)果表明：（1）不同產(chǎn)地桑枝莖葉的營(yíng)養(yǎng)成分有差異，粗蛋白質(zhì)含量較高，其變化范圍為18.59%～26.81%；鈣含量較高，為1.49%～4.15%；含磷量低，平均含量為0.32%；粗脂肪含量為1.46%～3.79%；粗纖維含量為15.26%～29.28%，平均值為20.72%；中性洗滌纖維（NDF）含量為37.41%～57.34%，平均值為45.37%；酸性洗滌纖維（ADF）含量的變化范圍為16.85%～26.32%，平均值為20.91%。（2）不同產(chǎn)地單寧含量差異大，變化范圍為0.13%～0.47%。（3）不同產(chǎn)地桑枝莖葉的表觀代謝能（AME）和真代謝能（TME）均值變化范圍分別為3.00～4.92 MJ/kg和3.74～5.66 MJ/kg。（4）不同產(chǎn)地桑枝莖葉的NDF利用率、酸性洗滌纖維利用率、蛋白質(zhì)真利用率存在差異（P＜0.05），并且利用率均較低。綜上，桑枝莖葉粗蛋白質(zhì)、粗灰分含量高，鈣多磷少，但由于其含有抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)單寧和活性物質(zhì)等因素，導(dǎo)致蛋白質(zhì)利用率低，AME和TME也較低。

桑枝莖葉；鵝；代謝能；養(yǎng)分利用率

隨著養(yǎng)鵝業(yè)的飛速發(fā)展，常規(guī)飼料原料已不能滿足其生產(chǎn)的需要，新型飼料原料的開(kāi)發(fā)成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的焦點(diǎn)。我國(guó)是傳統(tǒng)的種桑養(yǎng)蠶大國(guó)，桑樹(shù)廣泛分布于全國(guó)各地，桑葉資源十分豐富。桑葉作為一種蛋白質(zhì)含量高、纖維含量相對(duì)較低同時(shí)富含微量元素的非常規(guī)新型飼料，如能將其有效應(yīng)用到鵝飼糧中，將可以大幅度降低飼料成本，提高養(yǎng)鵝經(jīng)濟(jì)效益。吳萍和李龍（2006）研究表明，桑葉干物質(zhì)中的蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)高達(dá)28%，其含量比禾本科牧草高80%以上，比熱帶豆科牧草高40%～50%，是優(yōu)良的蛋白質(zhì)飼料。秦儉等（2010）研究報(bào)道，1 hm2桑園可年產(chǎn)桑葉蛋白質(zhì)1.65 t左右，相當(dāng)于3 t大豆的粗蛋白質(zhì)含量。李正濤等（2000）研究表明，桑葉蛋白質(zhì)是優(yōu)良的蛋白質(zhì)補(bǔ)充料。但是，目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)鵝的飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定報(bào)道較少，鵝的飼料配制大多數(shù)參考雞或鴨的營(yíng)養(yǎng)參數(shù)，沒(méi)有專(zhuān)門(mén)鵝飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值數(shù)據(jù)庫(kù)。王雯熙等（2012）通過(guò)體外產(chǎn)氣法估測(cè)29種桑葉的代謝能，其值變化范圍為5.05～8.09 MJ/kg。本試驗(yàn)采集了14個(gè)桑枝莖葉樣品，測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分以及四川白鵝對(duì)桑枝莖葉的養(yǎng)分利用率，通過(guò)對(duì)桑枝莖葉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行全面系統(tǒng)地分析，為桑枝莖葉在水禽飼料中的合理利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料制備分別將采集到的14個(gè)桑枝莖葉樣品粉碎處理，利用四分法將桑枝莖葉粉混合均勻，加入適量的多維多礦及適當(dāng)蒸餾水后制粒，風(fēng)干，制成試驗(yàn)飼糧，封裝于自封袋中，置于-4℃冰柜中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2試驗(yàn)動(dòng)物分組選取健康、體重相近的成年雄性四川白鵝36只，隨機(jī)分成6個(gè)組（5個(gè)試驗(yàn)飼料組，1個(gè)空腹組），每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只鵝。每1個(gè)桑枝莖葉樣品對(duì)應(yīng)1個(gè)試驗(yàn)飼料組。

