徐 巖

(天津市兒童醫(yī)院，天津 300050)

頂空氣相色譜法測(cè)定地奈德中有機(jī)溶劑殘留量

徐 巖

(天津市兒童醫(yī)院，天津 300050)

目的：建立頂空氣相色譜法測(cè)定地奈德中有機(jī)溶劑殘留量。方法：采用Agilent DB-WAX毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.50 μm)；氮?dú)鉃檩d氣，流速為1.5 ml/min；分流比為5∶1；進(jìn)樣口溫度為200 ℃；FID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為250 ℃；程序升溫：初始溫度40 ℃，保持10 min，然后以20 ℃/min升溫至200 ℃，保持5 min。頂空進(jìn)樣，平衡溫度為80 ℃，平衡時(shí)間為25 min；以二甲基亞砜為溶劑，外標(biāo)法測(cè)定地奈德中甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的殘留量。結(jié)果：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷均能得到良好的分離，空白溶劑無(wú)干擾，檢測(cè)濃度在所考查的范圍內(nèi)與峰面積具有良好的線性關(guān)系(r=0.999 2～0.999 9)；平均回收率為98.4%～100.6%，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿檢測(cè)限分別為0.30、0.50、0.15、0.15、0.05和0.60 μg/ml。結(jié)論：本試驗(yàn)建立的色譜方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，適合地奈德原料中有機(jī)溶劑殘留量的檢測(cè)。

地奈德，殘留溶劑，頂空氣相色譜法

藥品中的殘留溶劑是指原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過(guò)程中使用的，但在工藝過(guò)程中未能完全去除的有機(jī)溶劑[1〗，服用后對(duì)人體有毒性和致癌作用。地奈德(desonide)是一種糖皮質(zhì)激素，通過(guò)SFDA網(wǎng)上查詢，本品只有重慶H公司1家企業(yè)生產(chǎn)，在現(xiàn)行各國(guó)藥典中均未收載。目前，現(xiàn)行國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)為WS1-(X-145)-2012Z，僅對(duì)丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷4種溶劑的殘留量進(jìn)行了控制。該原料的制備工藝中還使用了甲醇和乙醇2種溶劑，尤其乙醇用于地奈德粗品提純，有必要對(duì)其進(jìn)行控制。本文根據(jù)國(guó)家藥典委員會(huì)2014年國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高工作的要求，并參考相關(guān)資料，對(duì)地奈德質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中殘留溶劑項(xiàng)進(jìn)行修訂，建立了頂空氣相色譜法同時(shí)測(cè)定地奈德中甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷6種有機(jī)溶劑殘留量，方法快速、靈敏，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

1 儀器與試藥

Agilent 7890A氣相色譜儀，Agilent G1888全自動(dòng)頂空進(jìn)樣系統(tǒng)，Chemistation工作站，地奈德原料(重慶H公司，批號(hào)DES-20131001，DES-20130701，DES-20130601R)，二甲基亞砜，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷均為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對(duì)照品溶液 分別精密稱取甲醇0.75 g、乙醇1.25 g、丙酮0.75 g、乙醚0.25 g、乙酸乙酯0.75 g和二氯甲烷0.015 g置裝有適量二甲基亞砜的50 ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品貯備液1 ml置裝有適量二甲基亞砜的50 ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋到刻度，搖勻，即得。

2.1.2 供試品溶液 精密稱取本品0.5 g，置20 ml頂空瓶中，加入二甲基亞砜5 ml，密封，即得。

2.2 色譜條件及系統(tǒng)適用性 色譜柱：Agilent J&W DB-WAX毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.50 μm)；載氣為氮?dú)?，流速?.5 ml/min；程序升溫：柱溫40 ℃，保持10 min，以20 ℃/min速度升溫至200 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度：200 ℃；FID檢測(cè)器溫度：250 ℃；分流比5∶1。頂空進(jìn)樣，平衡溫度為80 ℃，平衡時(shí)間為25 min；進(jìn)樣量1 ml。在上述色譜條件下，對(duì)照品溶液、供試品溶液及空白溶劑色譜圖見(jiàn)圖1。結(jié)果空白溶劑二甲基亞砜不干擾殘留溶劑的測(cè)定，各溶劑峰的分離度均符合要求。

1.乙醚 2.丙酮 3.乙酸乙酯 4.甲醇 5.乙醇 6.三氯甲烷 7.二甲基亞砜

2.3 線性關(guān)系考查 分別精密量取對(duì)照品貯備液用二甲基亞砜逐步稀釋，獲得一系列濃度的對(duì)照溶液，精密量取5 ml置20 ml頂空瓶，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，以對(duì)照品溶液濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷回歸方程及線性范圍見(jiàn)表1。

