丁文政，侴桂新，程雪梅*，穆丹丹，蘇來(lái)曼·哈力克，王崢濤，王長(zhǎng)虹*(.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上?！?0；.新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司，烏魯木齊　80000；.新疆維吾爾自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，烏魯木齊　8000)

?

香青蘭子化學(xué)成分的初步研究

丁文政1，侴桂新1，程雪梅1*，穆丹丹2，蘇來(lái)曼·哈力克3，王崢濤1，王長(zhǎng)虹1*(1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上海201203；2.新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司，烏魯木齊830000；3.新疆維吾爾自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，烏魯木齊830002)

摘要：目的研究香青蘭(Dracocephalum moldavica L.)種子的化學(xué)成分。方法采用硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析、薄層色譜、HPLC色譜等方法，分離純化香青蘭子的化學(xué)成分，通過(guò)UV、MS、NMR波譜方法對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行解析和鑒定。結(jié)果分離并鑒定了6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為田薊苷(tilianin，1)，β-胡蘿卜苷(daucosterol，2)，黃芪苷(astragalin，3)，阿魏酸(ferulic acid，4)；咖啡酸 (caffeic acid，5)，2，5-二羥基苯甲酸(2，5-dihydroxy benzoic acid，6)。結(jié)論所有化合物均為首次從香青蘭子中分離得到。

關(guān)鍵詞：香青蘭子；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

王長(zhǎng)虹，男，研究員，博士生導(dǎo)師

香青蘭(DracocephalummoldavicaL.)為唇形科青蘭屬1年生草本植物,系維吾爾和蒙古族習(xí)用藥材[1]。其藥材標(biāo)準(zhǔn)收載于內(nèi)蒙古蒙藥材標(biāo)準(zhǔn)、衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)維藥分冊(cè)，還曾被收載于1977 年版《中國(guó)藥典》[2]。近20年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)香青蘭的研究多集中在其地上部分的藥理藥效方面[3]，其具有益心護(hù)腦、保肝健脾等功效，用于治療心悸心痛、頭暈?zāi)X脹、反應(yīng)遲鈍、胃虛肝弱等癥[1,4]。香青蘭主要含有黃酮類(lèi)、揮發(fā)油、萜類(lèi)、氨基酸、微量元素等[3-8]。而香青蘭子為同一植物的不同藥用部位，雖同樣被作為民族藥使用，但到目前為止，香青蘭子尚未作為藥用品種被收

載入標(biāo)準(zhǔn)之中。盡管香青蘭子在制劑中(如復(fù)方木尼孜其顆粒)已使用多年，但一直屬倒掛品種之一[1]，對(duì)香青蘭子化學(xué)成分的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道很少見(jiàn)。本文配合香青蘭子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，首次對(duì)香青蘭子化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到6個(gè)化合物，分別為田薊苷(tilianin，1)，β-胡蘿卜苷(daucosterol，2)，黃芪苷(astragalin，3)，阿魏酸(ferulic acid，4)，咖啡酸(caffeic acid，5)，2，5-二羥基苯甲酸(2，5-dihydroxybenzoic acid，6)?；衔锝Y(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

1儀器與試藥

1.1儀器質(zhì)譜儀(LCQ DECAXPplus，F(xiàn)innigan公司)；核磁共振儀 (AV 400型，AV 600型，Brucker公司);KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀電熱恒溫水浴箱(DK-S24，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；離心機(jī)(TDL80-2B，Anke)；粉碎機(jī)(上海淀久中藥機(jī)械制造有限公司)。

圖1化合物1～6的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

Fig.1 Chemical structures of compounds 1-6

1.2試藥香青蘭子藥材由新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，經(jīng)新疆維吾爾食品藥品檢驗(yàn)所中藥室蘇來(lái)曼·哈力克主任藥師鑒定為唇形科植物香青蘭DracocephalummoldavicaL.的干燥種子；甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚等均為工業(yè)純?cè)噭?；薄層和柱層析硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；Sephadex LH-20為安瑪西亞公司生產(chǎn)。

