楊艷芹，周國俊，儲(chǔ)國海，袁凱龍，蔣　健，段太成，潘遠(yuǎn)江

(1.浙江中煙工業(yè)有限責(zé)任公司技術(shù)中心，浙江　杭州　310024;2.浙江大學(xué)　化學(xué)系，浙江　杭州　310027;

3.中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所，吉林　長春　130022)

HS-SPME/GC-MS結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)分析不同產(chǎn)地路路通中的揮發(fā)性成分

楊艷芹1，2，周國俊1*，儲(chǔ)國海1，袁凱龍1，蔣健1，段太成3*，潘遠(yuǎn)江2

(1.浙江中煙工業(yè)有限責(zé)任公司技術(shù)中心，浙江杭州310024;2.浙江大學(xué)化學(xué)系，浙江杭州310027;

3.中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所，吉林長春130022)

摘要：采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)(HS-SPME/GC-MS)分析了不同產(chǎn)地路路通中的揮發(fā)性成分，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化了影響頂空固相微萃取技術(shù)的各項(xiàng)因素，以主成分分析、聚類分析兩種化學(xué)計(jì)量學(xué)方法分析評(píng)價(jià)了8個(gè)產(chǎn)地路路通的揮發(fā)性成分。優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果為1 g樣品量在80 ℃下提取40 min，解析1 min。8個(gè)產(chǎn)地的路路通共鑒定出48種揮發(fā)性組分，不同產(chǎn)地的化學(xué)成分大致相同，含量差異較大。兩種統(tǒng)計(jì)分析方法均表明，湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分比較相似，貴州、廣西、安徽、河北4個(gè)產(chǎn)地的路路通比較接近。主成分分析結(jié)果表明，氧化石竹烯、δ-杜松烯、橙花叔醇可作為區(qū)分兩大類路路通的代表性化合物。HS-SPME/GC-MS結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法可以有效地對(duì)不同產(chǎn)地的路路通進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，從而為中藥路路通的藥物開發(fā)和科學(xué)栽培管理提供重要參考。

關(guān)鍵詞：頂空固相微萃取/氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù);揮發(fā)性成分;路路通;不同產(chǎn)地;化學(xué)計(jì)量學(xué)

路路通(LiquidambarformosanaHance)屬于金縷梅科,是一種落葉和觀賞性樹木,廣泛分布在中國、老撾、朝鮮和越南[1]。在傳統(tǒng)中藥領(lǐng)域，路路通不僅可以加快血液循環(huán)，減輕淤血，加速傷口愈合，還具有止痛、利尿、抗痙攣、抗炎和治療腹瀉、消化不良等多種功效[2-3]。它含有多種化學(xué)成分，如羽扇烷萜、奧利烷萜、甾體、類黃酮和酚類化合物。路路通提取物中的類黃酮和酚類化合物具有抗氧化作用[3]，奧利烷萜類是一種重要的核轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子[4]。目前，只有對(duì)路路通葉子揮發(fā)性成分的研究報(bào)道，而對(duì)其干燥果實(shí)揮發(fā)性成分的研究尚無相關(guān)報(bào)道[5]。

傳統(tǒng)的揮發(fā)性成分提取技術(shù)有水蒸氣蒸餾、索氏提取、超聲提取等，這些方法不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力，提取效率低，引入有機(jī)溶劑殘留，而且高溫加熱會(huì)導(dǎo)致熱不穩(wěn)定化合物的裂解和水合反應(yīng)。頂空固相微萃取技術(shù)(HS-SPME)集樣品采集、萃取、濃縮、進(jìn)樣和分析于一體，不僅選擇性好、提取效率高，而且無需溶劑，是一種環(huán)境友好的方法[6]，目前已應(yīng)用于中草藥[7-8]、食品[9-11]、香精香料[12]和水果[13-14]中揮發(fā)性成分的分析。

本文采用頂空固相微萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜對(duì)路路通干燥果實(shí)的揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，并采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對(duì)不同產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而為路路通的藥物開發(fā)和應(yīng)用提供重要參考。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

