符韶，梁飛龍，鄧岳文（廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東　湛江　524025）

影響馬氏珠母貝植核育珠績效的關(guān)鍵技術(shù)研究

符韶，梁飛龍，鄧岳文
（廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東湛江524025）

摘要：本研究在海水珍珠養(yǎng)殖核心區(qū)域流沙灣，通過設(shè)置不同術(shù)前處理方法、不同配液進行小片保養(yǎng)和不同模式育珠三個實驗，比較其對馬氏珠母貝植核育珠績效的影響。術(shù)前處理方法分別為抑制性腺、溫度差促排、鹽度差促排和對照組（A1、A2、A3、AD）；小片保養(yǎng)分別為配液1號、配液2號、配液3號、和對照組（B1、B2、B3、BD）；育珠模式分別為海區(qū)休養(yǎng)與育珠、池塘休養(yǎng)與育珠和池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠（C1、C2、C3）。經(jīng)休養(yǎng)、育珠結(jié)束后，比較其育珠績效相關(guān)指標值的差異。實驗結(jié)果顯示：實驗Ⅰ中各術(shù)前處理組間育珠貝的育珠績效值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而各處理組（A1、A2、A3）育珠貝的成活率、留核率、成珠率、優(yōu)良珠率和育珠績效值均顯著高于對照組（AD）（P＜0.05），其中溫度差促排組（A2）具有最高的育珠績效值；實驗Ⅱ中各不同配液保養(yǎng)組間育珠貝的育珠績效值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而通過細胞小片保養(yǎng)各組（B1、B2、B3）的育珠績效值都顯著高于對照組（BD）（P＜0.05）。其中配液1號組（B1）具有最高的育珠績效值；實驗Ⅲ中各不同育珠模式組間育珠貝的成活率和留核率：（C1）與（C2）之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而和（C3）之間存在統(tǒng)計學(xué)意義；育珠貝的成珠率、優(yōu)良珠率和育珠績效值：（C1）與（C3）之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而和（C2）之間存在統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），；其中池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組（C3）具有最高的育珠績效值。

關(guān)鍵詞：馬氏珠母貝；細胞小片；術(shù)前處理；養(yǎng)殖模式；育珠績效

馬氏珠母貝（Pinctada martensii）是我國南部沿海生產(chǎn)海水珍珠的主要珍珠母貝［1］，其所產(chǎn)珍珠占全國海水珍珠的95%以上［2］。中國利用馬氏珠母貝培育的珍珠被世人稱為“南珠”，已有60多年人工養(yǎng)殖的歷史，在發(fā)展高峰期，養(yǎng)殖面積達l萬hm2，最高年產(chǎn)珍珠達30 t［3］，曾是國家出口創(chuàng)匯和南海部分地區(qū)海洋經(jīng)濟發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)［2-4］。但由于前一段時期，養(yǎng)殖規(guī)模無度擴展、養(yǎng)殖環(huán)境不斷惡化以及從業(yè)者生產(chǎn)行為的不規(guī)范，造成珍珠貝病死率高，育珠產(chǎn)量低，珍珠質(zhì)量差；加上自然災(zāi)害頻發(fā)所造成的危害，導(dǎo)致南珠產(chǎn)業(yè)不斷萎縮，產(chǎn)業(yè)效益和市場競爭力日益下滑。針對馬氏珠母貝珍珠產(chǎn)業(yè)存在的問題，相關(guān)科研單位研究人員和從業(yè)者在馬氏珠母貝的優(yōu)良品種選育［5-11］、養(yǎng)殖容量與生產(chǎn)規(guī)律的探索［12-15］和養(yǎng)殖與育珠的生產(chǎn)技術(shù)改進［16-20］等方面都進行了大量深入的研究，為珍珠貝的種質(zhì)改良、區(qū)域養(yǎng)殖容量合理標準的確定、養(yǎng)殖育珠技術(shù)的提高提供了科學(xué)依據(jù)。近年來，相關(guān)業(yè)者還借鑒國內(nèi)外淡水珍珠養(yǎng)殖的成功經(jīng)驗［21-23］，利用池塘培育海水珍珠，對減輕海區(qū)生產(chǎn)負荷、修復(fù)海區(qū)生態(tài)環(huán)境作了初步的嘗試，并總結(jié)了一定的經(jīng)驗［4，24-25］。本文主要針對影響馬氏珠母貝植核育珠績效的幾個關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)，試圖探索提高馬氏珠母貝植核育珠效果的技術(shù)手段、有效方法和最佳模式。筆者通過采用不同的處理方法進行母貝術(shù)前處理、不同的配液進行小片保養(yǎng)和不同的育珠模式進行休養(yǎng)育珠的相關(guān)對比實驗，并取得了不錯效果和可靠的依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗貝來源于流沙灣養(yǎng)殖海區(qū)經(jīng)人工選育的馬氏珠母貝速長系F5，植核貝選1.5～2.5齡，殼高5.5～6.5 cm，貝體健康無病害者；小片貝年齡1.0～1.5齡，殼高5.0～6.0 cm，貝體健康、體表鱗片生長旺盛、放射肋清楚，殼內(nèi)邊緣珍珠層呈銀白色伴虹彩色明顯者。

