盧艷紅　王巖　聶明豪　李秀榮　王銳　倪林穎

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三磷酸腺苷酶家族蛋白-2在骨肉瘤中的表達(dá)及臨床意義

盧艷紅1王巖1聶明豪1李秀榮1王銳1倪林穎2

【摘要】目的 通過實(shí)驗(yàn)分析骨肉瘤患者樣本中三磷酸腺苷酶家族蛋白-2（ATAD-2）的表達(dá)情況以及對(duì)臨床診斷和治療的意義。方法 收集骨肉瘤樣本以及骨肉瘤周圍組織的樣本，各50例，檢測(cè)ATAD-2表達(dá)情況。結(jié)果 骨肉瘤樣本中的ATAD-2的mRNA的表達(dá)量高于骨肉瘤周圍組織的樣本。結(jié)論 臨床上發(fā)現(xiàn)某些組織疑似骨肉瘤且三磷酸腺苷酶家族蛋白-2表達(dá)程度較高時(shí)，可考慮患骨肉瘤的可能性較大。

【關(guān)鍵詞】三磷酸腺苷酶家族蛋白-2；骨肉瘤；表達(dá)

作者單位：1 150036哈爾濱，黑龍江省醫(yī)院；2 150001黑龍江省哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院

我國(guó)衛(wèi)生組織對(duì)我國(guó)患有不同種類的癌癥的人數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，我國(guó)每年患有不同種類的癌癥疾病的患者700多萬人，每年由于癌癥死亡的人數(shù)有90多萬人。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)［1-3］，每年患有不同種類的癌癥人數(shù)在增長(zhǎng)。臨床癌癥的治療壓力也在增加，同時(shí)腫瘤有與癌癥相似的性質(zhì)，患有腫瘤的人數(shù)也在增多。近年來，我國(guó)研究人員對(duì)腫瘤的研究程度不斷加深，臨床上對(duì)腫瘤的治療方法也在增加，腫瘤的早期治療的效果有所提升，早期腫瘤的治愈率也有所提高，對(duì)腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)和確診有重要意義。三磷酸腺苷酶家族蛋白-2參與多種腫瘤的基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯，機(jī)體內(nèi)ATAD-2含量高低與腫瘤有一定的聯(lián)系。本文通過實(shí)驗(yàn)分析骨肉瘤患者的樣本中ATAD-2的表達(dá)情況、ATAD-2對(duì)骨肉瘤的診斷和治療的意義，具體報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1基本資料

選取2015年3月～2015年11月我院及外院腫瘤科接受治療的患有骨肉瘤的患者100例作為研究對(duì)象，選取骨肉瘤樣本和骨肉瘤周圍組織的樣本各50例。根據(jù)樣本種類不同，將樣本劃分成骨肉瘤樣本組和骨肉瘤周圍組織組，各50例。骨肉瘤樣本組男性27例，女性23例，年齡39～82歲，平均年齡（63.88±14.91）歲，骨肉瘤周圍組織樣本組男性22例，女性28例，年齡35～78歲，平均年齡（64.62±1.89）歲，腫瘤TNM分期：20例Stage I：20 例T1N0M0；41例Stage II A：16例T0N1M0，13例T1N1M0，11例T2N0M0；20例Stage II B：14例T2N1M0，6例T3N0M0；20例Stage III A：10例T0N2M0，3例T1N2M0，2例T2N2M0，4例T3N1M0，1例T3N2M0。對(duì)比兩組患者的年齡、性別、身高，體重、心率脈搏和其他疾病，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。

