王必管，鐘昌寶，李永莉,王丹妹

(1.海南省海口市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科　570203；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗醫(yī)學(xué)院綜合實驗室，?？?571199)

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·經(jīng)驗交流·

妊娠期糖尿病孕婦感染B19與凝血功能的相關(guān)性分析*

王必管1，鐘昌寶1，李永莉2△,王丹妹2

(1.海南省?？谑兄嗅t(yī)醫(yī)院檢驗科570203；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗醫(yī)學(xué)院綜合實驗室，?？?571199)

目的探討妊娠期糖尿病孕婦與B19感染之間的相關(guān)性及對血栓前狀態(tài)的影響。方法收集162例妊娠期糖尿病孕婦血液，同時收集136例健康孕婦血液作為對照。利用PCR法檢測兩組樣本中B19-DNA陽性率。結(jié)果162例妊娠期糖尿病孕婦中B19-DNA陽性率為24.07%(39/162)，136例健康孕婦中B19-DNA陽性率為5.88%(8/136)，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。妊娠期糖尿病孕婦感染B19比較的凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)及纖維蛋白原(Fib)與單純?nèi)焉锲谔悄虿≡袐D差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。健康孕婦感染B19 PT、APTT及Fib比單純健康妊娠者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。妊娠期糖尿病孕婦PT、APTT、及Fib與健康孕婦比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論B19存在于妊娠期糖尿病孕婦血液中，糖尿病孕婦感染B19可能影響其凝血功能。

糖尿??；孕婦；細小病毒B19，人；凝血功能；妊娠期并發(fā)癥

妊娠期糖尿病是指孕婦在妊娠前并沒有患糖尿病和糖耐量異常病癥，是一種發(fā)生在孕婦妊娠期間，被首次發(fā)現(xiàn)或者發(fā)生糖代謝異常[1]。它是由多種因素引起的一種妊娠期間出現(xiàn)的糖代謝異常的并發(fā)癥，一般妊娠期若患上妊娠期糖尿病，會使其血糖調(diào)節(jié)能力明顯降低，往往會給胎兒在宮內(nèi)的發(fā)育及孕婦的健康等問題造成不良影響，對優(yōu)生優(yōu)育是一個很不利的因素。人微小病毒B19(human parvovirus B19)，亦可簡稱為B19，可長期存在于人體多種組織中[2]。有研究報道，B19可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，若妊娠期感染B19，可引起流產(chǎn)、胎兒畸形，嚴重時可致胎兒水腫癥或死胎的發(fā)生[3-7]。也有研究報道表明，妊娠期糖尿病患者比正常孕婦血栓前狀態(tài)存在更加明顯[8]。本文通過PCR方法檢測了妊娠期糖尿病孕婦和健康妊娠孕婦的B19感染情況，探討與凝血功能之間的相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2009年6月至2013年12月海口市中醫(yī)醫(yī)院就診妊娠期糖尿病孕婦162例為試驗組,年齡24～41歲,平均26.5歲,孕周23～40周,平均32周。嚴格按照《婦產(chǎn)科學(xué)》(第6版)[1]的診斷標準。無其他并發(fā)癥的孕婦，妊娠之前無糖尿病、高血脂、心血管、泌尿及血液系統(tǒng)疾病史，無肝腎疾病及血栓性疾病。健康孕婦136例為對照組,年齡22～38歲,平均26歲,孕周25～40周,平均33周。孕前孕期均無糖尿病、高血脂、心血管、泌尿及血液系統(tǒng)疾病史，無肝腎疾病及血栓性疾病。所有孕婦在收集血液前1周內(nèi),都沒有使用對凝血功能、降低血糖或血小板功能等有影響作用的藥物。

1.2方法

1.2.1標本收集所有孕婦各采取4 mL靜脈血,用枸櫞酸鈉抗凝，分兩管，一管B19-DNA檢測，另一管為4 ℃離心并分離出血漿，于-20 ℃保存，用于凝血功能的檢驗。