島津氣相色譜-質(zhì)譜儀(Shimadzu GCMS-QP2010);密封帽、頂空瓶(安捷倫公司);電子恒溫水浴鍋(上海亞榮生化儀器廠);中藥材粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司);電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);正構(gòu)烷烴C8～C30(Supelco，USA);頂空固相微萃取手柄、100 μm聚二甲基硅氧烷萃取頭(PDMS)、65 μm 聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯(PDMS/DVB)、75 μm Carboxen/聚二甲基硅氧烷(CAR/PDMS)(Supelco，USA)。

湖南路路通果實(shí)(長春同仁堂大藥房);江蘇路路通果實(shí)(長春璽康大藥房);四川路路通果實(shí)(長春義善堂大藥房);遼寧路路通果實(shí)(長春百全中草藥店);安徽路路通果實(shí)(長春市傳承中藥材);貴州路路通果實(shí)(長春濟(jì)世參茸中草藥店);廣西路路通果實(shí)(長春人民藥業(yè)集團(tuán)中藥科技有限公司);河北路路通果實(shí)(長春醫(yī)藥集團(tuán)中草藥房)。路路通經(jīng)吉林大學(xué)植物科學(xué)學(xué)院李想教授鑒定為金縷梅科路路通的干燥果實(shí)。

1.2頂空固相微萃取

頂空固相微萃取頭首次使用時(shí)按照用戶手冊(cè)插入氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)樣口進(jìn)行預(yù)處理，PDMS和PDMS/DVB萃取頭于250 ℃下解析0.5 h，CAR/PDMS萃取頭于300 ℃下解析1 h。每次使用前，萃取頭在氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)樣口于250 ℃下解析5 min以除去滯留殘留物。

將稱量的樣品粉末快速放入20 mL頂空瓶中，用密封帽密封。將針頭刺穿隔墊插入頂空瓶中，推出萃取頭暴露于樣品上空，然后放入水浴鍋中在設(shè)定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行提取。達(dá)到平衡后將萃取頭拔掉，插入氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)樣口進(jìn)行熱解析。對(duì)不同類型的萃取頭(PDMS，PDMS/DVB，CAR/PDMS)、樣品量(0.5，1.0，1.5 g)、提取溫度(40，60，80 ℃)、提取時(shí)間(20，40，60 min)、解析時(shí)間(1，3，5 min)等影響因素進(jìn)行優(yōu)化。

1.3色譜-質(zhì)譜分析條件

色譜條件：DB-5石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm)。程序升溫：60 ℃以4 ℃/min升至250 ℃，然后保留12.5 min;高純氦氣作為載氣，流速為0.9 mL/min，分流比為1∶20。

質(zhì)譜條件：質(zhì)量掃描范圍40～500 amu，掃描速率0.2 s/scan，離子源和接口溫度分別為230 ℃和280 ℃。

1.4GC-MS定性及定量分析

1.5數(shù)據(jù)處理及化學(xué)計(jì)量學(xué)程序

4因素3水平的正交試驗(yàn)L9(34)和方差分析采用正交試驗(yàn)助手Ⅱ軟件計(jì)算完成。主成分分析、聚類分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件完成。

2結(jié)果與討論

2.1頂空固相微萃取條件優(yōu)化

2.1.1萃取頭的選擇頂空固相微萃取技術(shù)的關(guān)鍵部位在于萃取頭。萃取頭是涂布了不同色譜固定相或吸附劑的熔融石英纖維或金屬合金，有單層和多層的萃取頭。不同類型的萃取頭具有不同的吸附性能和保留能力。實(shí)驗(yàn)采用PDMS/DVB、CAR/PDMS和PDMS 3種不同類型的萃取頭測(cè)定路路通的揮發(fā)性成分。結(jié)果顯示，PDMS/DVB萃取頭得到的總峰面積最大，PDMS和CAR/PDMS分別為PDMS/DVB萃取頭總峰面積的53.5%和90.6%，說明PDMS/DVB萃取頭對(duì)于路路通中的揮發(fā)性成分有很好的吸附性和保留性，因此實(shí)驗(yàn)選用PDMS/DVB萃取頭。

