王波，魏澗，郭小軍，李泉源，丁韜，瞿叢新，蘭江

(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院器官移植乳腺外科，湖北十堰442000)

AIB1在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及意義

王波，魏澗，郭小軍，李泉源，丁韜，瞿叢新，蘭江

(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院器官移植乳腺外科，湖北十堰442000)

目的探討乳腺癌擴(kuò)增基因1(AIB1)蛋白的表達(dá)與三陰性乳腺癌預(yù)后的關(guān)系。方法利用免疫組化方法檢測(cè)108例三陰性乳腺癌病理標(biāo)本中AIB1蛋白表達(dá)情況，結(jié)合患者臨床病理資料，分析AIB1不同表達(dá)水平與三陰性乳腺癌患者預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果108例三陰性乳腺癌患者，AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)43例(40%)，陰性表達(dá)65例(60%)。與AIB1蛋白陰性表達(dá)組比較，AIB1陽(yáng)性表達(dá)組的總生存與無(wú)復(fù)發(fā)生存均明顯低于陰性表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)與三陰性乳腺癌患者的不良預(yù)后相關(guān)。有必要進(jìn)行深入的研究，進(jìn)一步明確AIB1可否成為三陰性乳腺癌潛在的治療靶點(diǎn)。

乳腺癌擴(kuò)增基因1；三陰性乳腺癌；預(yù)后；表達(dá)

乳腺癌擴(kuò)增基因1(Amplified in breast cancer 1，AIB1)在包括乳腺癌在內(nèi)的前列腺癌、食管癌等多種惡性腫瘤中高表達(dá)，并與其發(fā)生、發(fā)展以及臨床不良預(yù)后相關(guān)。但是，AIB1在三陰性乳腺癌(Triple negative breast cancer，TNBC)中的表達(dá)及臨床意義，國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。本文通過(guò)回顧性分析，針對(duì)性探討AIB1在三陰性乳腺癌中的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步深入認(rèn)識(shí)三陰性乳腺癌的特點(diǎn)，為三陰性乳腺癌的臨床治療提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料本研究收集湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)總醫(yī)院乳腺科自2005年1月至2013年1月初次收治的，且經(jīng)手術(shù)治療、病理確診的三陰性乳腺癌162例，剔除資料記載不完整病例，最終入選120例，均為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，術(shù)后均行FEC方案化療6個(gè)療程，入選患者均為女性，年齡28～68歲，中位年48歲。絕經(jīng)前95例，絕經(jīng)后25例。按照AJCC 2002年版TNM國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)分期，Ⅰ期35例，Ⅱ期41例，Ⅲ期44例，Ⅳ0例。入選患者均簽署知情同意書，且經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)通過(guò)。

1.2 方法用免疫組織化學(xué)的鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(S-P)法，進(jìn)行AIB1蛋白表達(dá)的檢測(cè)，具體操作按照說(shuō)明書進(jìn)行。免疫組織化學(xué)的一抗：鼠抗人AIB1多克隆抗體(Santa Cruz公司，濃度1：50)；鼠抗人雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、表皮生長(zhǎng)因子受體(HER2)單克隆抗體(北京中杉生物技術(shù)公司，濃度1:50)。S-P試劑盒購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)公司，用已知的陽(yáng)性病理標(biāo)本作為陽(yáng)性對(duì)照，磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗，作為陰性對(duì)照。

1.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷

1.3.1 AIB1免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)AIB1陽(yáng)性細(xì)胞為：細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒，其染色結(jié)果判定采用Sinicrope改良法[1]。陽(yáng)性細(xì)胞≥5%為AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)。

1.3.2 ER、PR、HER2免疫組織化學(xué)判斷標(biāo)準(zhǔn)低倍鏡或高倍鏡下細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜上棕黃色顆粒細(xì)胞，為陽(yáng)性細(xì)胞，并計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。ER、PR陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞1%為ER、PR陽(yáng)性表達(dá)。HER2免疫組織化學(xué)判斷依據(jù)：根據(jù)2009年版HER2檢測(cè)指南，HER2陽(yáng)性定義為：免疫組織化學(xué)檢測(cè)+++或熒光原位雜交(FISH)檢測(cè)HER2高表達(dá)。

