李濟(jì)金胡春華羅 潔

1.深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院金沙社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118；2.深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院沙田社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118；3.深圳市坪山新區(qū)人民醫(yī)院坪環(huán)社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118

糖尿病合并肺結(jié)核患者TNF-α、IFN-γ及IL-10的表達(dá)及意義

李濟(jì)金1胡春華2羅 潔3

1.深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院金沙社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118；2.深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院沙田社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118；3.深圳市坪山新區(qū)人民醫(yī)院坪環(huán)社區(qū)健康服務(wù)中心，廣東深圳 518118

目的 探討糖尿病合并肺結(jié)核患者的血清白細(xì)胞介素-10（IL-10）、γ干擾素（IFN-γ）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的變化及意義。 方法 隨機(jī)選取我院120例糖尿病合并肺結(jié)核患者為A組（根據(jù)病灶范圍分為A1組60例、A2組40例和A3組20例，根據(jù)影像診斷分為AⅠ組50例，AⅡ組70例），160例單純肺結(jié)核患者為B組(其中根據(jù)病灶范圍分為B1組80例、B2組45例和B3組35例，根據(jù)影像診斷分為BⅠ組65例，BⅡ組95例)；115例糖尿病患者為C組，120例正常健康對(duì)照者為D組。通過檢測(cè)血清中TNF-α、IFN-γ及IL-10 mRNA表達(dá)量，血清TNF-α、IFN-γ及IL-10蛋白含量，并比較分析。 結(jié)果 A組與B組患者血清TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量平均值均高于C組和D組，均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），并隨著病灶范圍增加TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量也同步增高，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中A組內(nèi)部各組分的患者TNF-α、IFN-γ及IL-10的的mRNA表達(dá)和蛋白含量增高均明顯高于B組內(nèi)部各組分的患者TNF-α、IFN-γ及IL-10的的mRNA表達(dá)和蛋白含量，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 肺結(jié)核患者外周血TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量存在著明顯差異，其中糖尿病合并肺結(jié)核患者變化更加顯著，TNF-α、IFN-γ及IL-10在糖尿病合并肺結(jié)核的發(fā)病和進(jìn)展中起著一定的作用。

