邱婧然，鄧雪華*，熊輝，謝勇，施艷紅

(1.湖北醫(yī)藥學(xué)院 藥學(xué)院，湖北 十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院 附屬人民醫(yī)院，湖北 十堰 442000)

不同產(chǎn)地梔子中梔子苷含量的比較△

邱婧然1，鄧雪華1*，熊輝2，謝勇1，施艷紅1

(1.湖北醫(yī)藥學(xué)院 藥學(xué)院，湖北 十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院 附屬人民醫(yī)院，湖北 十堰 442000)

目的：比較不同產(chǎn)地梔子中梔子苷的含量，為評價該藥材質(zhì)量提供依據(jù)。方法：采用HPLC測定不同地區(qū)市售梔子樣品中梔子苷的含量。結(jié)果：市售梔子中梔子苷含量均符合《中華人民共和國藥典》質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但不同地區(qū)梔子中梔子苷的含量差異較大。結(jié)論：湖北十堰地區(qū)梔子中梔子苷的含量(8.11%)顯著高于其他省區(qū)，研究為湖北梔子大規(guī)模種植提供了參考。

梔子；引種；梔子苷

梔子為茜草科植物梔子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實，具有瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒等功效，其主要化學(xué)成分是梔子苷[1]。梔子主產(chǎn)于江西、浙江、湖南、四川等地，不僅是我國傳統(tǒng)的大宗常用中藥材，還是衛(wèi)生部頒布的首批藥食兩用資源之一，在食品、飼料及化妝品等行業(yè)中的應(yīng)用也越來越廣泛[2]。近年來湖北各地均有廣泛種植，十堰市房縣依托“華中天然藥庫”資源優(yōu)勢，大力發(fā)展中藥材產(chǎn)業(yè)，從江西吉安引進(jìn)梔子種苗，進(jìn)行大規(guī)模人工種植[3]。為了合理利用資源，筆者比較不同產(chǎn)地梔子中梔子苷的含量變化，為湖北梔子的規(guī)范化種植(GAP)基地建設(shè)提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

LC-20AT高效液相色譜儀(日本SHIMADZU)，SQP型分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)，KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)，F(xiàn)W100型高速萬能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司)，DHG-9145型電熱恒溫干燥箱(常州翔天實驗儀器廠)。

1.2 試劑

梔子苷對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：110749-201316)；甲醇(色譜純)；乙腈(色譜純)。

1.3 樣品

梔子樣品7份，采摘于2014年10月底，發(fā)育時期為第4期，即果實的顏色為1/3青、2/3黃[4]。來源見表1，包括：湖北省十堰市房縣3份、安徽省亳州市1份、江西省九江市湖口縣1份、江西省吉安市永豐縣2份。以上樣品經(jīng)武漢大學(xué)王有為教授鑒定均為梔子GardeniajasminoidesEllis的果實。采回后除去雜質(zhì)，蒸氣殺青后于60 ℃烘箱充分干燥，粉碎過四號篩，樣品粉末密封保存。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

InertSustain C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動相為乙腈-水(15∶85)，檢測波長為238 nm，流速為1.0 mL·min-1，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為10 μL[5]。HPLC圖見圖1。

注：A.梔子苷對照品；B.湖北梔子樣品；1.梔子苷。圖1 梔子及對照品HPLC圖

2.2 對照品溶液的制備

精密稱定梔子苷對照品2.9 mg置于5 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制成每毫升含梔子苷0.58 mg的對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

稱定各樣品粉末1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇250 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理20 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過[1]。精密量取續(xù)濾液10 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾后，即得。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取2.2項下對照品溶液，采用倍稀法配成質(zhì)量濃度為29、58、72.5、145、290、580 μg·mL-1的系列溶液，經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾后分別進(jìn)樣，按上述色譜條件測定峰面積，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，進(jìn)樣量質(zhì)量濃度(μg·mL-1)為橫坐標(biāo)(X)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，梔子苷對照品在29～580 μg·mL-1線性關(guān)系良好?；貧w方程為Y=13 415X-40 677，r=0.999 3。

2.5 精密度試驗

精密吸取2.2項下的對照品溶液10 μL，按2.1項下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果表明梔子苷峰面積的RSD=0.96%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性考察

