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一起豬高致病性藍耳病的病例報告

2015-12-21 06:00于青海山東省動物疫病預(yù)防與控制中心山東濟南250000
山東畜牧獸醫(yī) 2015年11期
關(guān)鍵詞:耳病切片酒精

于青海 (山東省動物疫病預(yù)防與控制中心 山東 濟南 250000)

一起豬高致病性藍耳病的病例報告

于青海 (山東省動物疫病預(yù)防與控制中心 山東 濟南 250000)

豬高致病性藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),是以母豬流產(chǎn)及仔豬呼吸系統(tǒng)障礙為主要病征的傳染病,病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)。該病毒傳染性強,而且感染機體后致免疫抑制及各種并發(fā)癥,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大危害和經(jīng)濟損失。本研究通過山東某豬場送檢病料,通過臨床癥狀、剖檢變化及實驗室診斷,經(jīng)PCR病原學(xué)鑒定確定是豬藍耳病。

豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的,主要以引起母豬發(fā)熱、厭食和流產(chǎn)、早產(chǎn)、木乃伊胎及弱仔等繁殖障礙及仔豬和生長豬出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)疾病和高度死亡率為特征的一種高度接觸性傳染病。該病在臨床上還表現(xiàn)為耳部皮膚發(fā)紺,因此又被稱為“藍耳病”。除此之外,臨床上還表現(xiàn)在部分康復(fù)母豬發(fā)情不典型,以及屢配不孕等癥狀。該病于1987年首次發(fā)生在美國的北卡羅來納、衣阿華等州的豬群中,當(dāng)時被稱為“豬神秘病”,很快該病廣泛流行于歐洲、美洲等養(yǎng)豬國家和地區(qū),亞洲的日本、韓國、菲律賓、中國和中國臺灣省亦相繼報道了該病。PRRSV具有嗜巨噬細胞性、持續(xù)感染性以及抗體依賴性增強作用等特征。根據(jù)資料顯示,不同PRRSV毒株在毒力性、抗原性以及遺傳性方面均有很大的差異。根據(jù)基因序列以及抗原性差異,將PRRSV分為兩種獨特的基因型,LV是在歐洲分離的大部分歐洲株原型(European, I型);而在北美洲用建立的細胞株分離到類似的病毒,它們稱為VR-2332,VR-2332是北美洲大多數(shù)PRRSV原型(North American,Ⅱ型)。在核酸水平,這兩種基因型僅有約60%的同源性,但是,在臨床上都引起相似的癥狀。1991年,荷蘭學(xué)者Wensvoort等從Lelystad 鎮(zhèn)的豬肺泡巨噬細胞內(nèi)首次分離到該病病原,稱之為Lelystad病毒(Lelystad virus, LV)。 1992年,美國也分離到該病的病原體,稱之為豬不育與呼吸綜合征病毒(SIRSV)。1992年,世界動物衛(wèi)生組織(OIE)正式將該病毒命名為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)。并將該病列為B類傳染病,但是近年來該病給養(yǎng)豬業(yè)帶來的巨大損失已經(jīng)遠遠超過了某些A類傳染病。我國于1996年,由郭寶清首次在國內(nèi)某豬場分離到了PRRSV,并命名為CH-1a株。2006年下半年,我國南方地區(qū)爆發(fā)了“無名高熱”疫情。以高熱、厭食、嗜睡、嘔吐、拉稀、便秘、呼吸困難咳嗽及全身皮膚發(fā)紅為主要臨床癥狀的急性傳染性疾病,任何年齡段的豬都可發(fā)病。最后確診結(jié)果表明,高熱病的主要致病原為高致病性PRRSV(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV。到目前為止,在我國境內(nèi)大多數(shù)省份均有PRRS疫情出現(xiàn)過。

初次發(fā)生時,臨床表現(xiàn)一般比較嚴重。一次流行過后,通??赡苻D(zhuǎn)入亞臨床感染或持續(xù)感染狀態(tài),隨后呈地方流行性發(fā)生。常與細菌、支原體、圓環(huán)病毒、豬瘟病毒、偽狂犬病毒、豬流感病毒、豬呼吸道冠狀病毒等混合感染使臨床表現(xiàn)形式復(fù)雜化。盡管世界各養(yǎng)豬大國對PRRS給予了足夠的重視,但是目前為止人們對PRRSV結(jié)構(gòu)蛋白及非結(jié)構(gòu)蛋白的功能、病毒的致病機制、病毒的持續(xù)感染機制、機體對病毒的免疫機制等缺乏深入的認識而難于防治,而且一旦豬場發(fā)生PRRS后,需要花很大的費用和時間才能凈群,所以目前PRRS還是威脅各國豬業(yè)的主要疾病之一。