結(jié)核；肺結(jié)核；糖尿病；白介素-10；γ干擾素；腫瘤壞死因子-α

近年來，世界各國(guó)結(jié)核病發(fā)病的發(fā)生呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，每年新發(fā)結(jié)核病患者約800～1000萬以上[1]；結(jié)核病與機(jī)體免疫水平密切相關(guān)，多種細(xì)胞炎癥因子參與結(jié)核病的免疫應(yīng)答與免疫發(fā)病過程，其中TNF-α、IFN-γ及IL-10是體內(nèi)免疫反應(yīng)中細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的重要組成部分，它們?cè)诮閷?dǎo)機(jī)體多種免疫反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用[2-3]；全球糖尿病患者約2.4億，是現(xiàn)在主要危害人類健康的非感染性慢性疾病，糖尿病患者為罹患肺結(jié)核的易感人群，糖尿病對(duì)肺結(jié)核的影響非常大，糖尿病的流行趨勢(shì)將對(duì)肺結(jié)核病的疫情及控制產(chǎn)生非常大的影響，糖尿病患者感染肺結(jié)核的發(fā)病率是其2～5倍[4]；這可能與糖尿病患者的Thl克隆細(xì)胞分泌細(xì)胞因子γ干擾素（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及Th2克隆細(xì)胞分泌細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-10（IL-10）和一氧化氮酶表達(dá)密切相關(guān)，限制了宿主對(duì)結(jié)核分枝桿菌的免疫反應(yīng)相關(guān)，越來越多的研究正在探索糖尿病合并肺結(jié)核患與細(xì)胞因子的關(guān)聯(lián)[5]；因此，本文擬探討糖尿病合并肺結(jié)核患者的血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的變化及意義。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我醫(yī)院自2010年1月～2013年10月住院的患者，其中隨機(jī)選擇120例糖尿病合并肺結(jié)核患者為A組，其中男85例，女35例，年齡30～82歲，平均56.4歲，患者在此次抗結(jié)核治療前空腹血糖均高于6.1mmol/L，其中6.1～10mmol/L 56例，高于10mmol/L 29例；臨床表現(xiàn)均有不同程度盜汗、咳嗽、咯血、發(fā)熱和咯痰癥狀，并且有不同程度的消瘦、多食、多尿和多飲等癥狀。A組根據(jù)患者病灶范圍大小，分別為60例1～2肺視野為A1組、40例3～4肺視野為A2組和20例5～6肺視野為A3組，A組患者根據(jù)影像（X線或CT診斷）分類診斷分為50例空洞型肺結(jié)核為AⅠ組，70例非空洞型肺結(jié)核為AⅡ組。同期隨機(jī)選擇160例單純肺結(jié)核為B組，其中男102例，女58例，年齡29～81歲，平均58.7歲；臨床表現(xiàn)均有不同程度盜汗、咳嗽、咯血、發(fā)熱和咯痰癥狀；B組根據(jù)病灶范圍分為80例1～2肺視野為B1組、45例3～4肺視野為B2組和35例5～6肺視野為B3組，B組患者根據(jù)影像（X光或CT診斷）分類診斷分為65例空洞型肺結(jié)核為BⅠ組，95例非空洞型肺結(jié)核為BⅡ組；同期隨機(jī)選擇115例糖尿病患者為C組，其中男75例，女40例，年齡28～82歲，平均56.3歲，患者空腹血糖均高于6.1mmol/L，其中6.1～10mmol/L 74例，高于10mmol/L 41例，臨床表現(xiàn)不同程度的消瘦、多食、多尿和多飲等癥狀。同期隨機(jī)選擇120例正常健康對(duì)照者為D組，均為健康志愿者，其中男65例，女55例，年齡28～80歲，平均56.8歲。以上各組肺結(jié)核患者均符合2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核分會(huì)制定的《肺結(jié)核診斷和治療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；所有糖尿病病例均根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷[7]；均排除慢阻肺、支氣管哮喘等其他呼吸系統(tǒng)疾病，心力衰竭以及嚴(yán)重肝腎功能不全，其年齡性別構(gòu)成均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療 肺結(jié)核患者均采用肺結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)化療方案如異煙肼、吡嗪酰胺、利福平、左氧氟沙星、鏈霉素、利福噴丁、乙胺丁醇、力克肺疾、對(duì)氨基水揚(yáng)酸鈉和丙硫異煙胺等組成正規(guī)治療以及抗感染支持和對(duì)癥治療，在治療中均全程加用護(hù)肝藥，療程均在6～24個(gè)月。糖尿病患者均采用糖尿病標(biāo)準(zhǔn)治療方案如格列本脲、二甲雙胍、服阿卡波糖、α-葡萄糖苷酶抑制劑、甘精胰島素和胰島素促泌劑組成正規(guī)治療，同時(shí)給予其他對(duì)癥治療、營(yíng)養(yǎng)支持治療，及時(shí)處理藥物不良反應(yīng)。

1.2.2細(xì)胞因子檢測(cè) 所有肺結(jié)核患者在入院后治療前第2天清晨空腹抽取靜脈血5mL，在化療6個(gè)月后清晨空腹抽取靜脈血5mL。所選同期隨機(jī)選擇C組（115例糖尿病患者）和D組（120例正常健康對(duì)照者）均在當(dāng)天早晨空腹取靜脈血5mL；分別置37℃水浴箱靜置30min，經(jīng)3000r/min離心15min，抽取上清血清置于-20℃冰箱備檢；采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定血清TNF-α、IFN-γ及IL-10蛋白含量情況，全自動(dòng)酶免分析儀為意大利希亞克BRIO全自動(dòng)酶標(biāo)免疫分析系統(tǒng)，試劑盒來自北京邦定生物制品公司；RT-PCR定量PCR儀7900（美國(guó)，ABI），PCR擴(kuò)增試劑盒（大連寶生物公司）；具體檢測(cè)操作步驟依據(jù)試劑盒提供的說明書進(jìn)行。

1.3RT-PCR檢測(cè)

PCR反 應(yīng) 先TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA為目的基因逆轉(zhuǎn)錄生成的cDNA為模板，在目的基因的特異性引物和Taq DNA聚合酶的作用下，以β-actin為內(nèi)參照，擴(kuò)增目的基因的特定片段。計(jì)算各試劑所需總量，分裝后分別加入目的基因和參照β-actin的上下游引物，將RT-PCR擴(kuò)增TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA當(dāng)量與β-actin的當(dāng)量做對(duì)比（簡(jiǎn)稱比值即TNF-α、IFN-γ及IL-10/β-actin），計(jì)算各目的基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量，對(duì)基因表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行定量分析。