表1　正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)因子水平表

2.1.2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)頂空固相微萃取技術(shù)受多種因素影響，如樣品量、提取時(shí)間、提取溫度、解析時(shí)間等，因此采用L9(34)的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)(見表1)來優(yōu)化各影響因素，實(shí)驗(yàn)具體安排及結(jié)果見表2。根據(jù)表2結(jié)果得到最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件，即1.0 g樣品量，提取溫度為80 ℃，提取時(shí)間為40 min，解析時(shí)間為1 min。

表2　正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

通過表3的方差分析，判定頂空固相微萃取技術(shù)各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響程度順序?yàn)樘崛囟?提取時(shí)間>解析時(shí)間>樣品量。因此，為了避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果的波動(dòng)，實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制提取溫度和提取時(shí)間。

表3　方差分析結(jié)果

F0.01(2,2)=99.00，F(xiàn)0.05(2,2)=19.00

2.2不同產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分對(duì)比分析

在最優(yōu)萃取條件下(即1.0 g的樣品量采用PDMS/DVB萃取頭在80 ℃條件下提取40 min，解析1 min)，測(cè)定了湖南、江蘇、四川、遼寧、河北、安徽、廣西和貴州8個(gè)產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性組分，其總離子流圖如圖1所示，可以看出不同產(chǎn)地路路通的峰形和個(gè)數(shù)存在差異。

通過標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索(NIST05,相似度大于80%)及保留指數(shù)(正構(gòu)烷烴C8～C30的混合物進(jìn)行計(jì)算得到)和參考文獻(xiàn)來輔助質(zhì)譜檢索定性,對(duì)總離子流圖中各色譜峰進(jìn)行了歸屬和指認(rèn)，結(jié)果見表4。湖南、江蘇、四川、遼寧、河北、安徽、廣西和貴州產(chǎn)地的路路通分別鑒定出35，32，32，37，38，32，33和30種揮發(fā)性成分?？倲?shù)為48種，其中19種揮發(fā)性成分為8個(gè)產(chǎn)地的共同組分，分別為α-蒎烯、莰烯、萜品油烯、對(duì)傘花烴、檸檬烯、6-崁烯醇、香芹蒎酮、α-松油醇、桃金娘醛、優(yōu)葛縷酮、α-蓽澄茄油烯、β-欖香烯、α-金合歡烯、α-芹子烯、γ-衣蘭油烯、大根香葉烯、氧化石竹烯、δ-杜松烯和環(huán)氧化紅沒藥烯。

No.Retentiontime/minCompoundKI*MolecularweightContent(%)HunanJiangsuSichuanLiaoningHebeiAnhuiGuangxiGuizhou15.25α-Pinene(α-蒎烯)9051363.14.257.198.357.07114.624.2625.68Camphene(莰烯)9221361.141.641.232.330.712.211.762.1935.784-Methylenebicyclo[3.2.1]oct-2-ene(萜品油烯)925120-----1.751.391.73

(續(xù)表4)