1.4 隨訪所有入選120例病例均接受定期隨訪(治療結(jié)束后前3年，每3～6個(gè)月隨訪一次；第4～5年，每6～12個(gè)月隨訪一次；5年后，每年隨訪一次)。隨訪方式為門診或者住院復(fù)查。隨訪起點(diǎn)：患者接受手術(shù)治療時(shí)間；隨訪終點(diǎn)：患者死亡、失訪以及最后一次隨訪仍健在。局部、區(qū)域復(fù)發(fā)為患者術(shù)后患側(cè)胸壁或區(qū)域淋巴結(jié)的復(fù)發(fā)；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以臨床或影像學(xué)診斷明確。無(wú)復(fù)發(fā)生存(Disease free survival，DFS)為患者接受手術(shù)治療，到出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的時(shí)間；總生存期(Overall survival，OS)為患者接受手術(shù)治療，到死于各種原因的時(shí)間，及末次隨訪仍健在的時(shí)間。隨訪時(shí)間終點(diǎn)：2013年1月31日。中位隨訪51個(gè)月(12～90個(gè)月)。共隨訪完整病例108例，失訪12例，隨訪率為90%。隨訪期間失訪、研究截止仍生存者，記為截尾值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。AIB1蛋白陽(yáng)性率差異，及其表達(dá)與臨床病理相關(guān)指標(biāo)的分析用χ2檢驗(yàn)；Kaplan-meier法繪制生存曲線，AIB1不同表達(dá)組間生存差異用Log-rank法檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ER、PR、HER2檢測(cè)結(jié)果經(jīng)過(guò)我院病理科2位醫(yī)師獨(dú)立、盲法閱片，本研究入選108例乳腺癌患者ER、PR、HER2免疫組織化學(xué)結(jié)果均明確為陰性，即均為三陰型乳腺癌。

2.2 AIB1在三陰性乳腺癌組織的表達(dá)AIB1蛋白陽(yáng)性染色，其主要位于癌細(xì)胞的細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)(圖1)。本研究最終入選的108例三陰性乳腺癌患者，AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)43例(中度陽(yáng)性+強(qiáng)陽(yáng)性) (40%)，AIB1蛋白陰性表達(dá)共65例(60%)。

2.3 AIB1蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系臨床分期Ⅱ期、Ⅲ期(59例)乳腺癌標(biāo)本中AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)23例(39%)，低于臨床分期Ⅰ期(49例)的AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)20例(41%)，但二者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。AIB1蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者的年齡、絕經(jīng)與否、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期無(wú)關(guān)(P＞0.05)，與三陰性乳腺癌的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移以及生存相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

2.4 AIB1蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者隨訪結(jié)果的關(guān)系至隨訪截止日期(2013年1月31日)，出現(xiàn)局部、區(qū)域復(fù)發(fā)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移共28例，死亡17例。其中，AIB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)組，復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移18例，死亡11例，AIB1蛋白陰性表達(dá)組，復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移10例，死亡6例；AIB1陽(yáng)性表達(dá)組，DFS 11～42個(gè)月，平均26.5個(gè)月；AIB1陰性表達(dá)組，DFS 12～57個(gè)月，平均34.5個(gè)月。生存分析顯示，AIB1蛋白表達(dá)水平與三陰性乳腺癌預(yù)后相關(guān)，AIB1高表達(dá)組，DFS、OS均明顯低于低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見圖2、圖3。

圖1 AIB1表達(dá)