表1 回歸方程及線性范圍

2.4 檢測(cè)限及定量限的測(cè)定 將對(duì)照品溶液用二甲基亞砜逐步稀釋，進(jìn)行測(cè)定，以基線噪音的3倍計(jì)算，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的檢測(cè)限分別為0.3、0.5、0.15、0.15、0.05和0.6 μg/ml；以基線噪音的10倍計(jì)算，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的定量限分別為0.6、1.0、0.3、0.3、0.1和2.4 μg/ml。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密量取“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液5 ml共6份，分別置20 ml頂空瓶中，密封，依法測(cè)定，計(jì)算甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷峰面積的RSD分別為3.2%、2.8%、1.7%、1.7%、3.8%和4.9%，精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取地奈德樣品(批號(hào)DES-20131001)0.5 g共6份，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依法測(cè)定；同法測(cè)定“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，按外標(biāo)法計(jì)算殘留溶劑量。結(jié)果樣品中含甲醇為0.002%，RSD為1.4%；乙醇為0.08%，RSD為0.86%；丙酮為0.000 3%，RSD為2.1%；乙醚為0.000 05%，RSD為1.7%；乙酸乙酯與二氯甲烷均未檢出。

2.7 加樣回收率試驗(yàn) 分別精密稱定樣品(批號(hào)DES-20130601R，已知?dú)埩羧軇┖?0.5 g，共9份，分別置頂空瓶中，分別精密加入對(duì)應(yīng)濃度的對(duì)照溶液5 ml各3份，搖勻，制成相當(dāng)于檢查限度60%、80%和100%的低、中、高濃度的供試品溶液。分別測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率(n=9)，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.8 樣品測(cè)定結(jié)果 按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備3批樣品的供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，同法測(cè)定對(duì)照品溶液，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算各樣品中有機(jī)溶劑殘留量，結(jié)果見(jiàn)表3。甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷的限度分別為0.3%、0.5%、0.3%、0.3%、0.1%和0.006%。3批樣品均符合規(guī)定。

表2 地奈德殘留溶劑回收率結(jié)果

表3 地奈德殘留溶劑測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 試驗(yàn)考查了不同廠牌的色譜純或分析純的二甲基亞砜，對(duì)地奈德的有機(jī)溶劑殘留量的測(cè)定均無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

1.二甲基亞砜

3.2 地奈德質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)溶劑殘留檢查增加甲醇和乙醇均有必要性，尤其乙醇用于地奈德原料粗品的提純，最終很難被完全去除，樣品的測(cè)定結(jié)果也較高。

3.3 試驗(yàn)考查了100%二甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷等不同填料的毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分析，只有交聯(lián)聚乙二醇柱分離效果最佳，6種溶劑均能達(dá)到基線分離。

1 中國(guó)藥典[S].二部.2010:附錄61

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Determination of residual solvents in desonide by headspace GC

Xu Yan

(Tianjin Children＇s Hospital, Tianjin 300074)

Objective：To establish a method of headspace capillary gas chromatography for the determination of residual solvents in desonide. Methods：The residual solvents in desonide were separated by Agilent DB-WAX capillary (30 m×0.25 mm，0.50 μm) column with an FID detector. Nitrogen was used as carried gas and the flow rate of the gas was 1.5 ml/min. The injector temperature and the detector temperature were controlled at 200 ℃ and 250 ℃,respectively. The programmed column temperature was maintained at 40 ℃ for 10 min and then raised to 200 ℃ at the rate of 20 ℃/min followed by holding for 5 min. Dimethyl sulfoxide (DMSO) was used as solvent. The containers of headspace injector were balanced at 80 ℃ for 25 min. Results：The detected solvents were separated completely. The calibration curve of each solvent showed a good linear relationship (r=0.999 2～0.999 9) with good precision and accuracy. The average recovery was in the range of 98.4%～100.6%. The LOD of methanol, ethanol, acetone, ethyl acetate，diethyl ether and trichloromethane was 0.30、0.50、0.15、0.15、0.05和0.60 μg/ml, respectively.Conclusion：The established method is both simple and accurate，and can be used for the determination of residual solvents in desonide.

desonide，residual solvents，headspace gas chromatography

2015-11-02

R917

A

1006-5687(2016)01-0012-03