1.1.2珠核珠核由深海貝類硨磲的貝殼研磨加工而成的正圓形，直徑6.3～7.0 mm。

1.1.3生態(tài)系休養(yǎng)池塘池塘面積約30 hm2，呈長方形，池水深度200～250 cm?？砍蔽徊罴{、排自然海水，并施肥和接人藻種，確保池塘良好的養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境。吊養(yǎng)浮筏由木樁、膠絲繩和塑料浮球組成。

1.2方法

1.2.1術(shù)前處理根據(jù)預(yù)植核貝性腺發(fā)育狀況，分別采用抑制性腺法和促進排放法進行術(shù)前處理。針對性腺發(fā)育尚未成熟但生理機能較強的母貝，加大其吊養(yǎng)密度、控制餌料、水流促使性腺退化；選擇較成熟的母貝，促使性腺發(fā)育成熟后，一是采用陰干與調(diào)節(jié)吊養(yǎng)水層的溫度差刺激誘導(dǎo)性腺排放；二是采用經(jīng)淡水浸泡后再吊進海區(qū)的鹽度差刺激誘導(dǎo)性腺排放。經(jīng)抑制或促排處理的母貝，都要經(jīng)過一周左右的休整期，才可進行植核手術(shù)。

1.2.2植核手術(shù)挑選經(jīng)術(shù)前處理的預(yù)植核貝通過排貝、栓口；細胞小片經(jīng)保養(yǎng)液浸泡5～10 min后，按常規(guī)的植核方法與程序完成植核和貼片手術(shù)。

1.2.3術(shù)后休養(yǎng)植核后的手術(shù)貝，以每籠40只裝籠，根據(jù)實驗需要分別吊養(yǎng)于生態(tài)系池塘或海區(qū)休養(yǎng)。休養(yǎng)期間，定期檢查、清理死貝及吐核，統(tǒng)計病死率和吐核率。休養(yǎng)期1個月左右，休養(yǎng)結(jié)束經(jīng)統(tǒng)計后并籠轉(zhuǎn)入珍珠育成。育珠期間根據(jù)附著生物的附著情況，約每隔3個月左右清理育珠貝一次及更換養(yǎng)殖網(wǎng)籠具。

1.3實驗設(shè)計

分別設(shè)置不同術(shù)前處理方法、不同配液進行小片保養(yǎng)和不同育珠模式三個實驗，比較其對馬氏珠母貝植核育珠績效的影響。實驗Ⅰ術(shù)前處理方法：設(shè)置抑制性腺組（A1）、溫度差促排組（A2）、鹽度差促排組（A3）和生產(chǎn)對照組（AD）四個組合，每組合用貝5 000只，設(shè)三個重復(fù)組；實驗Ⅱ小片保養(yǎng)：設(shè)置配液1號組（B1）、配液2號組（B2）和配液3號組（B3）和生產(chǎn)對照組（BD）四個組合，每組合用貝5 000只，設(shè)三個重復(fù)組；實驗Ⅲ育珠模式：設(shè)置海區(qū)休養(yǎng)與育珠組（C1）、池塘休養(yǎng)與育珠組（C2）和池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組（C3）三個組合，每組合用貝5 000只，設(shè)三個重復(fù)組。

