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1 國家食品藥品監(jiān)督管理總局廣州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心?。◤V州　510663）

2 廣州市生物醫(yī)用血液凈化材料研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室?。◤V州　510663）

用EDTA滴定法檢測(cè)血液透析濃縮物中鈣、鎂離子濃度的探討

葉曉燕1田冶1任雅清2張?jiān)?

1 國家食品藥品監(jiān)督管理總局廣州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（廣州510663）

2 廣州市生物醫(yī)用血液凈化材料研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（廣州510663）

內(nèi)容提要： 依照GB/T 15452-2009的要求，用EDTA滴定法檢測(cè)血液透析濃縮物中鈣、鎂離子。通過改變不同的測(cè)試條件，分析影響鈣、鎂離子濃度的因素，得到的結(jié)論是：如配制透析液及實(shí)驗(yàn)過程中使用的水為三級(jí)以上實(shí)驗(yàn)用水，鈣、鎂離子滴定過程是否加入硫酸、過硫酸鉀、三乙醇胺溶液以及是否煮沸，對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果無顯著影響，由此獲得準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、高效的檢測(cè)方法。

EDTA滴定法血液透析濃縮物鈣離子鎂離子

1.血液透析及相關(guān)治療用濃縮物及其檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

血液透析濃縮物含有高濃度電解質(zhì)，其提供的形式可以是液體或者干粉，使用時(shí)按指定比例用透析用水稀釋成與血液電解質(zhì)濃度接近的透析液，配套血液透析設(shè)備以維持正常電解質(zhì)水平。由于透析病人的血鈣水平多數(shù)偏低，透析時(shí)應(yīng)使血鈣達(dá)到正?；蜉p度正平衡，透析液中鈣離子的常見濃度為1.25mmol/L、1.5mmol/L及1.75mmol/ L；透析病人常有高鎂血癥，透析液的鎂濃度一般略低于正常血漿鎂濃度，透析液中鎂離子的常見濃度為0.5mmol/L。

根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY 0598-2006《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》［1］，血液透析濃縮物中鈣、鎂離子的仲裁檢驗(yàn)法為依據(jù)GB/T 15452-2009《工業(yè)循環(huán)冷卻水中鈣、鎂離子的測(cè)定EDTA滴定法》進(jìn)行滴定。檢驗(yàn)液為濃縮物按使用說明要求的混合比例用透析用水配成所標(biāo)示濃度（標(biāo)示量）的透析液。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)扣除檢驗(yàn)用水（透析用水）中所含被測(cè)物對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成的影響。

2.EDTA滴定法檢測(cè)血液透析濃縮物中鈣、鎂離子的原理［2］

鈣離子在pH12～13滴定時(shí)，EDTA滴定液與溶液中游離的鈣離子形成絡(luò)合物，在鈣-羧酸指示劑條件下，溶液顏色由紫紅色變成亮藍(lán)色。

鎂離子在pH為10時(shí)，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液測(cè)定鈣、鎂離子合量，在鉻黑T指示劑下由紫紅色變成純藍(lán)色為終點(diǎn)，由鈣鎂合量中減去鈣離子含量為鎂離子含量。

3.EDTA滴定法檢測(cè)血液透析濃縮物中鈣、鎂離子的影響因素及其方法探討［2］

3.1試驗(yàn)步驟及方法設(shè)計(jì)

分析過程中僅使用分析純?cè)噭┖头螱B/T 6682-2008中規(guī)定的三級(jí)實(shí)驗(yàn)用水，透析用水應(yīng)符合行標(biāo)YY 0572-2005要求。

GB/T 15452-2009中鈣離子的測(cè)定步驟：用移液管吸取50mL透析液于250mL錐形瓶中，加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸近干，取下冷卻至室溫加入50mL水，3mL三乙醇胺，7mL氫氧化鉀溶液和約0.2g鈣－羧酸指示劑，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，接近終點(diǎn)時(shí)速度要緩慢，當(dāng)溶液顏色由紫紅色變成亮藍(lán)色時(shí)為終點(diǎn)。鎂離子的測(cè)定步驟：用移液管吸取50mL透析液于250mL錐形瓶中，加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸近干，取下冷卻至室溫加入50mL水，3mL三乙醇胺溶液，用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH近中性，再加5mL胺－氯化氨緩沖溶液和三滴鉻黑T指示液，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，接近終點(diǎn)時(shí)速度要緩慢，當(dāng)溶液顏色由紫紅色變成純藍(lán)色時(shí)為終點(diǎn)。