1 發(fā)病情況

山東省某豬場自2015年5月上旬開始,豬群中陸續(xù)有病豬出現(xiàn),病豬體溫在40.0~40.5℃之間,除發(fā)熱外,別無其他癥狀,生豬飲食正常,精神尚可。該場獸醫(yī)認為積熱所致,并無大礙,只在飼料中添加助消化藥。至5月20日上午,飼養(yǎng)員喂豬時發(fā)現(xiàn)38頭2月齡的豬發(fā)病,病豬躺臥在角落,精神不振,不進食,結(jié)膜充血,呼吸急促,,大便十硬,測量體溫高達41.5℃。該場獸醫(yī)憑經(jīng)驗診斷為豬傳染性胸膜肺炎,先后使用青霉素、鏈霉素、排疫肽等藥物,但不能退其熱,并且癥狀日益加重。至22日上午發(fā)現(xiàn)14頭生豬死亡。

2 臨床癥狀

臨診檢查發(fā)現(xiàn)病豬精神沉郁,食欲不振或廢絕,口渴但不欲飲.部分病豬出現(xiàn)后軀無力、不能站立或共濟失調(diào)等神經(jīng)癥狀,呼吸用難、喘氣,嚴重出現(xiàn)腹式呼吸,吸頻率在35~40次/min.脈搏90~l20次/min,體溫在4l~42.5℃之間.皮膚干燥發(fā)紅變紫,少數(shù)毛孔有出血點.尤其以腹下、四肢末梢和耳根等處皮膚更明顯,斑塊呈紫紅色,手壓不褪色,眼睛發(fā)紅,分泌物增多,呈膠黃狀,甚至出現(xiàn)結(jié)膜炎癥狀,無尿或少尿.尿色深黃,糞便硬,病期較長者體型消瘦,被毛粗亂,出現(xiàn)貧血癥狀。

3 剖檢變化

主要病變?yōu)閺浡蚤g質(zhì)性肺炎,肺腫大。間質(zhì)增寬,個別病例肺臟體積縮小。表面有散在隆起的橡皮狀硬塊,肺臟表面有點狀出血或瘀血,氣管內(nèi)有泡沫狀分泌物,胸腔及腹腔有渾濁的黃色積液,全身淋巴結(jié)旱不同程度的腫大或水腫,淋巴結(jié)顏色暗紫,切面呈大理石樣出血,特別以腹股溝淋巴結(jié)和肺門淋巴結(jié)尤為明顯,會咽部嚴重充血。脾臟腫大,邊緣有紫黑色的壞死和梗死。腎臟腫大,顏色變深,呈褐色或土黃色,質(zhì)地較脆,有針尖大出血點或瘀血現(xiàn)象。胃、大腸、小腸發(fā)現(xiàn)仃面積大小不一的潰瘍灶或出血點。肝臟腫脹,呈土黃色,上面有淺灰色壞死灶或潰瘍點。

圖1 PRRS病例肺臟病理變化A.間質(zhì)性肺炎,肺臟心、尖葉實變 B.肺臟大量出血點 C.肺臟氣管和支氣管中大量粘液

4 組織學(xué)檢查

病理組織學(xué)技術(shù)是病理解剖學(xué)中最基礎(chǔ)、最重要的研究手段之一,包括病理切片技術(shù)和顯微鏡下的識片。

4.1 常規(guī)石蠟切片器材

切片機、切片刀、磨刀具、熔蠟及包埋工具。

4.2 石蠟切片方法

4.2.1 取材 采集大小0.5×0.5×0.5cm3的組織塊。

4.2.2 固定 采集的組織塊立即投入固定液中,常用的固定液是10%中性福爾馬林,固定24h即可。

4.2.3 脫水 已固定好的組織塊進行適當(dāng)修整后先經(jīng)流水沖水12~14h,然后用梯度酒精使組織塊充分脫水,脫水常用的酒精梯度和所需時間是:70%酒精(過夜)→80%酒精(2h)→95%酒精I(30min)→95%酒精Ⅱ(30min)→100%酒精I(20min)→100%酒精Ⅱ(20min)。