2提取與分離

稱取3 kg香青蘭子，粉碎，加10倍量體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇回流提取3次，每次3 h。提取液減壓濃縮回收乙醇至無(wú)醇味，水層分別用2倍體積的二氯甲烷萃取6次，得到二氯甲烷部位浸膏141.4 g，硅膠拌樣。經(jīng)硅膠柱(200～300 目)色譜，依次用純石油醚、石油醚-乙酸乙酯(100∶1，50∶1，20∶1，10∶1，5∶1，1∶1)、乙酸乙酯、二氯甲烷-甲醇(1∶1)進(jìn)行洗脫，得不同餾分。乙酸乙酯段經(jīng)重結(jié)晶得到化合物1(30 mg)、化合物2(340 mg)；乙酸乙酯段(第124～125餾分)上凝膠柱層析，用甲醇洗脫，得到化合物3(5 mg)。石油醚-乙酸乙酯(1∶1)段進(jìn)行硅膠柱(200～300 目)色譜，采用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，合并36～46餾分，通過(guò)刮板得到化合物4(4 mg)；合并98～110餾分上凝膠柱層析，用甲醇洗脫，得到化合物5(5 mg)和6(4 mg)。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1黃色粉末。mp 307～308 ℃。根據(jù)質(zhì)譜確定相對(duì)分子質(zhì)量為316，結(jié)合碳譜確定其分子式為C16H12O7。1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ：12.90(1H，s，5-OH)，8.03(2H，d，J=9.0 Hz，2′， 6′-H)，7.10(2H，d，J=9 Hz，3′，5′-H)，6.92(1H，s，3-H)，6.84(1H，d，J=2.1 Hz，8-H)，6.44(1H，d，J=2.1 Hz，6-H)，5.07(1H，d，J=7.4 Hz，glc-1-H)，3.84(3H，s，OMe)。13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照一致，化合物1鑒定為田薊苷。

化合物2白色粉末，體積分?jǐn)?shù)為5%的硫酸乙醇溶液顯色呈紫紅色，Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性。與β-胡蘿卜苷對(duì)照品混合點(diǎn)樣，經(jīng)TLC對(duì)照分析，確定該化合物為β-胡蘿卜苷[8-10]。

化合物3根據(jù)質(zhì)譜確定相對(duì)分子質(zhì)量為194。

1H-NMR(MeOH-d6，600 MHz)δ：8.05 (2H，d，J= 8.7 Hz，2′，6′-H)，6.88(2H，d，J=8.7 Hz，3′，5′-H)，6.40(1H，d，J=1.4 Hz，8-H)，6.20 (1H，d，J=1.5 Hz，6-H)，5.24(1H，d，J=7.2 Hz，glc-1-H)。13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]對(duì)照基本吻合，化合物3鑒定為黃芪苷(也稱紫云英苷)。

化合物4白色針狀結(jié)晶，mp 170～173 ℃。根據(jù)質(zhì)譜確定相對(duì)分子質(zhì)量為194。1H-NMR (MeOH-d6，600 MHz)δ:7.57(1H，d，J=15.9 Hz，7-H)，7.17(1H，d，J=1.9 Hz，2-H)，7.05(1H，dd，J=1.8，6.6 Hz，6-H)，6.80(1H，d，J=8.1 Hz，5-H)，6.31(1H，d，J=15.8 Hz，8-H)，3.88(3H，s，OMe)。13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]對(duì)照基本吻合，化合物4鑒定為阿魏酸(也稱E-4-羥基-3-甲氧基肉桂酸)。