1.2方法

針對(duì)研究對(duì)象取骨肉瘤樣本和骨肉瘤周圍組織的樣本，均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)HE染色，光鏡觀察。所有病例石蠟包埋，4～5μm厚切片，經(jīng)脫臘、水化后用免疫組化EnVision 兩步法標(biāo)記，ATAD 2、c-MYC 使用EDTA緩沖液（pH 8.0）高壓熱修復(fù)，ER、PR、HER-2和CK 5/6使用檸檬酸鈉緩沖液（pH 6.0）高壓熱修復(fù)，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，用已知陽性切片作為陽性對(duì)照。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組患者的ATAD-2的mRNA的表達(dá)程度和ATAD-2的蛋白表達(dá)部位。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析，計(jì)數(shù)資料用n，%表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

骨肉瘤組患者的 ATAD-2的mRNA的表達(dá)程度為（7.98± 1.98），腫瘤周圍組織組患者的 ATAD-2的mRNA的表達(dá)程度為（0.99±0.13），P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。骨肉瘤組患者的 ATAD-2的蛋白表達(dá)主要聚集在細(xì)胞核，而腫瘤周圍組織組ATAD-2的蛋白主要表現(xiàn)在腫瘤組織的細(xì)胞核中。

3　討論

ATAD 2又稱ANCCA，是一種雌激素和雄激素受體和布羅莫結(jié)構(gòu)域核共活化物。ATAD 2定位在染色體8 q 24，是 ATP 酶家族的新成員，含有220個(gè)氨基酸的保守序列，該序列中具有ATP結(jié)合位點(diǎn)，是ATAD 2蛋白借以調(diào)節(jié)下游蛋白合成與分解的重要位點(diǎn)［4-5］。TAD 2在人類多種惡性腫瘤（如肝癌、前列腺癌、胃腸癌等）中的表達(dá)均高于正常組織或良性腫瘤。細(xì)胞周期的改變?cè)谀[瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。癌基因c-MYC是MYC家族成員之一，屬于調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的癌基因，同時(shí)作為重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，其通過調(diào)控下游基因的表達(dá)，使細(xì)胞通過G 1期進(jìn)入S期，加速細(xì)胞周期的進(jìn)程，使細(xì)胞無限增殖［6-7］。近來研究發(fā)現(xiàn)，ATAD 2是c-MYC的共活化物，ATAD 2協(xié)同c-MYC作用于下游的癌基因從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。骨肉瘤樣本中的ATAD-2的mRNA的表達(dá)量，高于骨肉瘤周圍組織的樣本，但是對(duì)c-MYC與ATAD2之間的關(guān)系仍有待進(jìn)一步探究。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)骨肉瘤中的ATAD-2的表達(dá)程度相對(duì)于其他組織的ATAD-2的表達(dá)程度高，所以臨床上發(fā)現(xiàn)某些組織疑似骨肉瘤且ATAD-2表達(dá)程度較高時(shí)，可以考慮骨肉瘤的可能性大。

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The Clinical Significance of Adenosine Triphosphatase Family Protein-2 Expression in Osteosarcoma

LU Yanhong1WANG Yan1NIE Minghao1LI Xiurong1WANG Rui1NI Linying21 Heilongjiang Provincial Hospital，Harbin 150036，China.2 The Affiliated Tumour Hospital of Harbin Medical University，Harbin 150001，China

［Abstract］Objective Analysis of the expression of 2（ATAD-2） of adenosine triphosphatase（ATPase） family proteins in patients with osteosarcoma samples and the significance of clinical diagnosis and treatment.Methods 50 cases of osteosarcoma and cases of osteosarcoma were collected，and the expression of ATAD-2 was detected.Results The expression of mRNA in osteosarcoma samples was higher than that in the surrounding tissues of osteosarcoma samples，and the ATAD-2 expression was higher than that of osteosarcoma.Conclusion Clinical found some suspected osteosarcoma and adenosine triphosphatase（ATPase） family protein 2 expression in a higher degree when considered in patients suffering from osteosarcoma possibility is larger.

［Key words］ATPase family protein-2，Osteosarcoma，Expression

【中圖分類號(hào)】R73-3

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1674-9308（2016）08-0070-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.08.050

通訊作者：倪林穎，E-mail：nilinying@sina.com