李應洪, 李忠海, 付湘晉, 張　慧, 楊海清

(中南林業(yè)科技大學食品科學與工程學院, 湖南 長沙 410004)

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左旋芳樟醇及其兩種復方精油的催眠鎮(zhèn)靜作用

李應洪, 李忠海, 付湘晉, 張慧, 楊海清

(中南林業(yè)科技大學食品科學與工程學院, 湖南 長沙 410004)

摘要:探討左旋芳樟醇及其兩種復方精油(1號復方精油配方：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依蘭依蘭油∶柏木油=1∶2∶4∶3,2號復方精油配方：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依蘭依蘭油∶柏木油=5∶3∶1∶1)對小鼠的催眠鎮(zhèn)靜作用，研究精油對小鼠自主活動、閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間、閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)的影響.結果表明：3種精油對小鼠均有明顯的催眠鎮(zhèn)靜作用，其中以濃度為10(-3)的2號復方精油的效果最佳；在小鼠自主活動能力測試中，2號復方精油組小鼠的總路程與對照組的差異極顯著(P<0.01)，休息時間、活動時間、活躍度、中間區(qū)域時間和中央?yún)^(qū)域路程與對照組的差異顯著(P<0.05)；與對照組相比較，2號復方精油極顯著縮短小鼠睡眠潛伏期(P<0.01)，從(18.47±2.04) s縮短到(14.13±1.73) s，極顯著延長小鼠睡眠時間(P<0.01)，從(27.01±5.84) s延長到(40.41±8.36) s，增加小鼠睡眠只數(shù)(P<0.01)，從1只增加到7只.可見，左旋芳樟醇及其兩種復方精油具有明顯的催眠鎮(zhèn)靜作用，以2號復方精油的效果最佳.

關鍵詞:左旋芳樟醇; 復方精油; 催眠; 鎮(zhèn)靜

近年來，由于生活節(jié)奏加快，大量人群存在疲勞、情緒暴躁、失眠等亞健康狀態(tài)，長期依靠藥物改善睡眠的人口越來越多.但長期服用藥物對身體有一定傷害，甚至會形成依賴性，產(chǎn)生后遺癥等[1].芳香療法可使人放松心情、緩解壓力、減少焦慮、改善睡眠等，而且更安全，是上述亞健康狀態(tài)的重要輔助療法，已成為研究熱點.

目前，芳香療法所用香料、精油中最常見的揮發(fā)性香氣分子為芳樟醇，如芳樟油、黃樟油、香檸檬油、薰衣草油和玫瑰木油等均含有芳樟醇[2].國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，吸入一定濃度的芳樟醇后可以延長戊巴比妥鈉誘導的睡眠時間，減少活動次數(shù)[3]；Umezu et al[4]對ICR小鼠進行Geller和Vogel兩種沖突試驗，給小鼠腹腔注射一定劑量的薰衣草精油后產(chǎn)生抗沖突、抗焦慮作用，經(jīng)進一步對薰衣草精油中各主要成分進行Geller和Vogel兩種沖突試驗，發(fā)現(xiàn)芳樟醇為薰衣草精油抗焦慮、鎮(zhèn)靜作用的主要藥理活性成分；王善懿[5]用單方薰衣草精油和以薰衣草精油為原料配制的復方精油對昆明小鼠進行催眠鎮(zhèn)靜作用研究，發(fā)現(xiàn)復方精油的催眠鎮(zhèn)靜作用更好.Sugawara et al[6]研究了芳樟醇不同光學異構體的藥理效應差異，分別給受試者吸入左旋、右旋和消旋體芳樟醇，發(fā)現(xiàn)吸入左旋芳樟醇的受試者的負面情緒，如激動、不安等得以糾正，吸入消旋體芳樟醇的情況與此相似，而吸入右旋芳樟醇的情況恰好相反，證明左旋芳樟醇的催眠鎮(zhèn)靜作用優(yōu)于右旋和消旋體芳樟醇.但以左旋芳樟醇單方或復方作為芳香精油用于芳香療法來催眠鎮(zhèn)靜尚未見報道[7-8].