精密吸取同一供試品(產(chǎn)自湖北省十堰市房縣城關(guān)鎮(zhèn))溶液，分別于制后0、2、4、8、12 h進(jìn)樣10 μL進(jìn)行測定，結(jié)果梔子苷峰面積的RSD=1.39%，說明供試品于24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗

取同一樣品(產(chǎn)自湖北省十堰市房縣城關(guān)鎮(zhèn))，按2.3項下方法平行制備供試品6份，按2.1項下色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果梔子苷峰面積的RSD=1.97%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗

分別取6份樣品(產(chǎn)自湖北省十堰市房縣城關(guān)鎮(zhèn))各0.5 g，精確加入與樣品成分含量相等的梔子苷對照品，按2.3項下供試品處理方法制備供試品溶液，依2.1項下色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果表明梔子苷的回收率為98.12%，RSD=1.95 %(n=6)。

2.9 樣品含量測定

取不同產(chǎn)地的梔子，按2.3方法制備供試品溶液，并按上述色譜條件測定峰面積并計算梔子苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)，結(jié)果見表1。

表1 不同產(chǎn)地梔子中梔子苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)

3 討論

結(jié)果表明，各地梔子中梔子苷的含量都遠(yuǎn)高于2010年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的不少于1.8 %，均可入藥。梔子作為江西省的道地藥材，具有科學(xué)依據(jù)。而湖北省房縣引種的江西梔子，梔子苷含量超過原產(chǎn)地，可能與房縣地區(qū)的土壤、水分、氣候等條件有關(guān)，湖北省房縣適合梔子的規(guī)?；N植，可開展梔子GAP基地建設(shè)。

本文以梔子中梔子苷的含量作為質(zhì)量指標(biāo)，而梔子的化學(xué)成分復(fù)雜，其質(zhì)量的優(yōu)劣是多種成分的綜合表現(xiàn)，呈現(xiàn)出整體效應(yīng)[4，6]。中藥化學(xué)成分整體性的差異，可以用化學(xué)成分指紋圖譜進(jìn)行檢測，后續(xù)工作將致力于梔子指紋圖譜的建立，對梔子質(zhì)量優(yōu)化具有重要意義。

梔子的經(jīng)濟(jì)效益不僅取決于質(zhì)量，還取決于產(chǎn)量。后續(xù)研究將考察各地梔子的產(chǎn)量，為湖北房縣梔子的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供依據(jù)。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：248.

[2] 肖小華，徐麗瑛，王麗華，等.梔子降血糖有效成分及機(jī)制研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2014，25(11)：2614-2616.

[3] 張曉燕，鄧雪華，謝勇，等.以梔子苷的含量確定房縣產(chǎn)梔子的最佳成熟度及藥用部位[J].醫(yī)藥導(dǎo)報，2014，33(12)：1631-1633.

[4] 周妹，湯麗云，王莎，等.不同來源梔子藥材的質(zhì)量比較研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2013，25(12)：1731-1735.

[5] 姜雪強(qiáng)，陳銀華，李志浩.HPLC測定白金丸中吉馬酮的含量[J].湖北醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報，2014，33(6)：582-584.

[6] 劉征輝，魏靜娜，趙琳琳，等.黃芩藥材多指標(biāo)綜合評價的研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2015，17(1)：31-34.

ComparisonofGeniposideContentofGardeniajasminoidesEllisfromDifferentRegions

QIU Jingran1，DENGXuehua1*，XIONGHui2，XIEYong1，ShiYanhong1

(1.SchoolofPharmacy，HubeiUniversityofMedicine，ShiyanHubei442000，China；2.RenminHospital，HubeiUniversityofMedicine，ShiyanHubei442000，China)

Objective：To evaluate the quality ofGardeniajasminoidesEllis from different origins by determination the content of geniposide.Methods：The HPLC method was applied to detect geniposide ofG.jasminoides.Results：G.jasminoidesfrom different regions can meet the quality standard in Chinese Pharmacopoeia(2010)，but the contents of geniposide ofG.jasminoidesfrom different regions are different.Conclusion：The content of geniposide in sample from Hubei was higher than that in samples from others provinces.It provides a scientific basis of cultivatingG.jasminoidesin Hubei province.

GardeniajasminoidesEllis；introduction；geniposide

2015-05-25)

湖北省“2011計劃”(2011JH-2014CXTT05)

*

鄧雪華，副教授，研究方向：中藥學(xué)；E-mail：Dxh91@ 163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.3.013