試驗(yàn)步驟分析：（1）“加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸近干”，該步驟是用硫酸鉀氧化有機(jī)磷，以消除原水中有機(jī)磷等物質(zhì)對(duì)測(cè)定的干擾。實(shí)驗(yàn)中無論是血液透析濃縮液還是用于稀釋的透析用水均無該種物質(zhì)。（2）“取下冷卻至室溫加入50mL水，3mL三乙醇胺溶液”，三乙醇胺溶液用以消除鐵、鋁離子對(duì)測(cè)定的干擾，試驗(yàn)樣品中沒有這兩種物質(zhì)，理論上可以省略此步驟。以下設(shè)計(jì)四種方法分析各實(shí)驗(yàn)步驟對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響：

（1）免煮法：免去“加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸近干，取下冷卻至室溫加入50mL水，3mL三乙醇胺”步驟。

（2）免煮法（加三乙醇胺）：免去“加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸近干，取下冷卻至室溫加入50mL水”步驟。

（3）加熱煮沸法（煮至約3mL）：完全按照標(biāo)準(zhǔn)中所列的步驟，樣品加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸至約3mL。

（4）加熱煮沸法（煮至底部沒有水分）：完全按照標(biāo)準(zhǔn)中所列的步驟，樣品加入1mL硫酸溶液和5mL過硫酸鉀溶液加熱煮沸至錐形，瓶底部接近沒有水分，取下冷卻后瓶底無水分并且有一層結(jié)晶狀物質(zhì)，加50ml水后為透明溶液，如加水變渾濁則較大影響鈣鎂的滴定，加水變渾濁時(shí)所滴定數(shù)據(jù)無效。

3.2試驗(yàn)用試劑和樣品

試驗(yàn)用試劑：

（1）硫酸溶液：1+1水溶液；

（2）過硫酸鉀（40g/L）：4g過硫酸鉀，加入100mL水中，超聲溶解；

（3）三乙醇胺：1+2水溶液；

（4）氫氧化鉀（200g/L）：20g氫氧化鉀，加入100mL水中，溶解；

（5）鈣—羧酸指示劑：0.2g鈣—羧酸+100g氯化鉀混合研磨均勻；

（6）乙二胺四乙酸二鈉：c（EDTA）= 0.01005mol/L；

（7）氨—氯化銨緩沖溶液：pH=10；

（8）鉻黑T指示液：0.5g鉻黑T+85mL三乙酸胺+15mL乙醇；

（9）配制透析液用水：符合GB/T 6682-2008中規(guī)定的三級(jí)水，實(shí)驗(yàn)用水：符合GB/T 6682-2008中規(guī)定的三級(jí)水。

試驗(yàn)用樣品：

樣品編號(hào)標(biāo)示量（mmoL/L）鈣離子鎂離子Ⅰ1.75 0.50Ⅱ1.50 0.50Ⅲ1.25 0.50

4.試驗(yàn)結(jié)果

用電感耦合等離子體質(zhì)譜本次實(shí)驗(yàn)用水中Ca2+含量為0.039ppm，Mg2+含量為0.004ppm。三種不同濃度鈣的樣品結(jié)果見表1～3。

表1. 不同方法檢測(cè)樣品Ⅰ結(jié)果比較

表2. 不同方法檢測(cè)樣品Ⅱ結(jié)果比較

7.56 10.02 2.46 1.519560.49446 4）加熱煮沸法（煮至底部沒有水分）7.52 9.96 2.44 1.51152 0.49044 7.58 10.02 2.44 1.52358 0.49044 1.51822 101.21% 0.49178 98.36%

表3. 不同方法檢測(cè)樣品Ⅲ結(jié)果比較

5.總結(jié)