圖2 AIB1蛋白不同表達(dá)患者OS的比較

圖3 AIB1蛋白不同表達(dá)患者DFS的比較

表1 AIB1蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系（例）

3 討論

三陰性乳腺癌(TNBC)因ER、PR、HER2均為陰性，臨床常規(guī)治療，除化療外，目前尚缺乏其他顯著有效的治療方法[2]，并且由于部分乳腺癌患者對(duì)化療藥物耐藥，影響化療療效；此外，三陰性乳腺癌具有惡性度高、易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等不良生物學(xué)特點(diǎn)[3]，導(dǎo)致目前三陰性乳腺癌治療效果較差，預(yù)后不良。三陰性乳腺癌與非三陰性乳腺癌相比，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率高[4]。目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)三陰性乳腺癌的治療，除了優(yōu)化化療外，也嘗試一些新的治療方法：聚二磷酸腺苷核糖聚合酶抑制劑(PARP抑制劑)、血管生成抑制劑(貝伐單抗)、表皮生長(zhǎng)因子抑制劑(EGFR抑制劑)等[5]，臨床研究證實(shí)有一定的療效，但并不能顯著改善三陰性乳腺癌患者的預(yù)后。因此，研究三陰性乳腺癌的臨床病理特點(diǎn)，積極探索三陰性乳腺癌潛在治療靶點(diǎn)，對(duì)改善三陰性乳腺癌的預(yù)后具有積極的臨床意義。

乳腺癌擴(kuò)增基因1與前列腺癌、食管癌、結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)[6-7]。AIB1高表達(dá)，同樣與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及不良預(yù)后密切相關(guān)[8]。有研究提示，AIB1高表達(dá)與乳腺癌內(nèi)分泌治療療效相關(guān)，AIB1高表達(dá)提示內(nèi)分泌治療耐藥[9]。有學(xué)者根據(jù)乳腺癌的分子分型，進(jìn)行分層分析證實(shí)，AIB1在ER陰性乳腺癌高表達(dá)，與較差的預(yù)后相關(guān)[10]。但是，針對(duì)性的探討AIB1蛋白在三陰性乳腺癌中的表達(dá)，及其與預(yù)后的相關(guān)性，國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。

總之，本文初步明確AIB1蛋白的不同表達(dá)水平，與三陰性乳腺癌的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)：AIB1蛋白高表達(dá)乳腺癌患者，無(wú)復(fù)發(fā)生存、總生存均明顯低于低表達(dá)者(P＜0.05)。下一步，我們將開展相關(guān)的基礎(chǔ)和臨床研究，進(jìn)一步證實(shí)AIB1蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌療效、預(yù)后的關(guān)系，以期明確AIB1是否可作為三陰性乳腺癌的潛在治療靶點(diǎn)，并積極探索三陰性乳腺癌的治療方法，改善三陰性乳腺癌患者的療效和預(yù)后。

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Expression of AIB1 protein in patients with triple-negative breast cancer and its clinical significance.

WANG Bo, WEI Jian,GUO Xiao-Jun,LI Quan-yuan,DING Tao,QU Cong-xin,LAN Jiang.Department of Organ Transplantation and Breast Surgery,Dong Feng Hospital,Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,Hubei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of amplified in breast cancer 1(AIB1)protein in patients with triple-negative breast cancer and its correlation with the prognosis of the patients.MethodsImmunohistochemical staining was applied to detect the expression ofAIB1 protein in specimens of 108 patients with triple-negative breast cancer.Based on the clinical pathological data,the correlation between AIB1 expression levels and the prognosis of triple-negative breast cancer were analyzed.ResultsAmong the 108 patients,AIB1 protein was observed positively expressed in 43 patients(40.0%)and negatively expressed in 65 patients(60.0%).The overall survival and relapse-free survival were significantly lower in patients with positive AIB1 expression than those with negative AIB1 expression(P＜0.05).ConclusionPositive AIB1 expression is correlated to poor prognosis of patients with triple-negative breast cancer.Further investigation is essential to determine whether AIB1 might be an effective therapeutic target for triple-negative breast cancer.

Amplified in breast cancer 1(AIB1);Triple-negative breast cancer;Prognosis;Expression

R737.9

A

1003—6350（2016）01—0053—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.01.019

2015-07-14)

王波。E-mail：376046878@qq.com