郭　彬，陳玉龍

(河南中醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046)

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·綜述·

中藥逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展

郭彬，陳玉龍

(河南中醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046)

摘要腫瘤的多藥耐藥是導(dǎo)致腫瘤化療失敗和復(fù)發(fā)的主要原因之一，因此，對(duì)其機(jī)制的研究成為研究的熱點(diǎn)。中藥因低毒、高效、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)在逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的過(guò)程中發(fā)揮獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。現(xiàn)對(duì)腫瘤多藥耐藥的形成機(jī)制及近年來(lái)中藥在逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞腫瘤；多藥耐藥；中藥；逆轉(zhuǎn)；綜述

腫瘤的多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是指在治療過(guò)程中對(duì)一種抗腫瘤藥物出現(xiàn)耐藥后又對(duì)其他結(jié)構(gòu)不同、作用靶位不同的藥物也出現(xiàn)了交叉耐藥[1]，給臨床治療腫瘤造成巨大阻礙。中藥不同于普通的逆轉(zhuǎn)劑作用靶點(diǎn)單一，即使是中藥單體結(jié)構(gòu)也很復(fù)雜，逆轉(zhuǎn)機(jī)制也多種多樣。因此，近年來(lái)，從中藥中篩選有效的逆轉(zhuǎn)劑并探索其逆轉(zhuǎn)機(jī)制已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。本文將對(duì)近年來(lái)中藥逆轉(zhuǎn)MDR及其機(jī)制的研究進(jìn)展作以綜述。

1腫瘤多藥耐藥的經(jīng)典途徑及中藥的逆轉(zhuǎn)作用

P-糖蛋白(Permeability glycoprotein，P-gp)是一種存在細(xì)胞膜的糖蛋白。P-gp介導(dǎo)的MDR是形成MDR的經(jīng)典途徑，其機(jī)制主要是依賴ATP水解釋放能量，使藥物不斷地被泵出細(xì)胞外，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)藥物濃度持續(xù)降低，從而形成MDR[2]。除P-gp外，多藥耐藥相關(guān)蛋白(multidrug resistance protein，MRP)、乳腺癌耐藥蛋白(breast cancer protein，BCP)及肺耐藥相關(guān)蛋白(lung resistance-related protein，LRP)產(chǎn)生耐藥的機(jī)制均與P-gp相似，也屬于MDR的經(jīng)典途徑。彭向前等[3]在研究氧化苦參堿對(duì)耐阿霉素人白血病細(xì)胞系K562/A02時(shí)發(fā)現(xiàn)：氧化苦參堿作用細(xì)胞后可下調(diào)其膜糖蛋白p170的表達(dá)，從而升高胞內(nèi)藥物濃度。王煒等[4]也在研究中發(fā)現(xiàn)：苦參素能夠在體外逆轉(zhuǎn)人肝癌細(xì)胞株HepG2/ADM的多藥耐藥性?？鄥⑺刈饔糜谝褜?duì)ADM、CDDP、5-Fu 3種化療藥物表現(xiàn)出交叉耐藥的人肝癌細(xì)胞株HepG2/ADM 48 h后，發(fā)現(xiàn)耐藥細(xì)胞株的藥物敏感性均有一定程度增加，P-gp及其相關(guān)基因ABCB1的表達(dá)均有下調(diào)。王培培等[5]發(fā)現(xiàn)：黃芪皂苷Ⅱ作用24 h后可下調(diào)人肝癌耐藥細(xì)胞BEL-7402/FU細(xì)胞的P-gp和MDR1 mRNA表達(dá)，從而逆轉(zhuǎn)其耐藥。異甘草素可通過(guò)抑制肺癌A549/R細(xì)胞P-gp基因和蛋白表達(dá)逆轉(zhuǎn)其多藥耐藥性[6]。據(jù)實(shí)驗(yàn)報(bào)道：靈芝提取的乙酸乙酯部位和正丁醇部位均能提高阿霉素在胃癌耐藥細(xì)胞系SGC7901/ADR細(xì)胞內(nèi)的蓄積，降低MDR1轉(zhuǎn)錄和P-gp的表達(dá)[7]。川芎嗪[8]、青蒿素[9]等中藥單體也都能通過(guò)降低膜糖蛋白表達(dá)來(lái)逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥。