1.3試驗(yàn)動(dòng)物管理在正式代謝試驗(yàn)開(kāi)始前，將選取好的四川白鵝由室外場(chǎng)地轉(zhuǎn)移到代謝室內(nèi)特定的鵝代謝籠中，進(jìn)行2周的適應(yīng)。適應(yīng)期間，注意觀察鵝只的健康和采食飲水情況。在適應(yīng)的第一周，把試驗(yàn)鵝泄殖腔周?chē)挠鹈蝺?，在泄殖腔處縫合實(shí)驗(yàn)室自制的直徑為5.5 cm塑料瓶蓋（瓶蓋面被挖空及四周鉆有6或8個(gè)小孔）。適應(yīng)期間飼喂配合飼糧，每日飼喂2次，上午8∶00飼喂一次，下午5∶00飼喂一次，自由飲水，24 h人工光照，適應(yīng)期及恢復(fù)期內(nèi)每三天清洗代謝室，在強(qiáng)飼12 h前徹底清洗代謝室，并檢查試驗(yàn)鵝縫合的蓋子是否牢固。

1.4代謝試驗(yàn)方法在參考Sibbald（1976）TME法基礎(chǔ)上采用排空強(qiáng)飼法，采用24+24 h模式。根據(jù)鵝的消化生理特點(diǎn)確定具體的代謝試驗(yàn)流程：適應(yīng)期為2周，飼喂配合飼糧，乳頭式飲水裝置，自由采食、飲水；預(yù)飼期3 d，飼喂試驗(yàn)飼糧；禁飼排空24 h；強(qiáng)飼當(dāng)天，每只鵝強(qiáng)飼量為50 g，排泄物準(zhǔn)確計(jì)時(shí)后一共收集24 h（頻率為4h收集一次）；空腹組采用平行對(duì)照方式。整個(gè)代謝試驗(yàn)過(guò)程中鵝自由飲水，24 h人工光照。

1.5排泄物的收集和處理將收集排泄物的瓷盤(pán)稱重標(biāo)記，每4 h組織試驗(yàn)人員收集一次排泄物（最后一次收集時(shí)用蒸餾水反復(fù)沖洗滯留在收集封口袋上的排泄物），將收集的排泄物倒入相應(yīng)標(biāo)記的瓷盤(pán)中，并滴入適量10%的鹽酸固定氨氣，防止揮發(fā)。之后在120℃烘箱中滅菌10～15 min，再將溫度下調(diào)至65℃烘干，烘干后取出瓷盤(pán)回潮24 h，稱重記錄后將糞樣粉粹，過(guò)40目篩轉(zhuǎn)入小封口袋（封口袋上用記號(hào)筆記錄），于-4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6測(cè)定指標(biāo)及方法測(cè)定14個(gè)桑枝莖葉樣品和排泄物的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷等測(cè)定方法參照張麗英等（2007）的研究方法；粗纖維、中性洗滌纖維（NDF）及酸性洗滌纖維（ADF）測(cè)定參照《飼料分析與飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》第三版中的濾袋法，采用ANKON A200i型半自動(dòng)纖維分析儀測(cè)定；能值測(cè)定采用德國(guó)IKA C200全自動(dòng)量熱儀測(cè)定；單寧采用丙酮提取-分光光度法測(cè)定。

1.7計(jì)算公式

式中：計(jì)算代謝能以空腹為內(nèi)源排出量。

1.8數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)經(jīng)Excel整理和初步處理后，使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行One-ANOVA方差分析，并進(jìn)行Duncan’s多重比較以及獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)顯著水平為P＜0.05，試驗(yàn)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2　結(jié)果

2.1不同產(chǎn)地桑枝莖葉的營(yíng)養(yǎng)成分及抗?fàn)I養(yǎng)因子含量由表1可知，14個(gè)桑枝莖葉樣品總能含量為16.40～20.29 MJ/kg，平均值為17.99 MJ/kg。粗蛋白質(zhì)含量變化范圍為18.59%～26.81%，平均值為22.04%，其中最高達(dá)26.81%。粗脂肪含量為1.46%～3.79%，平均值為2.29%。粗灰分含量均高于10%，最高達(dá)到了17.29%。鈣含量的平均值為2.57%，磷含量的平均值為0.32%，表現(xiàn)鈣多磷少的特點(diǎn)。除了干物質(zhì)和總能的變異系數(shù)小于10%，其他常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分變異系數(shù)均大于10%，其中鈣含量的變異系數(shù)最大。粗纖維含量為15.26%～29.28%，平均值為20.72%。NDF含量在37.41%～57.34%，平均值為45.37%。酸性洗滌纖維含量的變化范圍在16.85%～26.32%，平均值為20.91%?？?fàn)I養(yǎng)因子單寧含量差異很大，變異系數(shù)為40.28%，單寧含量變化范圍為0.13%～0.47%，平均值為0.28%。