4.2.4 透明 脫水的組織塊需用二甲苯透明,其目的在于將組織塊中的無水酒精置換出來,為浸蠟做準(zhǔn)備。透明分兩次進行,在二甲苯Ⅰ中停留10min,二甲苯Ⅱ中停留10min。

4.2.5 浸蠟 將透明好的組織塊浸入石蠟內(nèi)(已熔化的石蠟分別裝在2~3個蠟杯中),每個蠟杯中停留時間約為30min。以上步驟均須在石蠟熔化狀態(tài)下進行。

4.2.6 包埋 將浸好石蠟的組織塊放入盛有熔化石蠟的包埋框內(nèi),使組織塊埋于石蠟中。待蠟塊冷卻后進行適當(dāng)修整,并將其粘附與臺木上。

4.2.7 切片 將制成的組織蠟塊用切片機3um切成薄片。4.2.8 展片和貼片 將切下的切片用于毛筆托起放入展片槽內(nèi)的水面,讓其自然伸展(水溫要求40~45℃,溫度過低不易于伸展,過高則可將切片熔化)。切片展平,取一潔凈載玻片在切片附近垂直插入水中,緩緩上提,切片可自動貼附于載玻片上,然后將其置溫箱中烘干。

4.2.9 脫蠟、進水、染色及封藏 組織切片→二甲苯Ⅰ(10min)→二甲苯Ⅱ(10min)→無水酒精(2min)→90%酒精(2min)→80%酒精(2min)→70%酒精(2min)→蒸餾水(3min)→蘇木素染液(5min)→常水沖洗至不脫色為止→1%鹽酸酒精分化(迅速)→自來水藍化(15min)→85%酒精(迅速)→1%伊紅染液(迅速)→95%酒精I(迅速)→95%酒精Ⅱ(2min)→無水酒精I(2min)→無水酒精Ⅱ(2min)→二甲苯Ⅰ(5min)→二甲苯Ⅱ(5min)→滴加中性樹膠→蓋上玻片→鏡檢。

4.3 鏡檢結(jié)果

(1)肺臟病程稍短者,肺泡壁增厚,肺泡內(nèi)無炎性分泌物病,葉間靜脈和肺泡壁毛細血管內(nèi)充滿紅細胞。病程加長,病變也越嚴重,肺泡壁明顯增寬,肺泡壁及支氣管周圍的間質(zhì)中有大量的炎性細胞浸潤,且肺泡腔內(nèi)有大量脫落的上皮細胞和炎性細胞。(2)淋巴結(jié)皮質(zhì)內(nèi)淋巴小結(jié)變性壞死,固有結(jié)構(gòu)遭受破壞,淋巴結(jié)皮髓質(zhì)界限不清楚,細胞排列松散,靠近被膜的皮質(zhì)區(qū)組織間大量紅細胞蓄積。髓質(zhì)內(nèi)毛細血管淤血充血。(3)脾臟小梁尚可分辨,脾小體輪廓不清,但淋巴細胞和網(wǎng)狀細胞崩解、碎裂,鞘動脈上皮細胞變性壞死,脾索細胞腫脹、變性、壞死、崩解,脾臟中可見大量紅細胞,其中一頭發(fā)病死亡豬的脾臟內(nèi)可見淋巴小結(jié)中心壞死,巨噬細胞和大量網(wǎng)狀細胞增生。(4)肝臟肝細胞顆粒變性,細胞核濃縮,肝索排列紊亂,中央靜脈和肝竇狀隙擴張可見大量紅細胞、少量淋巴細胞。(5)腎臟皮質(zhì)和髓質(zhì)充血、出血,腎小球毛細血管充血,腎小球擴張,腎小球周圍間質(zhì)血管充血,腎小管上皮細胞發(fā)生水泡變性,不同程度壞死脫落。(6)腸道顯微鏡下可見黏膜上皮細胞變性,壞死,甚至脫落進腸腔。黏膜層有少量紅細胞,黏膜下層毛細血管充血,少量淋巴細胞滲出。(7)大腦表現(xiàn)為非化膿性腦炎的病變,神經(jīng)細胞變性壞死,血管內(nèi)大量紅細胞蓄積,血管周圍2~3層淋巴細胞環(huán)繞呈現(xiàn)袖套現(xiàn)象,膠質(zhì)細胞增生。(8)心肌眼觀無明顯病變,顯微鏡下可見心肌纖維顆粒變性。

