張知俠

（咸陽(yáng)師范學(xué)院 化學(xué)與化工學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712000）

蒼術(shù)精油抑菌作用研究

張知俠

（咸陽(yáng)師范學(xué)院 化學(xué)與化工學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712000）

用水蒸汽蒸餾法提取蒼術(shù)精油，采用生長(zhǎng)速率法測(cè)試蒼術(shù)精油對(duì)十種病原菌的抑菌活性，結(jié)果表明，蒼術(shù)精油對(duì)番茄葉霉病菌的抑制率最強(qiáng)，達(dá)到95%；其次是黃瓜炭疽病菌和番茄早疫病菌，抑制率在80%以上，對(duì)棉花立枯病菌、水稻紋枯病菌、番茄灰霉病菌的抑制率達(dá)到了60%；而對(duì)其他病原菌的抑制率相對(duì)較低。

蒼術(shù)；精油；抑菌活性

中藥蒼術(shù)（Atractylodes lancea（Thunb）DC）又名赤術(shù)、山薊，為菊科多年生草本植物，有南蒼術(shù)和北蒼術(shù)之分。主產(chǎn)于遼寧、吉林、山東、江蘇、湖北等省區(qū)?！侗静菥V目》里對(duì)蒼術(shù)藥用描述曰：“治濕痰留飲及脾濕下流，濁瀝帶下，滑瀉腸風(fēng)?！苯陙?lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)蒼術(shù)的醫(yī)用價(jià)值進(jìn)行了大量的研究，取得了顯著成效。蒼術(shù)根狀莖可入藥，以燥濕健脾、祛風(fēng)散寒為主要功效，可治療脘腹脹滿、風(fēng)濕痹病和風(fēng)寒感冒等病癥［1］，蒼術(shù)揮發(fā)油或提取物的藥用價(jià)值主要有解痙、鎮(zhèn)痛、抗菌、抗病毒等作用［2-3］，在抗缺氧，保肝，治療胃潰瘍，調(diào)節(jié)胃腸免疫系統(tǒng)等方面也有一定療效［4］，本文擬對(duì)蒼術(shù)精油的抑菌作用進(jìn)行研究，為蒼術(shù)資源在農(nóng)藥上的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料和方法

1.1材料

本實(shí)驗(yàn)所用蒼術(shù)購(gòu)置于咸陽(yáng)百姓大藥房，經(jīng)陰干后粉碎，過(guò)30目篩后于-18℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

供試菌種：黃瓜炭疽病菌（Colletotrichum lagenarium（Pass.）Ell.et Halst.）；棉花立枯病菌（Pellicularia filamentosa Roger）；水稻紋枯病菌（Rhizoctonia cerealis Vaneler.Hoeren）；番茄早疫病菌（Alternaria solani（Ell.et Mart.）Jones et Grout）；番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers.ex Frs.）；番茄葉霉病菌（Fulvia fulva（Cooke）Cifferri）；小麥赤霉病菌（Fusarium graminearum（Schw.）Petch）；小麥紋枯病菌（Rhizoctonia cerealis Vaneler.Hoeren）；油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum（Lib）deBary）；黃瓜枯萎病菌（Fusariumoxysporum（Schl.）f.sp.cucumerinum Owen）。

以上病原菌均由西北農(nóng)林科技大學(xué)無(wú)公害農(nóng)藥研究服務(wù)中心提供，所有病菌采用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)儀器：全自動(dòng)蒸汽滅菌鍋（D-1型）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（R213型）；智能型生化培養(yǎng)箱（SPX-150B型）。

1.2蒼術(shù)精油提取

稱(chēng)取蒼術(shù)樣品50 g于500 mL蒸餾瓶中，加入300 mL蒸餾水浸泡1 h后，采用水蒸汽蒸餾法蒸餾，連續(xù)蒸餾10 h，共收集餾出液2 000 mL。將此餾出液經(jīng)氯化鈉飽和后用石油醚萃取3次，合并石油醚萃取液，加無(wú)水硫酸鈉干燥，將干燥后的萃取液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，即得蒼術(shù)精油。