No.Retentiontime/minCompoundKI*MolecularweightContent(%)HunanJiangsuSichuanLiaoningHebeiAnhuiGuangxiGuizhou46.53β-Pinene(β-蒎烯)9541360.751.012.041.433.265.7812.256.3156.97(3E,5E)-2,6-Dimethyl-1,3,5,7-octatetraene((3E,5E)-2,6-二甲基-1,3,5,7-辛四烯)9711340.180.160.260.40.12--0.1767.71Isocineole(1,4-桉葉素)10001540.981.23-0.590.05---77.77Terpinolene(異松油烯)10021361.3121.390.940.26---88.02Dolcymene(對(duì)傘花烴)10101344.614.423.663.711.621.032.11.6698.18Limonene(檸檬烯)101413610.960.762.070.350.720.981.27108.26Eucalyptol(桉油精)10171541.41.490.480.860.17---119.204-Methyl-3-(1-methyleth-ylidene)-1-cyclohexene(4-甲基-3-(1-甲基亞乙基)-1-環(huán)己烯)10461361.742.291.361.150.34---129.65(3Z)-3-Decen-1-yne((3Z)-3-癸烯)10611360.91.150.561.160.08--0.061310.261-Methyl-4-isopropenyl-benzene(1-甲基-4-異丙烯基苯)10791323.525.143.256.451.090.63--1411.152-Fenchanol(小茴香醇)11071540.5-0.270.47----1511.586-Camphenol(6-崁烯醇)11191520.550.471.050.441.441.441.832.821611.871-Terpinenol(1-松油醇)11281540.751.230.270.650.1---1712.08Isopinocarveol(異松香芹醇)11341520.7-1.3111.723.092.984.321812.16Berbenol(冰片)1136152----1.132.062.235.081912.92Pinocarvone(香芹蒎酮)11581502.482.142.112.052.313.983.74.842013.464-Terpineol(4-萜品醇)117315410.890.620.590.51---2113.67p-Cymen-8-ol(對(duì)傘花烴-8-醇)1179150----0.97-0.550.762213.93α-Terpieol(α-松油醇)11871542.183.161.944.540.980.210.410.532314.15Myrtenal(桃金娘醛)11931503.853.572.894.242.784.183.989.32414.61Eucarvone(優(yōu)葛縷酮)12061507.287.867.116.276.226.74.315.742517.31Bornylacetate(乙酸龍腦酯)1284196-----1.420.62-2619.78Aromadendrene(香橙烯)13562040.460.40.30.310.310.470.33-2720.58α-Cubebene(α-蓽澄茄油烯)13802040.90.910.910.891.091.041.331.152820.60Copaene(古巴烯)1381204----71.710.62-2920.67α-Bourbonene(α-波旁烯)13822040.970.66--0.530.730.570.543021.10β-Elemene(β-欖香烯)13952042.0522.264.473.422.556.759.083122.09α-Farnesene(α-金合歡烯)14252042.22.913.291.922.741.583.942.813223.45α-Selinene(α-芹子烯)14672040.550.921.240.61.861.61.621.483323.91γ-Muurolene(γ-衣蘭油烯)14812041.531.81.391.422.231.471.211.253424.03α-Muurolene(α-衣蘭油烯)14852041.57--1.440.94---3524.28γ-Elemene(γ-欖香烯)1493204---2.2713--0.743624.67GermacreneD(大根香葉烯)150520410.056.1410.864.571.642.452.742.573725.18Caryophylleneoxide(氧化石竹烯)152120612.6315.399.4210.073.620.191.680.283825.44δ-Cadinene(δ-杜松烯)153020416.0816.519.9110.872.562.690.181.253925.58Calamenene(去氫白菖烯)1535202-----6.595.244.844026.05α-Calacorene(α-甜旗烯)15492006.384.726.94.572.890.670.630.884126.19Elemol(欖香醇)1554222---3.14-2.9--4226.37trans-Z-α-Bisaboleneep-oxide(環(huán)氧化紅沒藥烯)15602202.891.272.862.562.021.421.711.994326.55Peruviol(橙花油醇)1566222------1.19-4427.15(-)-Spathulenol(桉油烯醇)1585220-----1.096.344.054527.38Nerolidol(橙花叔醇)1593222----19.2424.6518.3116.054628.137-Hexadecyne(7-十六炔)1618222------1.9-4729.45α-Bisabolol(α-紅沒藥醇)1663222----0.92---4830.02Cadalene(卡達(dá)烯)16821981.821.320.911.210.71---

-：no detected;*:experimentally determined Kovàts indices on the DB-5 column，relative to C8-C30hydrocarbons

不同產(chǎn)地的路路通由于生長條件(如土壤、水分、氣候等)的差異，揮發(fā)性成分在組分和含量上存在明顯相似性和一定的差異性。例如,氧化石竹烯在8個(gè)產(chǎn)地路路通中的含量所占比例為0.19%～12.63%;δ-杜松烯在8個(gè)產(chǎn)地的含量占比為0.18%～16.08%;橙花叔醇在河北、安徽、廣西、貴州4個(gè)產(chǎn)地的相對(duì)含量介于16.05%～24.65%之間，而在湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地均未檢出。其他相對(duì)含量較高的化合物有α-蒎烯(3.1%～11%)、桃金娘醛(2.78%～9.3%)、β-欖香烯(2.0%～9.08%)和香芹蒎酮(2.05%～4.84%)。