表1　不同產(chǎn)地桑枝莖葉樣品的營(yíng)養(yǎng)成分含量

2.2四川白鵝對(duì)不同產(chǎn)地桑枝莖葉養(yǎng)分利用率的測(cè)定由表2和表3可知，不同產(chǎn)地桑枝莖葉的AME、TME、能量表觀利用率、能量真利用率差異較大（P＜0.05）。AME和TME均值變化范圍分別是3.00～4.92 MJ/kg和3.74～5.66 MJ/kg，能量表觀利用率和真利用率的均值變化范圍分別是16.13%～27.00%和20.33%～31.02%，TME最高的為廣東華農(nóng)3，為5.66 MJ/kg。不同產(chǎn)地桑枝莖葉的NDF利用率、酸性洗滌纖維利用率、蛋白質(zhì)真利用率存在差異（P＜0.05），并且利用率都不高，酸性洗滌纖維利用率、NDF利用率分別為22.64%～39.64%和15.61%～33.35%，平均值分別為31.77%和24.19%，蛋白質(zhì)真利用率最高的是廣東化州產(chǎn)地，為30.98%，最低為廣西上林產(chǎn)地，為18.83%。

表2　不同產(chǎn)地桑枝莖葉代謝能和能量利用率

表3　不同產(chǎn)地桑枝莖葉NDF、ADF及蛋白質(zhì)真利用率%

3　討論

3.1桑枝莖葉營(yíng)養(yǎng)成分含量國(guó)內(nèi)外有不少研究對(duì)桑枝莖葉的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了分析，但因品種、產(chǎn)地、收獲季節(jié)、加工工藝等不同，分析結(jié)果差異較大。孫雙印等（2008）研究表明，不同季節(jié)、不同枝葉比例的桑枝莖葉的營(yíng)養(yǎng)成分差異很大。丁佐龍（1999）研究表明，桑枝莖葉的粗蛋白質(zhì)含量為16.80%～23.02%，粗脂肪含量為3.67%～4.03%，粗纖維含量為10.60%～14.56%，粗灰分含量為7.53%～9.96%。張愛(ài)芹（2004）研究表明，桑葉的粗蛋白質(zhì)含量為15.00%～30.00%，粗脂肪含量為4.00%～10.00%，粗纖維含量為8.00%～12.00%，粗灰分含量為8.00%～12.00%，鈣含量為1.00%～3.00%，總磷含量為0.30%～0.60%。

另外，桑枝莖葉中的鈣磷含量不平衡，表現(xiàn)為鈣少磷多的特點(diǎn)，所以實(shí)際生產(chǎn)中，要注意平衡飼料中鈣磷比例。桑枝莖葉中的鈣磷比例本身并不大，數(shù)據(jù)差異可能與試驗(yàn)樣品的采集部位有關(guān)。據(jù)王芳等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，鈣含量下位葉比上位葉高，磷含量剛好相反，然而研究人員一般采集一些下位桑枝莖葉進(jìn)行試驗(yàn)（上位葉用于養(yǎng)蠶），從而致使鈣磷比例失衡。另外，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)桑枝莖葉中的粗灰分含量很高，均高于10%，說(shuō)明桑枝莖葉中礦物質(zhì)含量較高。蘇海涯等（2001）研究也表明，桑葉中不僅含有鈣磷，還含有豐富的鉀、鈉、鐵、錳、銅等礦物質(zhì)。本試驗(yàn)測(cè)定的桑枝莖葉的大部分營(yíng)養(yǎng)成分含量都在文獻(xiàn)資料報(bào)道的范圍內(nèi)，只有粗脂肪含量低于文獻(xiàn)報(bào)道，這可能與采集桑枝莖葉的品種、時(shí)節(jié)及產(chǎn)地等因素有關(guān)。

3.2桑枝莖葉抗?fàn)I養(yǎng)因子含量單寧又稱單寧酸或鞣酸，是一類(lèi)水溶性酚類(lèi)化合物，是廣泛存在于植物體內(nèi)的一類(lèi)次生代謝產(chǎn)物。單寧可結(jié)合蛋白質(zhì)（Frazier等，2010）、糖類(lèi)（Lacassagne等，1988）、金屬離子（Al-Mamary等，2001）等形成難以消化吸收的復(fù)合物，從而降低飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。關(guān)于桑葉的單寧含量的報(bào)道較少，肖洪等（2013）采用超聲波輔助提取-分光光度法測(cè)得不同品種桑葉的單寧含量為5.10～9.40 mg/g，高于本試驗(yàn)結(jié)果。本試驗(yàn)中14個(gè)不同產(chǎn)地桑枝莖葉樣品單寧含量為1.30～4.70 mg/g，可能是由于本試驗(yàn)采用的是丙酮提取-分光光度法，導(dǎo)致提取率不高，含量偏低。