表1　各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量比較情況

表1　各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量比較情況

組別n　IL-10　IFN-γ　TNF-α ng/L　　比值　ng/L　　比值　ng/L　　比值A(chǔ)組　120　194.3±24.8　1.98±0.31　378.9±30.2　2.87±0.56　286.3±21.4　1.56±0.31 B組　160　86.6±20.7　1.41±0.28　269.8±28.6　1.57±0.44　167.4±15.8　0.82±0.18 C組　115　8.7±1.3　0.83±0.21　226.7±25.4　0.93±0.26　89.6±12.4　0.45±0.12 D組　120　4.5±0.6　0.51±0.14　194.4±24.6　0.75±0.24　70.5±10.3　0.27±0.09 F 29.82　31.75　32.53　44.45　32.79　31. 63 P＜0.05　?。?.05　　＜0.05　?。?.05　　＜0.05　?。?.05

表2　A與B各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量比較情況

表2　A與B各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量比較情況

組別　n　IL-10　IFN-γ　TNF-α ng/l　　比值　ng/l　　比值　ng/l　　比值A(chǔ) 組　A1　60　181.5±16.1　1.21±0.24　351.2±27.9　2.41±0.31　274.3±15.8　1.25±0.24 A2　40　236.1±24.3　2.13±0.47　372.4±28.7　2.78±0.54　303.1±20.2　1.25±0.24 A3　20　282.3±27.2　2.61±0.51　412.4±32.5　3.35±0.95　335.2±25.2　1.96±0.51 AⅠ　50　254.5±26.9　2.44±0.44　396.3±31.4　3.14±0.84　325.3±23.1　1.87±0.45 AⅡ　70　195.2±18.3　1.55±0.27　376.1±28.5　2.63±0.48　298.3±19.5　1.48±0.29 B組　B 1　80　74.8±17.3　0.78±0.23　241.4±24.6　1.28±0.26　146.3±10.6　0.61±0.23 B 2　45　87.4±21.2　1.23±0.34　253.4±28.6　1.46±0.36　154.7±11.2　0.78±0.22 B 3　35　113.6±23.2　1.79±0.42　312.5±31.2　2.06±0.67　182.6±18.1　1.08±0.31 BⅠ　65　106.7±22.4　1.68±0.36　284.3±30.4　1.86±0.56　176.3±17.6　1.02±0.35 BⅡ　95　80.1±18.5　0.98±0.28　255.1±29.2　1.41±0.38　156.9±14.6　0.71±0.26 F 43.65　46.41　36.76　44.83　35.67　45.97 P＜0.05　?。?.05　?。?.05　　＜0.05　?。?.05　?。?.05

1.4檢測(cè)結(jié)果比較分析

由放射、臨床和檢驗(yàn)醫(yī)生組成診療小組對(duì)患者血清TNF-α、IFN-γ及IL-10蛋白含量結(jié)果和TNF-α、IFN-γ及IL-10 mRNA表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比分析。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以表示，比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量比較情況

A組與B組患者血清TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量平均值均高于C組和D組，均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果見表1。

2.2A與B各組血清IL-10、IFN-γ及TNF-α的mRNA表達(dá)和蛋白含量

A與B各組隨著病灶范圍增加TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量也同步增高，均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A組內(nèi)部各組分（A1組、A2組和A3組）和（AⅠ組和AⅡ組）的患者TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量增高均明顯高于B組內(nèi)部各組分（B1組、B2組和B3組）和（BⅠ組和BⅡ組）的患者TNF-α、IFN-γ及IL-10的水平，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3　討論

