郭冰琪

再生障礙性貧血患者血清IL-17及IL-6表達及臨床意義

郭冰琪

再生障礙性貧血；白細(xì)胞介素-17；白細(xì)胞介素-6

再生障礙性貧血（aplastic anemia）是指由多種病因所致的造血功能障礙并由此而引起全血細(xì)胞減少的血液系統(tǒng)疾病，臨床表現(xiàn)主要為骨髓組織增生異常低下以及全血細(xì)胞的減少[1]。關(guān)于再生障礙性貧血的發(fā)生機制，目前相關(guān)的研究還尚無明確定論，有研究表明免疫功能的紊亂以及細(xì)胞因子的失調(diào)可能參與了其發(fā)生發(fā)展過程[2]。白細(xì)胞介素-17（interleukin-17，IL-17）是由Th17細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子，有研究證實它在自身免疫性疾病、腫瘤以及感染等疾病的發(fā)病機制中具有重要的作用[3]。白細(xì)胞介素-6 （interleukin-6，IL-6）作為由骨髓基質(zhì)細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子，在急性期反應(yīng)、免疫應(yīng)答以及造血調(diào)節(jié)等過程中均發(fā)揮重要的作用[4]。本研究通過檢測血清IL-17和IL-6在再生障礙性貧血患者外周血中的水平，探討兩種細(xì)胞因子在再生障礙性貧血發(fā)生機制中的作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年5月—2015年5月我院收治的再生障礙性貧血患者為本研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)骨髓細(xì)胞學(xué)及實驗室檢查證實符合再生障礙性貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；（2）近期內(nèi)未接受過糖皮質(zhì)激素以及免疫抑制劑等藥物的治療；（3）符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求；（4）患者及家屬知情同意，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）孕產(chǎn)婦、哺乳期婦女；（2）合并有其它自身免疫性疾病者；（3）合并有肝、腎功能障礙者；（4）近期有發(fā)生感染、發(fā)熱等癥狀；（5）合并有其他可能影響本研究結(jié)果的疾病如惡性腫瘤等。

符合納入標(biāo)準(zhǔn)患者共79例，其中急性再生障礙性貧血患者組37例，男22例，女15例；年齡34～58歲，平均（43.6±5.8）歲；慢性再生障礙性貧血患者組42例；男28例，女14例；年齡23～61歲，平均（41.7± 6.9）歲。同期隨機選取80名健康體檢者作為對照，其中男49名，女31名；年齡33～64歲，平均（45.2±5.5）歲。三組的性別、年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方 法 于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取肘部靜脈血3mL，然后以2000rpm的轉(zhuǎn)速離心，將分離得到的血清置于-80℃下保存，留待后用。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測三組對象的血清IL-17和IL-6水平。ELISA試劑盒由北京中山生物技術(shù)公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒上的操作說明進行相關(guān)操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件進行數(shù)據(jù)錄入及統(tǒng)計分析，計量資料采用（±s） 表示，多組獨立樣本的比較采用方差分析，兩兩比較采用Dunnett-t檢驗，相關(guān)性采用Pearson直線相關(guān)分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 三組血清IL-17和IL-6水平比較 三組血清IL-17、IL-6水平經(jīng)方差分析比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=12.068，10.175，P＜0.05）。兩兩比較，急性再生障礙性貧血組和慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17、IL-6水平高于健康對照組，急性再生障礙性貧血組與慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17、IL-6水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 三組血清IL-17和IL-6表達水平（pg/mL±s）

表1 三組血清IL-17和IL-6表達水平（pg/mL±s）

注：與健康對照組比較，△P＜0.05

組別急性再生障礙性貧血組慢性再生障礙性貧血組健康對照組例數(shù)37 42 80 F P IL-17 213.72±21.62△202.58±23.05△86.36±22.89 12.068 0.023 IL-6 21.04±2.97△20.68±3.11△11.70±3.32 10.175 0.039

2.2 再生障礙性貧血患者血清IL-17、IL-6水平相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson直線相關(guān)分析，再生障礙性貧血患者的血清IL-17與IL-6水平呈正相關(guān)關(guān)系，r= 0.672，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

再生障礙性貧血作為臨床常見、骨髓組織造血生理功能嚴(yán)重衰竭的自身免疫性疾病，嚴(yán)重威脅患者的健康。目前多數(shù)研究者認(rèn)為T淋巴細(xì)胞所介導(dǎo)的骨髓造血干細(xì)胞特異性免疫功能方面的異常是導(dǎo)致其發(fā)病的主要機制[6]。

Th17細(xì)胞是一群可以合成和分泌大量IL-17細(xì)胞因子的T淋巴細(xì)胞亞群，研究證實它在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、自身免疫性疾病以及移植排斥反應(yīng)等過程中具有重要的作用[7]。IL-17是由155個氨基酸所構(gòu)成的同型二聚體，主要通過活化絲裂原激活蛋白激酶以及核因子途徑，促進各種趨化細(xì)胞因子以及黏附分子的合成和釋放，以使嗜中性粒細(xì)胞大量聚集并發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，并最終影響炎癥感染反應(yīng)，自身免疫性疾病以及惡性腫瘤等的病理發(fā)生及發(fā)展過程[8]。本研究結(jié)果顯示，急、慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17水平高于對照組。提示血清IL-17可能通過直接或者間接作用而抑制骨髓造血，從而在再生障礙性貧血的發(fā)生機制中發(fā)揮重要作用，與有關(guān)研究結(jié)果一致[9]。此外，急、慢性再生障礙性貧血患者血清IL-17水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示IL-17在再生障礙性貧血發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮效應(yīng)與病情急緩關(guān)系不大。