目前，關(guān)于降低植物性原料中單寧方法的報(bào)道較多，主要包括理化方法和生物降解法。單寧作為桑葉中最主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子，如果得到有效的降解，這對(duì)于桑葉作為蛋白質(zhì)飼料原料的開(kāi)發(fā)具有極其重要的意義。Canbolat等（2007）用不同濃度的NaOH溶液（0、20、40、60和80 g/L），分別對(duì)2種樹(shù)葉處理7 d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著堿液濃度的升高，樣品中單寧含量直線下降。Marzo和Urdaneta（2002）研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)械擠壓可以顯著降低蕓豆中的單寧和多酚類(lèi)物質(zhì)等抗?fàn)I養(yǎng)因子含量。然而傳統(tǒng)理化法降低植物單寧的同時(shí)，也降低了其他營(yíng)養(yǎng)成分含量，生物降解法有效避免了此缺點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，霉菌發(fā)酵顯著降低了刺槐中單寧含量并且提高了粗蛋白質(zhì)含量，也顯著提高了其干物質(zhì)消化率（Rakesh等，2000）。Towo等（2006）研究表明，發(fā)酵可以顯著降低高粱中酚類(lèi)物質(zhì)和植酸鹽的含量，并能提高其鐵的體外消化率。

3.3桑枝莖葉養(yǎng)分利用率的評(píng)價(jià)

3.3.1桑枝莖葉代謝能及能量利用率本試驗(yàn)測(cè)定14個(gè)桑枝莖葉的代謝能和能量利用率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的AME、TME、能量表觀利用率以及能量真利用率均有顯著差異，AME范圍為3.00～4.92 MJ/kg，TME為3.74～5.66 MJ/kg，能量表觀利用率為16.31%～27.00%，能量真利用率為20.33%～31.02%，這表明鵝對(duì)桑枝莖葉的能量利用率不高。造成這種原因可能是與桑葉中活性脫氧野尻霉素（DNJ）和黃酮有關(guān)，李有貴等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，桑葉中的DNJ、黃酮等活性物質(zhì)具有抑制與糖代謝有關(guān)酶和血液脂肪酶的作用，從而降低了動(dòng)物對(duì)飼料中碳水化合物及脂肪的代謝和吸收能力，最終降低了動(dòng)物對(duì)飼糧的利用率。

目前關(guān)于鵝對(duì)桑枝莖葉代謝能研究報(bào)道較少。劉紅和葉志毅（2001）通過(guò)體內(nèi)瘤胃降解試驗(yàn)，計(jì)算出桑葉的代謝能可達(dá)8.94 MJ/kg。Al-Kirshi等（2013）試驗(yàn)研究表明，桑葉對(duì)蛋雞和肉雞的表觀代謝能分別為7.7、7.6 MJ/kg。黃璇等（2015）研究4個(gè)品種的桑葉對(duì)鵝的表觀代謝能為7.69～8.68 MJ/kg。上述研究表明，鵝對(duì)桑葉表觀代謝能高于雞，原因可能是由于桑葉的纖維含量較高。楊曙明等（1995）報(bào)道鵝對(duì)粗纖維的代謝能高于雞。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的代謝能都高于本試驗(yàn)結(jié)果，這可能與代謝方法、桑葉本身差異和動(dòng)物品種有關(guān)。

3.3.2桑枝莖葉的ADF和NDF利用率本研究結(jié)果表明，不同產(chǎn)地桑枝莖葉的NDF利用率為22.64%～39.64%，平均值為31.77%；酸性洗滌纖維利用率為15.16%～33.35%，平均值為24.19%。NDF利用率和酸性洗滌纖維利用率的差異可能與桑枝莖葉采摘季節(jié)有關(guān)，季節(jié)影響著桑枝莖葉的生理結(jié)構(gòu)。吳秋玨和徐廷生（2006）研究報(bào)道，NDF利用率的大小通常取決于NDF中木質(zhì)素所占的比例。Al-Kirshi等（2013）研究報(bào)道，桑葉對(duì)蛋雞和肉雞的NDF利用率分別為29.00%和27.00%。黃璇等（2015）試驗(yàn)指出，鵝對(duì)桑葉粗纖維利用率為29.28%～35.26%。本試驗(yàn)的NDF利用率均值略高于上述文獻(xiàn)報(bào)道，說(shuō)明對(duì)于桑葉的NDF鵝比雞的利用率稍高，也符合鵝比雞更耐粗飼料的生理規(guī)律。