各實驗組均按照常規(guī)技術(shù)進行植核與育珠管理。實驗期間，海區(qū)的海水溫度16.1～31.9℃，海水鹽度21.9～27.6，pH值8.1～8.2。

1.4數(shù)據(jù)處理

實驗過程中，通過統(tǒng)計各組合的成活率、留核率、成珠率、收珠率和優(yōu)良珠率等性能指標，并計算出育珠績效值。育珠貝成活率=開珠貝數(shù)/植核貝數(shù)，育珠貝留核率=留核數(shù)/開珠貝數(shù)，育珠貝成珠率=收商品珠數(shù)/留核數(shù)，優(yōu)良珠率=優(yōu)良珠數(shù)/商品珠數(shù)（優(yōu)良珍珠評價標準：形狀圓形、表面光潔無瑕疵、色澤瑩潤、珠層厚度300 μm以上），育珠績效值為各項指標值相乘之積。育珠期結(jié)束后，利用單因素方差（ANOVA）分析比較實驗內(nèi)各組合的成活率、收珠率、優(yōu)珠率和育珠績效值差異。若差異顯著，再采用LSD進行各組合間均值比較，顯著性水平設(shè)為P ＜0.05。

2　結(jié)果與分析

2.1不同術(shù)前處理方法對馬氏珠母貝育珠績效的影響

實驗結(jié)果表明，各處理組間育珠貝的成活率、留核率、成珠率、優(yōu)良珠率和育珠績效值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；各處理組（A1、A2、A3）育珠貝的成活率、留核率、成珠率、優(yōu)良珠率和育珠績效值均顯著高于對照組（AD）（P＜0.05），其中溫度差促排組（A2）具有最高的育珠績效值。

2.2不同配液進行小片保養(yǎng)對馬氏珠母貝育珠績效的影響

實驗數(shù)據(jù)顯示，各不同配液保養(yǎng)組間的育珠貝成活率、留核率、成珠率和優(yōu)珠率分別存在具有統(tǒng)計學(xué)意義差異（P＜0.05）和差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05），最終的育珠績效值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而通過細胞小片保養(yǎng)各組的育珠績效值都顯著高于對照組（P＜0.05）。其中配液1號組（B1）具有最高的育珠績效值。

2.3不同育珠模式對馬氏珠母貝育珠績效的影響

從表3可見：各不同育珠模式組間育珠貝的成活率和留核率：（C1）與（C2）之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而和（C3）之間存在統(tǒng)計學(xué)意義差異；育珠貝的成珠率、優(yōu)良珠率和育珠績效值：（C1）與（C3）之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而和（C2）之間存在統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組（C3）具有最高的育珠績效值。