血清IL-6是由單核-吞噬細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞等合成及分泌的細(xì)胞因子，它參與了免疫系統(tǒng)功能調(diào)節(jié)、骨髓組織造血功能調(diào)控等方面[10]。有研究證實，再生障礙性貧血患者的骨髓以及外周血中的IL-17水平較正常人高的同時，也通過誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌IL-6及IL-8等因子而參與再生障礙性貧血的病理發(fā)展過程[11]。本研究結(jié)果顯示，急、慢性再生障礙性貧血患者的血清IL-17、IL-6水平均高于健康對照組。提示血清IL-6確實參與了再生障礙性貧血的發(fā)生，與有關(guān)研究結(jié)果相似[12]?？赡苁且驗樵偕系K性貧血患者的造血功能低下，以致于機體代償性分泌IL-6促進造血，但IL-6長時間處于較高水平，可能會引起造血干細(xì)胞長期處于一種細(xì)胞增殖異常的過程，而缺乏必需的休整和修復(fù)的時間，以致造血干細(xì)胞的增殖功能減退，出現(xiàn)造血干及幼稚細(xì)胞的增殖活躍而外周細(xì)胞并沒有增多[13]。也有研究者認(rèn)為病毒感染或者其他因素激活了單核巨噬細(xì)胞及T細(xì)胞而增加IL-6的分泌，并使正常的造血調(diào)控失衡而誘導(dǎo)發(fā)生再生障礙性貧血[14]。進一步的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)再生障礙性貧血患者的血清IL-17與IL-6水平之間呈正相關(guān)關(guān)系，r=0.672。提示IL-6在再生障礙性貧血發(fā)生機制中具有重要作用以外，同時也為Th17細(xì)胞的分化過程提供了重要的環(huán)境，從而間接誘導(dǎo)IL-17的合成和分泌，以導(dǎo)致免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)功能紊亂而發(fā)生再生障礙性貧血。當(dāng)然也能用升高的IL-17能夠誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌IL-6解釋這一現(xiàn)象。

綜上所述，血清IL-17和IL-6參與了再生障礙性貧血的發(fā)生及發(fā)展過程，深入研究兩種細(xì)胞因子在再生障礙性貧血發(fā)病中的機制可為臨床治療提供重要的指導(dǎo)。

［1］Wang H，Guo L，Shao Z.Hemoperitoneum from corpus luteum rupture in patients with aplastic anemia［J］.Clin Lab，2015，61（3-4）：427-430.

［2］Yu Z，Zhou F，Ge LF，et al.Mechanism of immunosuppressants combined with cord blood for severe aplastic anemia ［J］.Int J Clin Exp Med，2015，8（2）：2484-2494.

［3］Fujimura T，Kakizaki A，Kambayashi Y，et al.Bullous pemphigoid accompanied by aplastic anemia：the induction of IL-17-producing cells in the affected areas of the skin［J］. Case Rep Dermatol，2012，4（3）：211-214.

［4］El Mahgoub IR，Afify RA，Botros SK，et al.Immunoregulatory cytokines gene polymorphisms in Egyptian patients affected with acquiredaplastic anemia［J］.Ann Hematol，2014，93 （6）：923-929.

［5］中華醫(yī)學(xué)會血液學(xué)分會紅細(xì)胞疾?。ㄘ氀W(xué)組.再生障礙性貧血診斷治療專家共識［J］.中華血液學(xué)雜志，2010，11（3）：790-792.

［6］謝鋒，李學(xué)剛，侯麗君.CD69在急性髓系白血病患者外周血T淋巴細(xì)胞的表達及意義［J］.臨床醫(yī)學(xué)工程，2014，21 （11）：1404-1405，1409.

［7］楊友衛(wèi)，鄭智茵，姚紅章.Th17/Treg細(xì)胞失衡與再生障礙性貧血研究進展［J］.中國實驗血液學(xué)雜志，2012，20（1）：214-218.

［8］Du HZ，Wang Q，Ji J，et al.Expression of IL-27，Th1 and Th17 in patients with aplastic anemia［J］.J Clin Immunol，2013，33（2）：436-445.

［9］陳瑩，陳柯材，劉林.再生障礙性貧血患者Treg/Th17細(xì)胞失衡及臍帶MSCs對其的調(diào)節(jié)作用［J］.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2013，35（14）：1515-1519.

［10］郭振興，鄭翠玲，陳振萍，等.白介素6對人Th17細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用［J］.中國實驗血液學(xué)雜志，2011，19（2）：496-498.

［11］De Latour RP，Visconte V，Takaku T，et al.Th17 immune responses contribute to the pathophysiology of aplastic anemia［J］.Blood，2010，116（20）：4175-4184.

［12］Gu Y，Hu X，Liu C，et al.Interleukin（IL）-17 promotes macrophages to produce IL-8，IL-6 and tumour necrosisfactor-alpha inaplastic anaemia［J］.Br J Haematol，2008，142（1）：109-114.

［13］蔣超超，陳永峰，黃愛萍.IL-6對再生障礙性貧血骨髓造血的影響［J］.臺州學(xué)院學(xué)報，2012，34（6）：48-52.

［14］俞罡，陳靜桂.Th17細(xì)胞及其相關(guān)因子IL-17和IL-6在再生障礙性貧血患者中的表達及意義［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2015，36（4）：574-576.

（收稿：2015-09-11 修回：2015-11-30）

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