2腫瘤多藥耐藥的非經(jīng)典途徑及中藥逆轉(zhuǎn)作用

腫瘤產(chǎn)生MDR的非經(jīng)典途徑主要是指特異性酶在細(xì)胞內(nèi)的活性發(fā)生變化，從而使藥物的毒性作用降低，主要包括谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(glutathione-S-transferase，GSTs)、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoismeraseⅡ，ToPoⅡ)及蛋白激酶C(protein kinaseC，PKC)。

2.1中藥作用于GST逆轉(zhuǎn)MDR

GSTs是由多種同工酶組成的超家族酶，研究發(fā)現(xiàn)：MDR的發(fā)生于GST的升高有密切聯(lián)系[10]，尤其是GSTs-π，其表達(dá)量的高低與腫瘤的耐藥程度呈正比[11]；復(fù)方五味子素B可逆轉(zhuǎn)耐奧沙利鉑的人結(jié)腸癌細(xì)胞THC-8307/OXA的MDR，作用的靶點(diǎn)就是GSTs-π，使其表達(dá)量降低[12]。楊鴻武等[13]研究發(fā)現(xiàn)：中藥砒霜(三氧化二砷，As2O3)在非細(xì)胞毒性量作用于胃癌耐藥細(xì)胞時(shí)可以下調(diào)GSTs-π表達(dá)量，使細(xì)胞內(nèi)ADM含量增加。

2.2中藥作用于ToPoⅡ逆轉(zhuǎn)MDR

ToPoⅡ參與了DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)和重組等多個(gè)生物學(xué)過(guò)程，其主要作用是調(diào)控DNA的拓?fù)錉顟B(tài)，其介導(dǎo)的MDR的機(jī)制是使耐藥細(xì)胞酶轉(zhuǎn)錄水平和活性下降及胞內(nèi)藥物濃度下降[14]。夏薇等[15]在研究鹽酸千金藤堿對(duì)人乳腺上皮細(xì)胞癌耐藥株MCF-7/ADM MDR的逆轉(zhuǎn)作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，千金藤堿可以提高ToPoⅡ的催化活性。有研究[16]報(bào)道：柴胡提取物可以增加耐藥肝癌細(xì)胞株BEL7402細(xì)胞內(nèi)ToPoⅡa的表達(dá)，并提高DNAToPoⅡa的活性，從而逆轉(zhuǎn)其耐藥性。藤黃酸是中藥藤黃的主要活性成分，對(duì)抗腫瘤有一定療效，有研究發(fā)現(xiàn)：藤黃酸可以通過(guò)與ToPoⅡa競(jìng)爭(zhēng)ATP結(jié)合位點(diǎn)來(lái)抑制其催化活性，同時(shí)裂解其介導(dǎo)的DNA[17]。

2.3中藥作用于PKC逆轉(zhuǎn)MDR

PKC是一種鈣離子依賴的蛋白激酶，參與了MDR的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。其介導(dǎo)的MDR的機(jī)制主要是通過(guò)調(diào)節(jié)P-gp的磷酸化來(lái)增強(qiáng)其活性[18]。除了P-gp外，PKC也可以使一些與MDR形成有關(guān)的如MRP、LRP、 GST、TOPO等磷酸化，繼而增加其活性[19]。有研究表明：槲皮素能夠通過(guò)對(duì)PKC的抑制，影響其信號(hào)分子之間的傳導(dǎo)，進(jìn)而使胃癌細(xì)胞株EPG85-257RDB的MDR逆轉(zhuǎn)[20]。

3中藥逆轉(zhuǎn)凋亡介導(dǎo)的MDR

細(xì)胞的凋亡是一種自主的程序性死亡，很多化療藥物殺死腫瘤細(xì)胞是通過(guò)引起腫瘤細(xì)胞的凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的，因此，一個(gè)正常完整的凋亡途徑對(duì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡至關(guān)重要；但是，MDR的產(chǎn)生機(jī)制之一就是凋亡途徑出現(xiàn)缺失或者抗凋亡程序增強(qiáng)。抑癌基因p53的突變或缺失和癌基因Bcl-2的過(guò)度表達(dá)，以及一些與凋亡途徑相關(guān)的基因如ras、c-fos、c-fun等的突變都可以導(dǎo)致化療藥物藥效減低，進(jìn)而形成MDR。金絲桃苷是中藥貫葉連翹的主要成分之一，有研究報(bào)道其能夠?qū)闪鍪竽[瘤產(chǎn)生明顯的抑制作用；能夠下調(diào)耐藥模型小鼠S180腫瘤細(xì)胞P-gp與LRP的表達(dá)；對(duì)凋亡調(diào)控因子Bcl-2的表達(dá)降低[21]。槲皮素對(duì)結(jié)腸癌HT-29作用是槲皮素在一定程度上通過(guò)誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞凋亡來(lái)逆轉(zhuǎn)其耐藥性，其逆轉(zhuǎn)機(jī)制可能與上調(diào)caspase-3和bax表達(dá)有關(guān)[22]?？鄥A是中藥苦參的主要有效成分，研究結(jié)果顯示：其可上調(diào)Fas表達(dá)，從而抑制AKT磷酸化和Caspase通絡(luò)的活化來(lái)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的作用[23]。