此外，在路路通中檢測(cè)出的一些揮發(fā)性成分具有特殊的生物活性和藥理功能。如桉油精(Eucalyptol)可用于治療急性胰腺炎[15];桃金娘醛可有效預(yù)防肝癌，是治療肝癌的候選藥物[16];氧化石竹烯對(duì)于中央及神經(jīng)疼痛有明顯作用，此外還具有抗炎活性[17];橙花叔醇具有保護(hù)神經(jīng)的功效，是常用的鎮(zhèn)定劑[18]。這些研究發(fā)現(xiàn)拓展了路路通潛在的藥用范圍，為路路通的藥物開發(fā)和應(yīng)用提供了理論參考。

表5　主成分分析特征值及累計(jì)方差

圖2　主成分分析得分圖Fig.2　Score plot of principal component analysis(PCA)

2.3主成分分析

主成分分析是化學(xué)計(jì)量學(xué)常用的數(shù)據(jù)分析手段，主要利用“降維”的方法將多個(gè)指標(biāo)轉(zhuǎn)換為幾個(gè)互不相關(guān)的指標(biāo)即主成分，從而使進(jìn)一步研究變得簡(jiǎn)單。本研究以8個(gè)產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分為研究對(duì)象(見表4)，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行主成分分析，得到特征值和累計(jì)貢獻(xiàn)率(見表5)。實(shí)驗(yàn)提取了3個(gè)主成分，累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)76.73%(見表5)，說明這3個(gè)主成分包含了原始變量的絕大部分信息，可以用這3個(gè)主成分代替原來的變量對(duì)不同產(chǎn)地的路路通進(jìn)行比較分析。其中第一主成分(PC1)的特征值為25.16，方差貢獻(xiàn)率高達(dá)52.42%，表明此主成分在數(shù)據(jù)分析中占主導(dǎo)作用;第二主成分(PC2)的特征值為6.89，方差貢獻(xiàn)率為14.35%;第三主成分(PC3)的特征值為4.78，方差貢獻(xiàn)率為9.96%。按照所得3個(gè)主成分對(duì)8個(gè)產(chǎn)地的路路通進(jìn)行分析，結(jié)果如圖2所示。根據(jù)主成分分析得分圖可將8個(gè)產(chǎn)地的路路通分為兩組，第一組包括湖南、江蘇、四川、遼寧，第二組包括河北、安徽、廣西、貴州。

將8個(gè)產(chǎn)地路路通的揮發(fā)性組分進(jìn)行PCA分析，所得載荷圖如圖3所示，圖3A是以PC1和PC2兩個(gè)主成分進(jìn)行分析所得的載荷圖，圖3B是以PC1和PC3兩個(gè)主成分進(jìn)行分析所得的載荷圖。從載荷圖可以看出，48個(gè)組分分布比較集中，表明 8個(gè)產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分含有大量的共有成分，但在組分和含量上具有一定差異。另外，可從圖中較分散的點(diǎn)得到路路通揮發(fā)性成分中具有區(qū)分意義的組分，如45號(hào)組分橙花叔醇(tR=27.38 min)，在河北、安徽、廣西、貴州4個(gè)產(chǎn)地的揮發(fā)性成分中的相對(duì)含量分別為19.24%，24.65%，18.31%和16.05%，含量很高;而在湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地未檢出。37號(hào)組分氧化石竹烯(tR=25.18 min)在湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地的揮發(fā)性成分中的相對(duì)含量分別為12.63%，15.39%，9.42%和10.07%，而在河北、安徽、廣西、貴州的相對(duì)含量分別為3.62%，0.19%，1.68%和0.28%，差異較為明顯。38號(hào)組分δ-杜松烯(tR=25.44 min)在湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地的揮發(fā)性成分中的相對(duì)含量分別為16.08%，16.50%，19.91%和10.87%，而在河北、安徽、廣西、貴州產(chǎn)地的相對(duì)含量分別為2.56%，2.69%，0.18%和1.25%，含量同樣比較懸殊。這3個(gè)組分可作為區(qū)分不同產(chǎn)地路路通的標(biāo)志性化合物，PCA 載荷分析與GC-MS分析結(jié)果基本一致。

圖4　不同產(chǎn)地路路通的聚類分析系統(tǒng)樹狀圖Fig.4　Cluster dendrogram of Liquidambar formosana Hance from different regions