表1　馬氏珠母貝不同術(shù)前處理方法的育珠績效比較

表2　馬氏珠母貝不同配液進行小片保養(yǎng)的育珠績效比較

表3　不同育珠模式的育珠績效比較

3　討論

3.1術(shù)前處理對馬氏珠母貝育珠績效的影響

術(shù)前處理是人工培育珍珠的關(guān)鍵技術(shù)之一，其目的是通過人為方法將植核母貝的生理機能調(diào)整到適應(yīng)植核手術(shù)的最佳狀態(tài)，以達到提高植核育珠貝的成活率、留核率和優(yōu)珠率，最終提高育珠績效。有文獻報道了術(shù)前處理方法對提高大珠母貝（P. maxima）［26］、珠母貝（P.margaritifera）［27-28］、馬氏珠母貝（P.martensii）［29］和企鵝珍珠貝（Pteria penguin）［30］育珠效果影響。例如符韶、鄧陳茂等［28］在珠母貝的植核育珠中，通過對母貝的陰干和溫差促排處理，使育珠貝成活率提高了12.3%，留核率和收珠率分別提高了35.7%和62.1%。本研究的實驗結(jié)果表明：經(jīng)過術(shù)前處理各試驗組的平均成活率、留核率、成珠率、優(yōu)珠率和育珠績效值比未處理組分別提高12.1%、11.8%、10.6%、17.9%和64.1%。這說明了術(shù)前處理具有顯著提高馬氏珠母貝植核育珠績效的作用。根據(jù)筆者生產(chǎn)實踐經(jīng)驗分析，其原因主要是：植核貝未經(jīng)術(shù)前處理，其生理機能旺盛，當(dāng)受到手術(shù)的突然刺激時，神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生異常的應(yīng)激反應(yīng)，使其身體對植入的珠核和異體組織（細胞小片）的排斥與抗拮作用較強烈，容易造成吐核，且小片移植后形成珍珠囊的過渡時間較長，容易形成菱柱珠或膿包珠，降低成珠率。此外，未經(jīng)術(shù)前處理的植核貝，部分性腺較豐滿，不但對植核手術(shù)有妨礙，而且植核后容易形成污珠、尾巴珠和異形珠，影響珍珠質(zhì)量；另一方面，由于對手術(shù)的應(yīng)激反應(yīng)過量，破壞了手術(shù)貝自身生理活動的平衡協(xié)調(diào)，也易造成手術(shù)貝的過度衰弱、甚至死亡［31］。本研究根據(jù)馬氏珠母貝預(yù)術(shù)貝的生理狀態(tài)，分別采用相應(yīng)的術(shù)前處理方法，將其生理機能調(diào)整到植核的最佳狀態(tài)，降低其對手術(shù)的過激反應(yīng)和排斥、抗拮作用，維持自身生命活動的平衡與協(xié)調(diào)，術(shù)后恢復(fù)快，從而提高植核育珠貝的成活率、留核率和珍珠質(zhì)量。

3.2小片保養(yǎng)對馬氏珠母貝育珠績效的影響

育珠細胞小片的處理技術(shù)主要圍繞提高小片細胞的活力，促進細胞的分泌，增強小片與組織、珠核的親和力，防止感染，促進傷口愈合，降低手術(shù)貝死亡等目的進行。相關(guān)的研究包括對處理液藥物種類篩選、配方比較、小片處理方法及程序等方面［32］。從實驗的結(jié)果看，各個實驗小組的成活率和留核率均高于對照組的，說明處理液起到了增強組織親和力、提高留核率和抗感染降低病死率的預(yù)期作用；各處理組的平均成活率為67.1%、64.9%和66.7%，均高于對照組的57.4%；平均留核率為76.2%、76.4%和73.9%，均高于對照組的68.3%。這與李詠梅等［3 3］用不同處理液在海南陵水進行育珠的效果實驗的數(shù)字所反映的兩大處理組的平均吐核率（12.70%、14.65%）和平均病死率（7.90%、8.60%）均遠低于對照組20.80%的吐核率和13.80%的病死率有近似的結(jié)果。在育珠貝的成珠率、優(yōu)良珠率方面，各實驗組與對照組之間相比，分別存在差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）和差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），從育珠效果綜合評價的育珠績效值看，各實驗組之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而各實驗組與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）?？梢娡ㄟ^細胞小片的保養(yǎng)處理，對提高小片細胞的活力，促進細胞的分泌，加速珍珠層的形成具有顯著的效果。