本試驗室前期研究以左旋芳樟醇為主要原料，結合幾種經(jīng)過試驗證實同樣具有鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛等作用的芳香精油(薰衣草精油、依蘭依蘭油、柏木油)進行調(diào)配，以香味強弱、香味好感度、香氣持久性、透明度和顏色作為評價指標，采用灰色關聯(lián)度法，確定了兩個最佳復方精油配方.1號復方精油配方為：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依蘭依蘭油∶柏木油=1∶2∶4∶3；2號復方精油配方為：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依蘭依蘭油∶柏木油=5∶3∶1∶1[9].本試驗進一步研究這兩種復方精油對小鼠的催眠鎮(zhèn)靜作用，旨在為芳香療法提供理論依據(jù).

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑與精油左旋芳樟醇、薰衣草精油、依蘭依蘭油和柏木油4種精油由廈門牡丹香化實業(yè)有限公司提供，用這4種精油按一定的體積比配制上述1和2號復方精油；聚乙二醇-200和戊巴比妥鈉均為分析純.用聚乙二醇-200將左旋芳樟醇、1和2號復方精油分別稀釋成10-2、10-3兩個濃度梯度.

1.1.2動物健康ICR品系小鼠(體重35~45 g)，購于湖南斯萊克景達實驗動物有限責任公司.

1.1.3設備主要設備有ZH-ZFT型自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)(淮北正華生物儀器設備有限公司).

1.2方法

1.2.1戊巴比妥鈉閾上劑量和閾下劑量的測定腹腔注射戊巴比妥鈉，使100%小鼠入睡，但又不使睡眠時間過長的注射劑量作為閾上劑量，一般為30~60 mg·kg-1.選取40只小鼠(雌雄各半)隨機分為4組，每組10只，分別以35、40、45和50 mg·kg-1為注射劑量，選取在給藥后使100%小鼠入睡，睡眠時間不超過1 h的劑量[10].

腹腔注射戊巴比妥鈉，使90%~100%小鼠翻正反射不消失的最大劑量作為閾下劑量，一般為20~30 mg·kg-1.選取50只小鼠(雌雄各半)隨機分為5組，每組10只，分別以20、23、25、27和30 mg·kg-1為注射劑量，測定閾下劑量[10].

1.2.2精油對小鼠自主活動影響的試驗小鼠于試驗前8 h禁食、進水，將小鼠(雌雄各半)隨機分組，每組10只.設對照組、左旋芳樟醇組和兩個復方精油組，其中，將各精油組分為兩個濃度組，共7組.取兩條聞香試紙條蘸取適量待試精油，對照組蘸取聚乙二醇-200，放進透明玻璃箱(25 cm×50 cm)中5 min，待香氣在箱中均勻擴散開來，將小鼠放入箱中嗅聞30 min.嗅聞結束后，將小鼠移入自發(fā)活動視頻分析裝置中，適應3 min后記錄小鼠接下來5 min的自主活動情況.通過記錄小鼠在5 min內(nèi)的站立次數(shù)、休息時間、活動時間、活躍度、中間區(qū)域時間、中央?yún)^(qū)域路程和總路程來分析小鼠的自主活動情況[11-12].

1.2.3精油對閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間影響的試驗取小鼠70只(雌雄各半)隨機分為7組，每組10只，嗅聞部分操作與“1.2.2”的步驟相同.各精油組小鼠嗅聞30min后和對照組小鼠腹腔均注射閾上劑量的戊巴比妥鈉，給藥后小鼠翻正反射消失達1 min者，表明已進入睡眠.以注射戊巴比妥鈉至小鼠翻正反射消失之間的時間為睡眠潛伏期，以小鼠翻正反射消失至翻正反射恢復之間的時間為睡眠時間.記錄各組小鼠注射戊巴比妥鈉的時刻、翻正反射消失的時刻和翻正反射恢復的時刻，計算睡眠潛伏期和睡眠時間[10,13].

1.2.4精油對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)影響的試驗取小鼠70只(雌雄各半)隨機分為7組，每組10只，嗅聞部分操作與“1.2.2”的步驟相同.各精油組小鼠嗅聞30 min后和對照組小鼠腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉，以30 min內(nèi)小鼠翻正反射消失達1 min以上者為睡眠指標，記錄各組小鼠30 min內(nèi)的睡眠只數(shù)，計算各組小鼠的睡眠率[10,13].