1.2.2B19-DNA檢測妊娠期孕婦的血液標本DNA提取，方法均采用全血基因組快速提取法，并嚴格按照試劑盒里的說明書，進行檢測，試劑盒為天為時代公司提供。Tag-DNA聚合酶0.5 μL、10×PCR緩沖液3 μL、dNTP 0.5 μL、氯化鎂1.5 μL等試劑及引物合成均為上海申能博彩生物科技有限公司產(chǎn)品,DNA擴增儀為PE公司產(chǎn)品。采用PCR方法進行檢測B19-DNA，B19引物設(shè)計參照文獻[7]，用2.0%瓊脂糖凝膠對PCR擴增產(chǎn)物進行電泳，于200 bp處出現(xiàn)特異性熒光區(qū)條帶即為B19-PCR陽性，否則為陰性，并同時設(shè)立有陰性和陽性對照。

1.2.3凝血功能檢測儀器為CA700全自動凝血分析儀，質(zhì)控物和試劑為原裝配套，標本在2 h內(nèi)測定出以下結(jié)果：凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)及纖維蛋白原(Fib)，為使PT間有可比性，本研究應(yīng)用國際標準化凝血酶原時間比值INR作為PT的單位。

2　結(jié)　　果

162例妊娠期糖尿病孕婦中，B19-DNA陽性率為39例；而136例健康孕婦標本中，B19-DNA陽性率為8例。兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。妊娠期糖尿病孕婦感染B19的PT、APTT及Fib與單純?nèi)焉锲谔悄虿≡袐D比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。健康孕婦感染B19 PT、APTT及Fib與單純健康妊娠者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。妊娠期糖尿病孕婦PT、APTT及Fib與健康孕婦比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1　　各組B19感染PT、APTT及Fib指標檢測結(jié)果

3　討　　論

B19在人類中感染率高，是普遍存在的一種DNA病毒，它是1975年由Cossart等[8]在篩查獻血者血液中乙型肝炎病毒抗原時首次查出，并把它命名為微小病毒B19。人感染B19以后，大多數(shù)沒有明顯的臨床癥狀，常表現(xiàn)為攜帶狀態(tài)或者為潛伏感染，而當(dāng)免疫功能下降，感染上B19時，可引起明顯的臨床癥狀，導(dǎo)致疾病的發(fā)生、發(fā)展，對身體有著不可估計的危害。如果妊娠期婦女不小心感染上B19，可以引起流產(chǎn)、胎兒畸形，嚴重時可致胎兒水腫癥甚至死亡的發(fā)生。妊娠期婦女母體會隨著孕期的增加發(fā)生一系列凝血和纖溶系統(tǒng)的生理、病理變化，晚期妊娠婦女血液都處于血栓前狀態(tài)，隨著妊娠周期的增加，高凝狀態(tài)明顯加重，極易發(fā)生某些血栓性疾病[9]。糖尿病能夠使血管內(nèi)皮細胞和抗凝血系統(tǒng)損傷，激活血小板和血液凝固系統(tǒng)。凝血功能檢查是目前臨床常用來判斷血栓形成的常用的檢測方法。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠期糖尿病孕婦與B19感染呈正相關(guān)，妊娠期糖尿病孕婦感染B19的PT、APTT、Fib與單純?nèi)焉锲谔悄虿≡袐D比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。本文認為，糖尿病孕婦感染B19，可能會影響其凝血功能。因而，應(yīng)該重視監(jiān)測凝血功能的變化指標，做到早期監(jiān)測妊娠期糖尿病孕婦的凝血功能變化，有效地預(yù)防妊娠期糖尿病患者并發(fā)癥的發(fā)生，避免對孕婦尤其是胎兒健康影響。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2016.25.024

海南省自然科學(xué)基金資助項目(30714)。

王必管(1975-)，主管檢驗技師，主要從事臨床檢驗工作。

E-mail:wangdm70@126.com。

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1671-8348(2016)25-3536-02

2016-03-18

2016-05-29)