3.3育珠模式對馬氏珠母貝育珠績效的影響

優(yōu)化休養(yǎng)與育珠模式是提高馬氏珠母貝育珠績效的一個關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)，通過實驗得知，休養(yǎng)與育珠模式對育珠貝成活率存在顯著性影響（P＜0.05）。根據(jù)實驗統(tǒng)計，休養(yǎng)期池塘休養(yǎng)成活率95.5%高于海區(qū)休養(yǎng)成活率的88.2%，但育珠期海區(qū)育珠成活率71.9%又高于池塘育珠成活率的62.6%，最終育珠貝成活率是海區(qū)休養(yǎng)與育珠組（C1）為63.41%略高于池塘休養(yǎng)與育珠組（C2）的59.8%，兩組組合為池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組（C3）的育珠貝成活率為68.7%，這一組合模式大大提高了育珠貝的成活率。休養(yǎng)與育珠模式的育珠績效值存在統(tǒng)計學(xué)意義差異（P＜0.05），其中池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠績效值0.196顯著高于海區(qū)休養(yǎng)與育珠的0.164及池塘休養(yǎng)與育珠的0.121。其原因在于：休養(yǎng)期自然海區(qū)的相關(guān)理化因子和生態(tài)環(huán)境不穩(wěn)定，容易造成手術(shù)貝的感染、死亡和吐核；而生態(tài)系育珠池塘的生態(tài)環(huán)境相對穩(wěn)定，有利于手術(shù)貝的漸進式恢復(fù)和生長，故可使手術(shù)貝獲得較高的成活率和留核率。在育珠期間，由于池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組在植核手術(shù)后，先在生態(tài)系育珠池塘中進行休養(yǎng)獲得較高的成活率和留核率的前提下，再移往養(yǎng)殖海區(qū)進行育珠管理，這樣既可避免海區(qū)休養(yǎng)期的高病死率、高吐核率，又可避免育珠期在生態(tài)系育珠池塘中受夏季高溫威脅和餌料生物不足的不利影響，整個休養(yǎng)育珠過程，既保證了前期的環(huán)境穩(wěn)定，有利于育珠貝的成活與留核，又保證了后期的營養(yǎng)供應(yīng)，有利于珍珠質(zhì)的快速分泌，從而取得較高的成活率、留核率和成珠率。因此池塘休養(yǎng)與海區(qū)育珠組（C3）可比海區(qū)休養(yǎng)與育珠組（C1）和池塘休養(yǎng)與育珠組（C2）獲得更高的育珠績效值。這一結(jié)果與符韶等［4］與賈友宏等［19］實驗結(jié)果相符。

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資助項目：廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專項項目（Z2014008；Z2015005）

中圖分類號：S968.35

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2091（2016）07-0045-06

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.07.009

收稿日期：（2015-12-22）

作者簡介：符韶（1955-），男，教授級高工，研究方向為珍珠及名貴海產(chǎn)貝類養(yǎng)殖.E-mail：fushao2188@163.com

Studies on the techniques to affect pearl production performances in pearl oyster Pinctada martensii

Fu Shao，Liang Feilong，Deng Yuewen
（Pearl Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025，China）

Abstract:Three experiments（Exp I，Exp II and Exp III）were conducted to investigate the effects of condition before nucleus-inserting operation，mantle tissue piece solution and culture method on pearl production performance in pearl oyster Pinctada martensii.In Exp I，four groups（A1，A2，A3and AD）were set.The A1，A2and A3were conditioned by inhibiting gonad development，gamete release by water temperature change and gamete release by water salinity change，respectively.The AD group was not conditioned.In Exp II，four groups（B1，B2，B3and BD）were set.The mantle tissue piece in the B1，B2and B3groups were treated by Solution 1，2 and 3，which contained chemical compositions.The mantle tissue pieces in the BD group was not treated.In Exp III，three groups（C1，C2and C3）were set.The oysters in C1，C2and C3groups were farmed by the protocols of recuperation and culture in the sea，recuperation in the ponds and culture in the sea，and recuperation and culture in the ponds.Pearl production performance was evaluated among the groups in Exp I，Exp II and Exp III.The results showed that there were significant differences in pearl performance values among the four groups in Exp I. Survival rates，retention rates，commercial rates，perfect pearl rates and pearl performance values of the A1，A2and A3groups were significantly larger than those in the AD group（P＜0.05）.The A2group had the largest pearl performance values in Exp I.The pearl performance values of B1，B2and B3were significantly larger than that of the BD group（P＜0.05）.The B1group had the largest pearl performance value in Exp II.The survival rates and retention rates of the C1and C2were significantly larger than those of the C3group in Exp III（P＜0.05）.The commercial pearl rates，perfect rates and pearl performance values of the C1and C3groups significantly larger than those of the C2group.The C3group had the largest pearl performance value in the Exp III.

Keywords:Pinctada martensii；mantle tissue piece；condition；culture method；pearl performance value