本實(shí)驗(yàn)通過用兩種不同的方法分別測(cè)定鎂標(biāo)示量為0.50mmoL/L、鈣標(biāo)示量分別為1.75、1.50、1.25 mmoL/L的樣品，并根據(jù)G B/T 15452-2009標(biāo)準(zhǔn)中的允許差規(guī)定平行測(cè)定結(jié)果的允許差不大于0.4mg/L。以上每種樣品的兩種方法都平行測(cè)定了3次，所有的測(cè)定結(jié)果都在誤差范圍內(nèi)，均為有效結(jié)果。從結(jié)果可以看出：兩種方法測(cè)得的鈣、鎂離子濃度基本一致，且誤差都在范圍之內(nèi)，表明在透析用水或?qū)嶒?yàn)用水符合YY0572-2005等國家標(biāo)準(zhǔn)的條件下，基本可以消除鐵、鋁、有機(jī)磷等其他雜質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。鈣、鎂離子滴定過程是否加入硫酸、過硫酸鉀、三乙醇胺溶液以及是否煮沸，對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果無顯著影響。

通過四種方法的比較，四種滴定方法檢測(cè)的鈣、鎂離子濃度基本一致，免煮法相對(duì)加熱煮沸法更加方便快捷，省去煮沸、冷卻以及加入掩蔽劑等操作步驟，能極大地減少鈣鎂滴定檢測(cè)時(shí)間。因此，在確保透析用水和實(shí)驗(yàn)用水符合規(guī)定的條件下，免煮法可用于血液透析濃縮物生產(chǎn)過程中鈣、鎂離子中間產(chǎn)品的測(cè)定，生產(chǎn)企業(yè)可以在A濃縮液配制中待原料完全溶解后，在潔凈車間內(nèi)用此法取樣檢測(cè)鈣、鎂離子濃度，合格后進(jìn)行灌裝以確保鈣、鎂離子的合格率。加熱煮沸法會(huì)對(duì)潔凈車間的環(huán)境造成影響，而且檢測(cè)操作時(shí)間過長(zhǎng)，致使透析液在配液罐內(nèi)滯留時(shí)間長(zhǎng)、生產(chǎn)人員等待時(shí)間長(zhǎng)，以上因素都會(huì)限制A濃縮液生產(chǎn)效率及質(zhì)量。因此，當(dāng)透析用水和實(shí)驗(yàn)用水均符合相關(guān)規(guī)定的條件下，可以用免煮法對(duì)A濃縮液的中間產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)。

［1］ 中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》YY 0598-2006，中國標(biāo)準(zhǔn)出版社

［2］ 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《工業(yè)循環(huán)冷卻水中鈣、鎂離子的測(cè)定EDTA滴定法》GB/T 15452-2009，中國標(biāo)準(zhǔn)出版社

Discussion of Calcium， Magnesium Ion Concentration in Hemodialysis Concentrate Detected by EDTA Titration

YE Xiao-yan1TIAN Ye1REN Ya-qing2ZHANG Yun1
1 Guangzhou Medical Instruments Quality Surveillance and Inspection Center of State Food and Drug Administration（Guangzhou510663）
2 Guangzhou Biomedical Blood Purifcation Materials Research and Development Key Laboratory（Guangzhou510663）

According to GB/T 15452-2009， the concentrations of calcium and magnesium ions inhemodialysis concentrate were detectedby EDTA titration. By changing the detected conditions， the factors affecting calcium， magnesium ion concentration were analyzed，the conclusion was∶ If the over laboratory Level three water was used for the preparation of dialysis fuid and water， there was no signifcant effect on the results of the experiment whether or not the sulfuric acid， potassium persulfate， triethanolamine were added and these solutions were boiled during the titration. Therefore the accurate， simple and effcient detection method was obtained.

EDTA titration，hemodialysis concentrate，calcium ions，magnesium ions

1006-6586（2016）09-0066-04

R319

A

2016-05-18

葉曉燕，醫(yī)療器械工程師；任雅清，醫(yī)療器械工程師；田冶，助理研究員；張?jiān)?，技術(shù)員。