2.4聚類分析

采用SPSS17.0中的聚類分析(Hierarchical cluster)對(duì)8個(gè)產(chǎn)地的路路通進(jìn)行研究。在方法上選擇類間平均鏈鎖法(Between-groups linkage)，在距離測(cè)量技術(shù)上選擇歐式距離平方(Squared euclidean distance)。經(jīng)過7步(8個(gè)樣本)完成聚類，結(jié)果如圖4所示。

圖4直觀地顯示了聚類的整個(gè)過程。橫坐標(biāo)為路路通產(chǎn)地，縱坐標(biāo)為類間的距離，距離值越小，表明組分越相似。由圖可見，當(dāng)類間的距離值小于10時(shí)，湖南、江蘇、四川和遼寧產(chǎn)地的路路通聚為一類，廣西、貴州、安徽和河北產(chǎn)地的路路通聚為一類，從而將8個(gè)產(chǎn)地的路路通分成兩大類。聚類結(jié)果與主成分分析結(jié)果相一致，反映了不同產(chǎn)地路路通的親疏遠(yuǎn)近關(guān)系，對(duì)中藥路路通的質(zhì)量評(píng)價(jià)具有一定的指導(dǎo)意義。

3結(jié)論

本研究采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)分析了不同產(chǎn)地路路通的揮發(fā)性成分，以正交試驗(yàn)優(yōu)化了影響頂空固相微萃取技術(shù)的各項(xiàng)因素。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，湖南、江蘇、四川、遼寧、河北、安徽、廣西和貴州產(chǎn)地的路路通中分別鑒定出35，32，32，37，38，32，33和30種揮發(fā)性成分，總數(shù)為48種，其中19種揮發(fā)性成分為8個(gè)產(chǎn)地共有。主成分分析、聚類分析兩種統(tǒng)計(jì)分析方法結(jié)果均表明，湖南、江蘇、四川、遼寧4個(gè)產(chǎn)地的路路通揮發(fā)性成分比較相似，河北、安徽、廣西、貴州的路路通揮發(fā)性成分比較接近。表明氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法可以有效地對(duì)不同產(chǎn)地的路路通進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，從而為中藥路路通的藥物開發(fā)和科學(xué)栽培管理提供重要參考。

參考文獻(xiàn)：

[1]Yu J，Liu S，Xuan L.Nat.Prod.Res.，2012，26(7)：630-636.

[2]Chien S C，Xiao J H，Tseng Y H，Kuo Y H，Wang S Y.Holzforschung，2013，67(3)：345-351.

[3]Wang K，Pan Y，Wang H，Zhang Y，Lei Q，Zhu Z，Li H，Liang M.Med.Chem.Res.，2010，19(2)：166-176.

[4]Dat N T，Lee I S，Cai X F，Shen G，Kim Y H.Biol.Pharm.Bull.，2004，27(3)：426-428.

[5]Liu Y M，Liu Y M，Li P X，Guo Y，Ma M.Chem.Ind.For.Prod.(劉亞敏，劉玉民，李鵬霞，郭瑩，馬明.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè))，2009，29(4)：77-81.

[6]Montero-Prado P，Bentayeb K，Nerín C.FoodChem.，2013，138(1)：724-731.

[7]Moradi M，Kaykhaii M，Ghiasvand A R，Shadabi S，Salehinia A.Phytochem.Anal.，2012，23(4)：379-386.

[8]Liu Q，Zhang F，Wang Q R.J.Instrum.Anal.(劉倩，張凡，王慶榮.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2007，26(6)：898-900.

[9]Zeng Q，Cao G Q，Li M，Yang C.J.Instrum.Anal.(曾茜，曹光群，李明，楊成.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2014，33(10)：1136-1141.

[10]Zhang Y R，Gao Y N，Lin J Y，Zhou X Q.Chin.J.Anal.Chem.(張玉榮，高艷娜，林家勇，周顯青.分析化學(xué))，2010，38(7)：953-957.

[11]Prades A，Assa R R A，Dornier M，Pain J P，Boulanger R.J.Sci.FoodAgric.，2012，92(12)：2471-2478.