3.3.3桑枝莖葉的粗蛋白質(zhì)真利用率桑枝莖葉粗蛋白質(zhì)含量比較高，其蛋白質(zhì)含量與優(yōu)質(zhì)牧草相當(dāng)。相關(guān)研究報(bào)道桑枝莖葉粗蛋白質(zhì)含量范圍為15%～35%，具體含量主要取決于桑枝莖葉的品種、采摘季節(jié)、產(chǎn)地及桑葉與桑枝之間的比例。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，粗蛋白質(zhì)含量變化范圍為18.59%～26.81%，平均值為22.04%，其中最高達(dá)26.81%；粗蛋白質(zhì)真利用率為18.83%～30.98%，平均值為26.48%。

本試驗(yàn)中雖然桑葉粗蛋白質(zhì)含量豐富，但鵝對(duì)其真利用率卻不高，最高不超過(guò)30%，這主要與單寧降低蛋白質(zhì)的利用率有關(guān)（Vilarin~o等，2009；Barry和Manley，1984）。King等（2000）用單寧含量不同的高粱對(duì)北京鴨進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)高單寧含量顯著降低了蛋白質(zhì)的利用率。Barahona等（1997）試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單寧能提高綿羊糞氮排出量。然而，Rakesh等（2000）研究發(fā)現(xiàn)，霉菌發(fā)酵顯著降低了刺槐中單寧含量并且提高了粗蛋白質(zhì)含量，也顯著提高了其消化率。因此為了提高動(dòng)物對(duì)植物性桑葉蛋白質(zhì)的利用率，可以通過(guò)發(fā)酵等特殊處理去除桑葉中部分單寧再用于動(dòng)物生產(chǎn)，目前有關(guān)微生物降解單寧的研究報(bào)道較多（Frutos等2004；Makkar，2003；Singh等，2001）。

4　結(jié)論

桑枝莖葉有蛋白質(zhì)含量高、鈣多磷少等特點(diǎn)，但由于其含有抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)單寧和活性物質(zhì)等因素，導(dǎo)致蛋白質(zhì)利用率低，AME和TME也較低，采取合理的工藝手段來(lái)改善桑枝莖葉的養(yǎng)分利用率和能量利用率，尚有待于進(jìn)一步研究。

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This experiment was conducted to analysis the nutrient contents of mulberry twig leaves from different areas and study its nutrient utilization efficiency by Sichuan White geese.The study collected 14 mulberry twig leaves，and determined its nutritional components and nutrient utilization efficiency in Sichuan White geese.The results showed that：（1）The nutrient components of mulberry leaf from different areas were various.The content of crude protein in mulberry leaf samples were abundant，which ranged from 18.59%to 26.81%；the calcium content was fluctuated between 1.49%and 4.15%，while the phosphorus content was low and the average content was 0.32%；the crude fat content ranged from 1.46% to 3.79%；the crude fiber（CF）content was within the range of 15.26～29.28%and the average value of crude fiber（CF）was 20.72%；neutral detergant fiber（NDF）content fluctuated between 37.41%and 57.34%，and acid detergant fiber（ADF）content fluctuated between 16.85%and 26.32%.（2）The tannin level was changed greatly which ranged from 0.13%to 0.47%.（3）Apparent metabolizable energy（AME）and true metabolizable energy（TME）of the mulberry twig leaves were 3.00～4.92 MJ/kg and 3.74～5.66 MJ/kg from different areas.（4）NDF and ADF utilization，true availability of crude protein differed from different areas（P＜0.05），and the utilization rate was low.In conclusion，the mulberry twig leaves samples had more crude protein and ash，less phosphorus and more calcium.Because of the anti-nutrients factors such as tannins and other active substances，the utilization of protein was extremely low，as well as AME and TME.

mulberry twig leaves；geese；metabolizable energy；nutrient utilization

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20161605

S816.11

A

1004-3314（2016）16-0018-05

公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)（201303143）；教育部博士點(diǎn)新教師聯(lián)合資助基金（20134404120024）；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（nycytx-45-09）；動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題（2004DA125184F1308）