4中藥作用于NF-κB逆轉(zhuǎn)MDR

核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，它與腫瘤及許多其他疾病密切相關(guān)。NF-κB一般情況下存在于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)細(xì)胞受到刺激后存在于細(xì)胞核，并且會(huì)與很多基因的相應(yīng)位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合，同時(shí)增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄，通過(guò)這一過(guò)程來(lái)使自身免于凋亡。這一過(guò)程與腫瘤MDR的產(chǎn)生有密切聯(lián)系[24]。有研究報(bào)道顯示：無(wú)毒性劑量的葛根素處理K562/A02耐藥細(xì)胞，NF-κB的活性會(huì)發(fā)生變化，經(jīng)過(guò)活化的K562/A02細(xì)胞，NF-κB的表達(dá)會(huì)上調(diào)，這一現(xiàn)象提示該細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生可能與NF-κB活性的升高有關(guān)，但葛根素作用細(xì)胞后會(huì)使NF-κB的表達(dá)下調(diào)[25]。

5中藥作用在其他靶點(diǎn)逆轉(zhuǎn)MDR

中藥逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥機(jī)制復(fù)雜，除了上述的幾個(gè)逆轉(zhuǎn)途徑外，有研究發(fā)現(xiàn)：補(bǔ)中益氣湯含藥血清可通過(guò)下調(diào)細(xì)胞生存通路中的mTOR的表達(dá)，可有效逆轉(zhuǎn)肺腺癌順鉑耐藥細(xì)胞株A549的耐藥性[26]。梁偉等[27]在研究中發(fā)現(xiàn)：至真方含藥血清能夠逆轉(zhuǎn)人大腸癌耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株HCT-8/VCR的多藥耐藥，其機(jī)制可能與抑制Hedgehog信號(hào)通路中相關(guān)Smo、Glil蛋白表達(dá)，進(jìn)而引起P-gp的下調(diào)有關(guān)。此外，單味中藥白花蛇舌草、連翹、中藥復(fù)方左金丸等[28-30]成分也對(duì)逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥性有一定作用。

6小結(jié)

腫瘤MDR的產(chǎn)生是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，如何克服MDR一直是治療腫瘤的熱點(diǎn)。中藥與普通的化學(xué)逆轉(zhuǎn)藥物相比有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，首先，中藥往往成分相對(duì)復(fù)雜，作用的靶點(diǎn)很多；其次，中藥對(duì)人體損害較小，不良反應(yīng)少；最后，中藥可以通過(guò)提高機(jī)體自身的免疫機(jī)能來(lái)抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。但目前研究中藥逆轉(zhuǎn)MDR仍存在一些局限和問(wèn)題，主要有：研究中藥逆轉(zhuǎn)MDR的機(jī)制往往是從單一的靶點(diǎn)，并沒(méi)有從中藥的成分復(fù)雜性考慮到其他作用的靶點(diǎn)；研究對(duì)象以中藥單體為主，而對(duì)中藥復(fù)方的研究報(bào)道較少；研究機(jī)制多集中在經(jīng)典途徑，非經(jīng)典途徑的研究報(bào)道較少；研究方法多是體外實(shí)驗(yàn)，體內(nèi)研究和臨床驗(yàn)證相對(duì)不足。因此，尋找有確切療效的中藥逆轉(zhuǎn)劑，發(fā)揮中藥的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)運(yùn)用到臨床上是日后研究的方向。

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(編輯馬虹)

文章編號(hào):1001-6910(2016)03-0078-03

中圖分類(lèi)號(hào):R73

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

doi:10.3969/j.issn.1001-6910.2016.03.39

收稿日期：2015-09-06；修回日期：2015-12-23