圖2 PRRS病例肺、腦病理變化A.間質(zhì)性肺炎 B.腦袖套現(xiàn)象

5 病原學(xué)檢測

無菌采集病豬腦、淋巴結(jié)、肺、血清各5份,經(jīng)豬藍耳病病毒RT—PCR ORF5基因擴增檢測均為陽性(PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠板電泳,在紫外燈下觀察,結(jié)果為:在818 pb處出現(xiàn)亮帶,并與Mark和陽性對照亮帶相符合)。

圖3 豬藍耳病毒基因擴增結(jié)果PRRSV ORF5 RT-PCR 產(chǎn)物 1-PRRSV ORF5 RT-PCR 產(chǎn)物 2-陽性對照M-4500bp的Mark

根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化和實驗室診斷,確診該豬場發(fā)生的疫病為豬藍耳病。

6 防治措施

(1)對豬舍和用具用氯制劑、甲醛等消毒劑進行徹底消毒,及時清理病死豬、死胎及胎衣,清除豬舍內(nèi)外廢棄物。(2)對發(fā)病豬立即隔離,果斷淘汰無治療價值的病豬,做無害化處理,以預(yù)防和控制本病的蔓延。(3)對沒有臨床癥狀的豬采用藍耳病活疫苗進行緊急免疫,根據(jù)豬只大小,分別使用不同劑量。免疫結(jié)果表明該疫苗免疫效果好,保護率高。(4)對處于發(fā)熱期的病豬肌肉注射退熱藥,同時應(yīng)用抗菌消炎、抗病毒藥物,并結(jié)合補液胃管投藥等多種治療方法。

[1] 殷震, 劉景華. 動物病毒學(xué)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1997.

[2] 金光明, 楊倩. 豬繁殖與呼吸綜合癥免疫學(xué)研究進展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2003, 31(l): 111-114, 116.

[3] Spilman M S, Welbon C, Nelson E, et al. Cryoelectrontomography of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: organization of the nucleocapsid[J]. J Gen Virol, 2009, 90(3): 527-535.

[4]Mengeling W L,Lager K M, Vorwald A C. The effect of porcine parvovirus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus on porcine reproductive performance[J]. Animal Reproduction Science,2000,(60-61):199-210.

[5] Keffabern K K. Reproductive failure of unkown etiology[J].Am Asso SWine Pract Neuwsletter,1989,l(2): 1-9.

[6] 高云英, 賀玉勝, 劉秀琴等. 豬繁殖呼吸道綜合癥研究進展[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2002, 37(6): 139-144.

[7] 陳希文, 尹苗, 程安春. 豬繁殖與呼吸綜合癥免疫學(xué)研究進展[J].養(yǎng)豬, 2005(l): 29-33.

[8] 王珍芹, 曲志娜. 豬繁殖與呼吸道綜合癥免疫預(yù)防進展[J]. 中國動物檢疫, 2005(12): 49-50.

[9] 謝印乾, 沈志強, 王桂花等. 豬繁殖與呼吸綜合癥免疫學(xué)研究進展[J]. 動物醫(yī)學(xué)進展, 2006, 27(6): 6-10.

[10] 王國強, 文利新, 袁志航等. 豬藍耳病疫苗免疫及其免疫應(yīng)激研究進展[J]. 養(yǎng)豬, 2007(6): 41-44.

[11] 冉紅志, 趙寶, 朱永周等. 豬繁殖與呼吸障礙綜合征病原學(xué)及免疫學(xué)特征性研究進展[J]. 動物醫(yī)學(xué)進展, 2011, 32(6): 148-151.

[12] 孫凌志, 陳慶勛, 徐品等. 對河南南陽豬高致病性藍耳病的病例防制[J]. 獸醫(yī)臨床, 2007, 5.

[13] 李濤, 冉隆仲, 樂正中等. 貴州省野豬藍耳病病例報告[J]. 貴州畜牧獸醫(yī), 2008, 32(2): 14.

[14] 李繼東, 許立華, 王玲. 豬繁殖與呼吸障礙綜合征診斷方法與防治技術(shù)研究進展[J]. 寧夏農(nóng)學(xué)院學(xué)報. 2004, 25(3): 68-70,75.

[15] 靳明武, 張洋龍, 孫曉雨等. 豬藍耳病和傳染性胸膜肺炎混合感染的病例報告[J]. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報, 2012, 24(5): 32-35.

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