結(jié)核病由單一因素結(jié)核桿菌引起的臨床上常見慢性傳染性疾病之一，所致感染性疾病中死亡率最高的疾病，它可累及全身多個(gè)臟器，其中，肺結(jié)核疫情的蔓延非常嚴(yán)重，發(fā)病人數(shù)呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，肺結(jié)核約占結(jié)核患者的80%[8]，這是因?yàn)椋海?）有的結(jié)核病患者來自經(jīng)濟(jì)較落后地區(qū)，他們的衛(wèi)生習(xí)慣普遍較差，防病意識(shí)非常薄弱及缺乏，因此他們患肺結(jié)核的機(jī)率相對(duì)較大。有些結(jié)核病患者為省錢在早期癥狀不明顯時(shí)便不去就診，結(jié)核病傳染源得不到及時(shí)控制和治療，造成肺結(jié)核區(qū)域性傳播。（2）外出進(jìn)城務(wù)工的男青年較多，他們的社會(huì)活動(dòng)頻繁，經(jīng)常暴飲暴食，從事勞動(dòng)強(qiáng)度大的工作，住宿和飲食條件差，作息規(guī)律性差，身體抵抗力差，容易感染肺結(jié)核。（3）老年人的各項(xiàng)身體機(jī)能逐漸退化，免疫系統(tǒng)低下，抵抗力低下，這是老年期肺結(jié)核高發(fā)的主要原因[9]。

糖尿病是一種常見的內(nèi)分泌代謝慢性消耗性疾病，主要是胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足所致，以高血糖為其主要病理標(biāo)志，在正常情況下的血糖濃度維持在3.9～6.1mmol/L的范圍內(nèi)，是人體內(nèi)能量主要來源，而多余的血糖通過生物合成轉(zhuǎn)變成肝糖原、脂肪和蛋白質(zhì)儲(chǔ)存起來，避免血糖濃度過高損害機(jī)體。由于糖尿病患者胰島素的絕對(duì)或(和)相對(duì)不足，機(jī)體組織不能有效攝取利用血糖，不僅造成血漿糖濃度升高，而且使組織細(xì)胞內(nèi)三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（糖原、脂肪和蛋白質(zhì)）通過糖原異生作用轉(zhuǎn)化為血糖，使它們的消耗增加，以滿足機(jī)體能量的需求，從而造成機(jī)體代謝的紊亂[10]。肺結(jié)核合并糖尿病臨床上非常常見，這兩種病并發(fā)關(guān)系密切，并且在病因、臨床表現(xiàn)、治療和預(yù)后等方面緊密相聯(lián)。糖尿病患者是結(jié)核桿菌的易感者：糖尿病患者蛋白質(zhì)不僅合成減少，而且分解消耗加速，導(dǎo)致免疫球蛋白分泌進(jìn)行性減少，補(bǔ)體生成水平下降，機(jī)體免疫功能進(jìn)行性降低；糖尿病患者肝臟轉(zhuǎn)化維生素A能力降低，使體內(nèi)維生素A比較缺乏，使呼吸道黏膜上皮非法特性抵抗力下降，使患者易感染結(jié)核菌易造成肺結(jié)核，且長(zhǎng)期性慢性高血糖使脂肪代謝紊亂及甘油類產(chǎn)物增加，為結(jié)核桿菌的生長(zhǎng)提供了豐富的物質(zhì)能源，促進(jìn)結(jié)核桿菌的快速生長(zhǎng)與繁殖。結(jié)核病可使糖尿病患者對(duì)碳水化合物反應(yīng)性發(fā)生改變，使胰島素受體功能下降，導(dǎo)致胰島素抵抗或者胰島素內(nèi)分泌功能降低，易導(dǎo)致代謝綜合征和高血糖。此外，某些抗結(jié)核藥物如異煙肼可干擾機(jī)體糖類代謝，并且引起肝、腎功能損害，加重糖類代謝紊亂，而糖尿病對(duì)結(jié)核病的影響大于結(jié)核病對(duì)糖尿病的影響[11]。IFN-γ是一種調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能的重要多肽免疫小分子，也稱免疫干擾素，它除能直接抑制腫瘤細(xì)胞外，還是調(diào)節(jié)Th0細(xì)胞向Th1極化重要的細(xì)胞因子，可活化效應(yīng)細(xì)胞和細(xì)胞毒性TC細(xì)胞，且抑制Th2應(yīng)答[12]。TNF-α是由單核-巨噬細(xì)胞分泌的多肽類激素，是體內(nèi)具有多種生物活性的細(xì)胞因子，是機(jī)體炎癥反應(yīng)免疫應(yīng)答的重要調(diào)節(jié)因子，也是迄今為止發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子，在研究中發(fā)現(xiàn)[13]，TNF-α的細(xì)胞毒性與IFN-γ具有協(xié)同作用，能介導(dǎo)特定轉(zhuǎn)化細(xì)胞的細(xì)胞溶解凋亡和白細(xì)胞浸入郁積。IL-10是Th2細(xì)胞分泌并抑制Thl細(xì)胞功能的抑制性淋巴因子，是一種免疫抑制因子，有很強(qiáng)的抗炎作用，是重要抗炎因子，可抑制單核/巨噬細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞合成的炎性因子[14]。