1.2.5數(shù)據(jù)處理試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示；數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理，組間比較、計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用Fisher精確概率法分析.

2結果與分析

2.1戊巴比妥鈉的閾上劑量和閾下劑量

本試驗測得的戊巴比妥鈉閾上劑量為45 mg·kg-1，閾下劑量為23 mg·kg-1.

2.2精油對小鼠自主活動的影響

精油對小鼠自主活動的影響見表1、2.

表1　濃度為10-3的精油對小鼠自主活動的影響1)

1)n=10；與對照組相比，**表示差異極顯著(P<0.01)，*表示差異顯著(P<0.05).

表2　濃度為10-2的精油對小鼠自主活動的影響1)

1)n=10；與對照組相比，**表示差異極顯著(P<0.01)，*表示差異顯著(P<0.05).

由表1可見：在10-3濃度作用下，左旋芳樟醇組、1和2號復方精油組小鼠的總路程與對照組的差異極顯著(P<0.01)，站立次數(shù)、休息時間和活動時間與對照組的差異顯著(P<0.05)；2號復方精油組的中央?yún)^(qū)域時間和中央?yún)^(qū)域路程與對照組的差異極顯著(P<0.01)，而左旋芳樟醇組與對照組的差異顯著(P<0.05)，1號復方精油組僅在中央?yún)^(qū)域路程與對照組的差異顯著(P<0.05).可見在10-3濃度作用下，2號復方精油的效果優(yōu)于左旋芳樟醇和1號復方精油.

由表2可見，在10-2濃度作用下，左旋芳樟醇、1和2號復方精油組只有總路程與對照組的差異極顯著(P<0.01)，2號復方精油組的站立次數(shù)、休息時間、活動時間、活躍度、中央?yún)^(qū)域時間和中央?yún)^(qū)域路程與對照組的差異顯著(P<0.05)，而左旋芳樟醇組和1號復方精油組僅有部分指標與對照組的差異顯著(P<0.05).可見在10-2濃度作用下，2號復方精油的效果優(yōu)于左旋芳樟醇和1號復方精油.

表1和2表明，3種精油在10-3和10-2兩個濃度之間的效果沒有表現(xiàn)出明顯的差異.

2.3精油對閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間的影響

由表3可見：與對照組相比，10-3、10-2左旋芳樟醇均使閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期顯著縮短(P<0.05)；1號復方精油沒有縮短睡眠潛伏期；10-3、10-22號復方精油分別極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05)縮短睡眠潛伏期，從(18.47±2.04) s縮短至(14.13±1.73) s.

由表3還可見，與對照組相比，10-3、10-2兩個濃度的左旋芳樟醇、1和2號復方精油均可延長閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間.其中，10-32號復方精油組小鼠睡眠時間與照組的差異極顯著(P<0.01)，從(27.01±5.84) s延長到(40.41±8.36) s；其余組與對照組的差異顯著(P<0.05).綜合評價睡眠潛伏期和睡眠時間兩個因素，以10-32號復方精油的效果最佳.

表3　精油對戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間的影響1)

1)n=10；與對照組相比，**表示差異極顯著(P<0.01)，*表示差異顯著(P<0.05).

2.4精油對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)的影響

由表4可見：與對照組相比，10-3、10-2左旋芳樟醇均可顯著增加閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)(P<0.05)；10-31號復方精油可顯著增加睡眠只數(shù)(P<0.05)，10-21號復方精油沒有顯著增加小鼠睡眠只數(shù)；10-3、10-22號復方精油分別極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05)增加睡眠只數(shù)，對照組睡眠小鼠僅1只，而10-32 號復方精油組達7只.可見，2號復方精油的效果明顯優(yōu)于左旋芳樟醇和1號復方精油.

表4　精油對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)的影響1)

1)與對照組相比，**表示差異極顯著(P<0.01)，*表示差異顯著(P<0.05).