[12]Wang H Y，Guo Y L，Zhang Z X，An D K.J.Instrum.Anal.(王昊陽，郭寅龍，張正行，安登魁.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2004，23(3)：115-117.

[13]Qin G，Tao S，Cao Y，Wu J，Zhang H，Huang W，Zhang S.FoodChem.，2012，134(4)：2367-2382.

[14]Sanchezpalomo E，Diazmaroto M，Perezcoello M.Talanta，2005，66(5)：1152-1157.

[15]Lima P R，de Melo T S，Carvalho K M M B，de OliveiraB，Arruda B R，de Castro Brito G A，Rao V S，Santos F A.LifeSci.，2013，92(24/26)：1195-1201.

[16]Lingaiah H B，Natarajan N，Thamaraiselvan R，Srinivasan P，Periyasamy B M.Fundam.Clin.Pharmacol.，2013，27(4)：443-454.

[17]Chavan M J，Wakte P S，Shinde D B.Phytomedicine，2010，17(2)：149-151.

[18]Nogueira Neto J D，Cardoso de Almeida A A C，Oliveira J S，dos Santos P S，de Sousa D P，de Freitas R M.Neurochem.Res.，2013，38(9)：1861-1870.

歡迎訂閱歡迎投稿歡迎刊登廣告

Investigation of Volatile Components inLiquidambarformosanaHancefrom Different Geographical Origins by HS-SPME/GC-MS and Chemometrics Methods

YANG Yan-qin1,2，ZHOU Guo-jun1*,CHU Guo-hai1，YUAN Kai-long1，JIANG Jian1,DUAN Tai-cheng3*，PAN Yuan-jiang2

(1.Technology Center，China Tobacco Zhejiang Industrial Co.，Ltd，Hangzhou310024，China;2.Department of Chemistry，Zhejiang University，Hangzhou310027，China;3.Changchun Institute of Applied Chemistry，Chinese Academy of Sciences，Changchun130022，China)

Abstract：The volatile compounds in the fruit of Liquidambar formosana Hance were investigated by headspace solid-phase microextraction with gas chromatography-mass spectrometry(HS-SPME/GC-MS).The conditions for HS-SPME were optimized by an orthogonal experimental design.Principal component analysis(PCA) and hierarchical clustering analysis were performed to distinguish the samples from different regions.The optimized extraction conditions were as follows：1.0 g of sample extraction using PDMS-DVB fiber for 40 min at 80 ℃，and a desorption time of 1 min.48 volatile compounds were identified in samples from eight geometrical origins.The compound types from different regions were roughly the same while the compound amounts varied with the origins.The two chemometrics methods suggested that the volatile components of L.formosana fruits originated from Hunan，Jiangsu，Sichuan and Liaoning were similar but differed greatly from that from Guizhou，Guangxi，Anhui and Hebei.The PCA results showed that caryophyllene oxide，δ-cadinene and nerolidol could be used as the representative volatile compounds for distinguishment of samples from different regions.The results demonstrated that the HS-SPME/GC-MS method was efficient in identifying volatile components in traditional Chinese medicine.In addition，by coupled with suitable pattern recognition techniques，the method was also powerful in distinguishing the geographical origins of the herbs，which was helpful for quality control of the medicines.

Key words：headspace solid-phase microextraction with gas chromatography-mass spectrometry(HS-SPME/GC-MS);volatile components;Liquidambar formosana Hance;different geographical regions;chemometrics methods

收稿日期：2015-08-13;修回日期：2015-09-30

基金項(xiàng)目：浙江中煙工業(yè)有限責(zé)任公司科技項(xiàng)目(ZJZY2014A003);國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21275138);吉林省科技創(chuàng)新中心(大型科學(xué)儀器裝備提升)項(xiàng)目(20150623001TC)

*通訊作者：周國俊，博士，研究員，研究方向：煙草化學(xué)，Tel：0571-81188389,E-mail：zhougj@zjtobacco.com

doi：10.3969/j.issn.1004-4957.2016.04.006

中圖分類號(hào)：O657.63;TQ460.72

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào)：1004-4957(2016)04-0406-08

段太成，博士，研究員，研究方向：光譜分析，Tel：0431-85262348,E-mail：tcduan@ciac.ac.cn