1.3精油抑菌活性測(cè)定

采用生長(zhǎng)速率法［5］測(cè)試水蒸汽蒸餾法提取蒼術(shù)精油的抑菌活性，選用黃瓜炭疽病菌、棉花立枯病菌等10種病原菌。首先配制蒼術(shù)精油的丙酮溶液:把蒼術(shù)精油配制成質(zhì)量濃度為1 500μg/mL的母液，然后將該母液進(jìn)行稀釋配成質(zhì)量濃度分別為1 500、1 200、1 000、750、500μg/mL的系列蒼術(shù)精油溶液，在無(wú)菌條件下把配制的不同濃度溶液分別加入到已冷卻至50℃的PDA培養(yǎng)基中。每次取1 mL虎耳草精油溶液加入到9 mL的培養(yǎng)基中，充分混合均勻倒入直徑為90 mm的培養(yǎng)皿，制成帶毒的平板培養(yǎng)基，然后在平面上接種供試的病原菌，每濃度處理重復(fù)3次。在25℃下置于生化培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，72 h后通過(guò)卡尺用十字交叉法測(cè)量供試真菌菌落生長(zhǎng)直徑，取其平均值。根據(jù)式（1）和式（2）計(jì)算菌絲生長(zhǎng)的抑制率。

2　結(jié)果與分析

2.1精油的收率與理化性質(zhì)

用水蒸汽蒸餾法提取的蒼術(shù)精油為淡黃色透明液體，具有濃烈的辛香氣味，其收率為1.13%。

2.2蒼術(shù)精油抑菌活性測(cè)試結(jié)果

采用生長(zhǎng)速率法測(cè)試水蒸汽蒸餾提取的蒼術(shù)精油對(duì)10種病原菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用結(jié)果見(jiàn)表1。其中蒼術(shù)精油丙酮溶液的質(zhì)量濃度x1=3 000 mg/L，x2=2 000 mg/L，x3=1 500 mg/L，x4=1 000 mg/L，x5= 750 mg/L。

表1　蒼術(shù)揮發(fā)油對(duì)不同菌種的抑制率

由表1可見(jiàn)：采用水蒸汽蒸餾提取的蒼術(shù)精油對(duì)供試的10種病原菌都表現(xiàn)出一定的抑菌活性。且精油濃度越大，抑菌作用越強(qiáng)。其中對(duì)番茄葉霉病菌的抑制率最強(qiáng)，達(dá)到95%以上。其次是黃瓜炭疽病菌、番茄早疫病菌，抑制率在80%以上，對(duì)棉花立枯病菌、水稻紋枯病菌、番茄灰霉病菌的抑制率達(dá)到了60%；而對(duì)其他病原菌的抑制率相對(duì)較低。由此證明蒼術(shù)揮發(fā)油中含有高活性抑菌成分，分離這些活性成分，并進(jìn)一步做抑菌實(shí)驗(yàn)，有可能發(fā)現(xiàn)具有新型殺菌活性的先導(dǎo)化合物，值得進(jìn)一步研究。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

［2］YOICHIRON，TOSHITAKAK，KAZUNORIH，et al.Effectof the rhizomes of Atractylodes lanceaand its constituents on the delay of gastric emptying［J］.J Ethnopharmacol，2003，8：51-55.

［3］張秋華，張曉楓，張秋菊.蒼術(shù)的化學(xué)成分與藥理研究進(jìn)展［J］.時(shí)珍國(guó)藥研究，1997，8（6）：505-506.

［4］錢(qián)士輝，汪六英，段金廒，等.茅蒼術(shù)化學(xué)成分及其生物活性研究進(jìn)展［J］.中國(guó)野生植物資源，2006，25（2）：8-11.

［5］吳文君.植物化學(xué)保護(hù)試驗(yàn)技術(shù)導(dǎo)論［M］.西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，1987.

AntimicrobialActivity of Essentia Oil fromAtractylodes Lancea

ZHANG Zhixia
（School of Chemistry&Chemical Engineering，Xianyang Normal University，Xianyang 712000，Shaanxi，China）

Essential oil was extracted from Atractylodes lancea by steam distillation.And antimicrobial activities of essential oil against the growth of ten phytopathogenic fungi were evaluated by using growth rate method.The test of the inhibition rate against the mycelial growth showed that the essential oil could most efficiently inhibited 95%of Fulvia fulva and more than 80%of Colletotrichum lagenarium，Alternaria solani，and more than 60%of Pellicularia filamentosa，Rhizoctonia cerealis，Botrytis cinerea.The inhibition on other fungus were weaker.

Atractylodes lancea；essential oil；antibacterial activities

S482.292

A

1672-2914（2016）04-0064-02

2016-05-12

咸陽(yáng)師范學(xué)院科研基金項(xiàng)目（13XSYK026）。

張知俠（1961—），女，陜西戶(hù)縣人，咸陽(yáng)師范學(xué)院化學(xué)與化工學(xué)院高級(jí)工程師，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物分析及其應(yīng)用。