3討論與結論

本試驗結果表明：10-3、10-2左旋芳樟醇均可明顯減少小鼠自主活動，減少閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期，延長閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間，顯著增加閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù)；以左旋芳樟醇為主要原料配制的1號復方精油在一定程度上也明顯減少小鼠自主活動，延長小鼠睡眠時間，縮短睡眠潛伏期，增加睡眠只數(shù)，但是效果不及左旋芳樟醇；2號復方精油的效果明顯優(yōu)于1號復方精油和左旋芳樟醇.對比10-3、10-2兩個濃度顯示，在同一種精油作用下，10-3濃度的效果均優(yōu)于10-2.

一般情況下，精油的療效主要由含量最豐的香氣成分決定，其他成分如果療效與主成分相似，則增強該療效；若次要成分與主成分的療效相左，其療效有時會互相抵消.氣味相近、植物科屬相似或是揮發(fā)速度差不多的精油，均可以互相搭配形成復方精油；相鄰或同一類精油彼此調(diào)和會有較佳的效果和香氣.左旋芳樟醇主要有安眠、鎮(zhèn)靜和安神等作用，氣味屬木香型；薰衣草精油的主要成分有乙酸左旋芳樟酯、左旋芳樟醇、薰衣草醇和乙酸薰衣草酯，氣味屬花草香型，有催眠鎮(zhèn)靜[4]、抗氧化[14-15]、降血壓[16]和解痙等作用；依蘭依蘭油主要成分有左旋芳樟醇、對甲酚甲醚、石竹烯、大根香葉烯和苯甲酸甲酯，氣味屬花香型，具有鎮(zhèn)定安撫、降血壓和殺菌等作用，對疲勞產(chǎn)生的食欲不振、神經(jīng)性失眠和高血壓等有幫助[2]；柏木油主要成分有柏木烯和柏木腦，氣味屬草木香型，可舒緩憤怒情緒、抑郁情緒[2].本試驗所選精油的主要成分均有安眠、鎮(zhèn)靜、安神之功效，而且氣味相近、植物科屬相似.

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(責任編輯:施曉棠)

Hypnotic and sedative effect of L-linalool and two kinds of blended essential oil

LI Yinghong, LI Zhonghai, FU Xiangjin, ZHANG Hui, YANG Haiqing

(College of Food Science and Engineering, Central South University of Forestry and Technology, Changsha, Hunan 410004, China)

Abstract:This paper studied the hypnotic and sedative effect of three kinds of aromatic essential oil, L-linalool and two kinds of blended oil which contained L-linalool (No.1 essential oil, L-linalool∶lavender essential oil∶Yilang Yilang oil∶cedar oil=1∶2∶4∶3; No.2 essential oil, L-linalool∶lavender essential oil∶Yilang Yilang oil∶cedar oil=5∶3∶1∶1). Spontaneous locomotor activity, sleep latency and time were monitored with sleeping induced by pentobarbital sodium. Spontaneous locomotor activity results showed that all the five treated groups walked significantly shorter distance than that of CK group (P<0.01). All the five groups varied from the CK group in the frequency of standing, resting duration, active time and central region distance (P<0.05). No. 2 blended oil in the concentration of 10(-3) led to the largest number of sleepy mice compared with other groups including CK group (P<0.01). Mice treated with No. 2 blended oil in the concentration of 10(-3) had the shortest sleep latency and longest sleep duration (P<0.01). In conclusion, L-linalool and two kinds of blended oil containing L-linalool performed notable hypnotic and sedative function, with No.2 blended oil presenting the best efficacy.

Key words:L-linalool; essential oil; hypnosis; sedation

DOI:10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2016.01.011

中圖分類號:R965.1

文獻標識碼:A

文章編號:1671-5470(2016)01-0065-05

作者簡介:李應洪(1968-)，男，副教授，博士研究生.研究方向：林產(chǎn)品深加工.Email:yhlee_daniel@163.com.通訊作者付湘晉(1980-)，男，副教授，博士.研究方向：食品科學.Email：drxjfu@163.com.

基金項目:林業(yè)公益性行業(yè)科研專項經(jīng)費項目(201104044).

收稿日期：2015-01-05修回日期：2015-07-10