從表1研究結(jié)果表明，肺結(jié)核患者血清TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量平均值均高于糖尿病患者和正常健康者，這是因?yàn)椋海?）IL-10是抑制炎癥反應(yīng)類細(xì)胞因子，能夠降低Th1類的CD4+和CD8+T細(xì)胞的活性，抑制巨噬細(xì)胞的刺激因子的表達(dá)，肺結(jié)核患者是慢性傳染性疾病，在其慢性病程中，IL-10能夠抑制Th1類細(xì)胞介導(dǎo)的相關(guān)免疫應(yīng)答，抑制結(jié)核分枝桿菌感染所引起的免疫反應(yīng)，對(duì)結(jié)核分枝桿菌所引起的免疫反應(yīng)起到保護(hù)作用，促進(jìn)肺結(jié)核疾病的發(fā)展，具有負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用，一定程度上保護(hù)肺組織及肺泡細(xì)胞。（2）TNF-α和IFN-γ由Th1細(xì)胞分泌，促進(jìn)CD4+T細(xì)胞和CTL細(xì)胞聚集于病變部位參與機(jī)體的炎癥反應(yīng)和創(chuàng)傷愈合，可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)，并激活該類細(xì)胞，從而導(dǎo)致機(jī)體局部的炎癥反應(yīng)并使他們發(fā)揮殺菌作用，清除病原體，同時(shí)造成血肺屏障的破壞，使肺組織細(xì)胞損傷；研究發(fā)現(xiàn)[15]，小鼠在感染結(jié)核菌20d后，外周血中TNF-α和IFN-γ的水平達(dá)到峰值。

從表2研究結(jié)果表明，糖尿病合并肺結(jié)核患者血清TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量平均值均高于肺結(jié)核患者，并與病灶量呈正比，這是因?yàn)椋海?）糖尿病合并肺結(jié)核患者，糖尿病是一種慢性終身性疾病，隨著病情的進(jìn)展常常伴發(fā)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成減少，使?fàn)I養(yǎng)不良，抵抗力下降，為結(jié)核菌的生長(zhǎng)繁殖提供了有力條件，結(jié)核病是慢性消耗性傳染疾病，肺結(jié)核引起的發(fā)熱、消耗和中毒癥狀使胰島細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良和萎縮，肺結(jié)核加重胰島細(xì)胞負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致胰腺內(nèi)分泌功能減退，糖代謝功能調(diào)節(jié)障礙，肺結(jié)核機(jī)體處于一種應(yīng)激狀態(tài)，使體內(nèi)胰高血糖素水平上升，加重糖尿病的病情，由于受到兩種疾病相互牽連的影響，互為因果，臨床病變嚴(yán)重而復(fù)雜，肺結(jié)核合并糖尿病，常形成惡性循環(huán)，治療依從性往往要更差[16]。（2）TNF-α是單核巨噬細(xì)胞及脂肪細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，可干擾周圍組織胰島素作用引起胰島素抵抗，TNF-α通過影響胰島素受體磷酸化和激酶活性、降低Glut-4的表達(dá)，拮抗胰島素激素如ACTH、糖皮質(zhì)激素、腎上腺素分泌增多等作用從而導(dǎo)致胰島素抵抗和高胰島素血癥，TNF-α活性增強(qiáng)可以促進(jìn)脂肪分解引起血漿游離脂肪酸水平增高，造成脂代謝紊亂[17]。糖尿病β-胰島細(xì)胞是通過Fas/ FasL途徑殺傷[18]，在IFN-γ和TNF-α作用下，F(xiàn)as表達(dá)增加，同時(shí)對(duì)sFasL和anti-Fas引起的凋亡也變得更加敏感，增加對(duì)β-胰島細(xì)胞破壞。（3）糖尿病患者的TH1/TH2型細(xì)胞因子失衡是導(dǎo)致機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌易感及免疫應(yīng)答延遲，不易清除結(jié)核桿菌的主要原因，Th1類的IFN-γ和TNF-a與Th2類的IL-10共同參糖尿病合并肺結(jié)核的起病，當(dāng)機(jī)體感染結(jié)核分支桿菌后，在結(jié)核分枝桿菌侵襲下，機(jī)體內(nèi)結(jié)核性炎癥反應(yīng)強(qiáng)烈，大量的促炎因子如IFN-γ和TNF-α等產(chǎn)生，血清中IFN-γ和TNF-α水平顯著升高，肺結(jié)核患者肺部炎癥反應(yīng)較為強(qiáng)烈。肺組織可遭到破壞等，而此時(shí)IL-10等抑炎因子也大量產(chǎn)生。IL-10能增加精氨酸酶-1的活性使氮中間體明顯減少，從總體上抑制了巨噬細(xì)胞及TC細(xì)胞功能，并且抑制IFN-γ和TNF-α的產(chǎn)生，IL-10高表達(dá)使結(jié)核桿菌逃離宿主的免疫監(jiān)視，使慢性結(jié)核分支桿菌感染者的肺組織內(nèi)菌體大量生殖復(fù)制。