化合物5黃色粉末，mp 223～225 ℃。根據(jù)質(zhì)譜確定相對(duì)分子質(zhì)量為180。1H-NMR (MeOH-d6， 600 MHz)δ:9.53(1H，d，J=15.8 Hz，7-H)，7.05(1H，d，J=2.0 Hz，2-H)，6.95(1H，dd，J=2.0，6.0 Hz，6-H)，6.79(1H，d，J=8.1 Hz，5-H)，6.24(1H，d，J=15.8 Hz，8-H)。13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]對(duì)照基本吻合，化合物5鑒定為咖啡酸(也稱3，4-二羥基肉桂酸)。

化合物6黃色粉末，易溶于丙酮、甲醇，mp 204～206 ℃，三氧化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(MeOH-d6，600 MHz)δ:7.34(1H，d，J=1.8 Hz，6-H)，7.32(1H，dd，J=1.8，6.5 Hz，4-H)，6.68(1H，d，J=8.2 Hz，3-H)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]對(duì)照基本吻合，化合物6鑒定為2，5-二羥基苯甲酸(也稱龍膽酸或5-羥基水楊酸)。

13C-NMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1化合物1～6的13C-NMR化學(xué)位移

Tab.113C-NMR chemical shift of compounds 1-6 (MeOH-d6，600 MHz)

No134561128．1128．6116．32163．2159．1124．0115．8151．73104．0135．4150．6147．5118．54182．2179．5149．5150．1125．65157．2163．1116．6117．2146．6699．899．9124．0123．4124．47164．0166．0146．7147．3895．194．8112．0116．89162．7158．5172．110105．6105．71'122．9122．82'128．6132．33'114．8116．14'161．3161．65'114．8116．16'128．6132．31″100．1104．12″73．375．73″77．478．04″69．871．35″76．678．46″60．862．6-COOH171．5172．4-OMe55．856．6

注：化合物1以DMSO-d6為溶劑；化合物2為β-胡蘿卜苷，未做13C-NMR。

致謝:上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥所的施松善老師代測(cè)氫譜和碳譜,特此致謝。

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Pilot study on chemical constituents from the semen ofDracocephalummoldaviaL.

DING Wenzheng1，CHOU Guixin1，CHENG Xuemei1*，MU Dandan2，Suleyman HALIK3，WANG Zhengtao1，WANG Changhong1*

(1.Institute of Chinese Materia Medica，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，the Ministry of Education Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicines，Shanghai R&DCentre for Standardization of Chinese Medicine，Shanghai 201203，China；2.Xinjiang Uygur Pharmaceutical Limited Company，Xinjiang Urumqi 830000，China；3.Xinjiang Uygur Autonomous Region Food and Drug Inspection，Xinjiang Urumqi 830002，China)

Abstract:Objective To study the chemical constituents of the seeds of Dracocephalum moldavia L.. Methods The chemical ingredients from the seeds of Dracocephalum moldavia were isolated and purified by silica gel and Sephadex LH-20 co-column chromatography, thin layer chromatography and HPLC chromatography. Their structures were determined on the basis of spectral analysis of UV，MS，NMR. Results 6 compounds were isolated and identified as tilianin (1)，daucosterol (2)，astragalin (3)，ferulic acid (4)， caffeic acid (5) and 2，5-dihydroxy benzoic acid (6). Conclusion All compounds were isolated from the seeds of Dracocephalum moldavica for the first time.

Key words:seeds of Dracocephalum moldavica L.；chemical constituents；structure identification

(收稿日期：2015-09-11)

*通信作者：程雪梅，女，副研究員，碩士研究生導(dǎo)師

作者簡(jiǎn)介：丁文政，男，在讀本科生

基金項(xiàng)目：上海市國(guó)內(nèi)科技合作領(lǐng)域項(xiàng)目(編號(hào): 14495800200)； 新疆維吾爾自治區(qū)科技支疆計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào): 2013911134) ； 國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高暨2015年版藥典科研任務(wù)(編號(hào): M39)

中圖分類(lèi)號(hào)：R284

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2407(2016)02-0122-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.02.004