綜上所述，肺結(jié)核患者外周血TNF-α、IFN-γ及IL-10的mRNA表達(dá)和蛋白含量存在著明顯差異，其中糖尿病合并肺結(jié)核患者變化更加顯著，糖尿病合并肺結(jié)核患者的 Th1類的IFN-γ和TNF-α與Th2類的IL-10的高表達(dá)，表明了糖尿病在肺結(jié)核發(fā)病過程中使TH1/TH2型細(xì)胞因子失衡，將導(dǎo)致機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝抗菌防御能力減弱，TNF-α、IFN-γ及IL-10可能在糖尿病合并肺結(jié)核的發(fā)病和進(jìn)展中起著一定的作用。

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Expression and significance of TNF-α,IFN-γ and IL-10 in patients of diabetes complicated with tuberculosis

LI Jijin1HU Chunhua2LUO Jie3
1.Jinsha Community Health Service Center of Pingshan New District Maternal and Child Health Hospital, Shenzhen 518118,China;2.Jinsha Community Health Service Center of Pingshan New District Maternal and Child Health Hospital,Shenzhen 518118，China;3.Pinghuan Community Health Service Center of Pingshan New District People's Hospital,Shenzhen 518118,China.

Objective To explore the change of interleukin-10 (IL-10),interferon γ(IFN-γ) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in patients of diabetes complicated with tuberculosis and its significance. Methods 120 diabetic patients with tuberculosis in our hospital were randomly selected for group A (60 patients in group A1,40 patients in group A2 and 20 patients in the group A3 according to area of lesion.And 50 patients in group AⅠ,70 patients in group AⅡ according to imaging diagnosis).160 patients with only tuberculosis were for group B (80 patients in group B1,45 patients in group B2 and 35 patients in group B3 according to area of lesion.And 65 patients in group BⅠ ,95 patients in group BⅡ according to imaging diagnosis).115 diabetic patients in group C,and 120 healthy people in group D.The mRNA expression quantities and protein levels of TNF-α,IFN-γ and IL-10 in serum of patients in each group were detected and compared. Results The average mRNA expression quantities and protein levels of TNF-α,IFN-γ and IL-10 in serum of patients in group A and B were both higher than that in group C and D with obvious statistical significant (P＜0.05),and increased with the expansion of the area of lesion,which showed significant difference (P＜0.05).The increase of mRNA expression quantities and protein levels of TNF-α,IFN-γ and IL-10 in serum of patients in group A was significantly higher than that in the group B (P＜ 0.05). Conclusion The mRNA expression quantities and protein levels of TNF-α,IFN-γ and IL-10 in serum of patients with tuberculosis have obvious difference,which of patients of diabetes complicated with tuberculosis has more significant change.TNF-α,IFN-γ and IL-10 play roles in the morbidity and progression of diabetes complicated with tuberculosis.

Tuberculosis;Pulmonary tuberculosis;Diabetes;IL-10;IFN-γ;TNF-α

R521；R587.1

A

2095-0616（2015）10-23-05

（2015-01-29）