李淑平??

【摘要】目的：對(duì)陰道細(xì)菌多種檢驗(yàn)方法進(jìn)行比較。方法：對(duì)147例初步確診為細(xì)菌性陰道炎的患者分別采用細(xì)菌培養(yǎng)法、革蘭染色、PCR檢測(cè)法等三種方法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢驗(yàn)，觀察三種方法的陰道細(xì)菌檢出情況。結(jié)果：該三種檢驗(yàn)方法所對(duì)應(yīng)的檢出率分別為776%、367%、728%。結(jié)論：建議醫(yī)院在進(jìn)行陰道細(xì)菌的檢驗(yàn)方面，應(yīng)結(jié)合自身實(shí)際條件，靈活選用細(xì)菌培養(yǎng)法或PCR檢驗(yàn)法。

【關(guān)鍵詞】陰道細(xì)菌；細(xì)菌培養(yǎng)法；PCR檢驗(yàn)法

【中圖分類號(hào)】R4465【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2015）01-0110-01

細(xì)菌性陰道疾病為成年女性中常見(jiàn)的婦科疾病之一，其長(zhǎng)期以來(lái)一直都對(duì)女性的身體健康產(chǎn)生著不同程度的影響。如何快速而準(zhǔn)確地對(duì)陰道細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)向來(lái)是婦科醫(yī)療工作者關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。筆者于近期針對(duì)本科收治的女性患者分別采用不同方法進(jìn)行檢驗(yàn)，旨在比較分析出更具臨床應(yīng)用價(jià)值的檢驗(yàn)方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

11一般資料選擇我院婦科門診于2013年9月至2014年2月期間收治的147例初步確診為細(xì)菌性陰道炎的患者作為研究對(duì)象，所有患者均知情同意，同時(shí)均排除正處于月經(jīng)期或妊娠期者、近2日內(nèi)有過(guò)性生活者以及近期有陰道局部用藥者。年齡18～57歲，平均（327±98）歲；細(xì)菌性陰道炎病程2個(gè)月至3年，平均病程（103±64）個(gè)月；已婚96例，未婚51例；有性生活史者114例，占到總體入選病例的775%。將147例患者按門診就診順序隨機(jī)分為A、B、C三組，分組后組間兩兩比較，三組患者年齡、病程、婚姻狀況、性生活史等一般資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005），具可比性。

12方法

121陰道分泌物采集用醫(yī)用棉簽插入患者陰道內(nèi)，輕輕旋轉(zhuǎn)以沾取陰道分泌物，之后再將棉簽置于裝有2ml生理鹽水的試管中待檢。

121A組檢驗(yàn)方法采用細(xì)菌培養(yǎng)法，具體方法為：將生理鹽水中的樣本在無(wú)菌條件下接種到專用細(xì)菌分離的培養(yǎng)基，在35℃條件下二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，最后選擇其中呈半透明、灰色、光滑的水滴形狀菌落按生化標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生化檢驗(yàn)即可。

122B組檢驗(yàn)方法采用革蘭染色法，具體方法為：將無(wú)破損的清潔玻片在95%乙醇中浸泡一定時(shí)間后取出晾干備用，接著攝取樣本進(jìn)行涂片，進(jìn)行革蘭染色后再進(jìn)行顯微鏡檢。

123C組檢驗(yàn)方法采用PCR檢測(cè)法，具體方法為：將500μl陰道分泌物放置于生理鹽水中進(jìn)行離心處理10min，轉(zhuǎn)速為12000r/min，去除上清液，加入適量裂解液并在98℃條件下加熱10min，離心5min，轉(zhuǎn)速同前。取上清液制成DNA模板。在采用PCR檢測(cè)細(xì)菌陽(yáng)性或陰性比較中，尤其是在陰道分泌物DNA制作的時(shí)候需注意：應(yīng)使用相同的PCR試劑，同時(shí)將其中一個(gè)未添加DNA的作為陰性組，添加有DNA模板的PCR擴(kuò)增為陽(yáng)性組，再對(duì)陽(yáng)性組與陰性組進(jìn)行對(duì)比分析，檢查PCR產(chǎn)物及其擴(kuò)增情況。取25μl的緩沖液、引物、模板、無(wú)菌離子水，采用無(wú)菌的30μl石蠟油覆蓋在上面，進(jìn)入PCR循環(huán)階段，共循環(huán)32個(gè)循環(huán)。

13統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本研究所得數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 170統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較行χ2檢驗(yàn)，以P<005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3討論

雖然細(xì)菌培養(yǎng)向來(lái)被認(rèn)為是臨床檢驗(yàn)與診斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但因其檢驗(yàn)過(guò)程比較復(fù)雜，同時(shí)也相對(duì)更為費(fèi)力，尤其在基層醫(yī)院還比較難以開(kāi)展。而革蘭染色法因其簡(jiǎn)單易行，已經(jīng)在臨床上得到廣泛應(yīng)用，以至于在陰道細(xì)菌的檢驗(yàn)方面，曾有不少學(xué)者認(rèn)為應(yīng)將其作為檢驗(yàn)首選方法。然而，該方法由于難免受到多種因素的影響，在具體的檢驗(yàn)過(guò)程中往往易發(fā)生較大的誤差，比如染色過(guò)程中出現(xiàn)脫色不當(dāng)?shù)取Ｒ悦撋^(guò)度為例，一旦發(fā)生此種情況，勢(shì)必將導(dǎo)致在顯微鏡檢的時(shí)候會(huì)誤將革蘭陽(yáng)性細(xì)菌辨識(shí)為革蘭陰性菌。PCR檢驗(yàn)法是融合了光譜技術(shù)的精確定量、DNA雜交的特異性以及其敏感性，在對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢驗(yàn)過(guò)程中，與細(xì)菌培養(yǎng)法比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005），但陽(yáng)性檢出率顯著高于革蘭染色法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<005）。綜上所述，醫(yī)院在進(jìn)行陰道細(xì)菌的檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)結(jié)合自身實(shí)際條件，靈活選用細(xì)菌培養(yǎng)法或PCR檢驗(yàn)法。

參考文獻(xiàn)

[1] 彭碧華.不同臨床檢驗(yàn)方法在細(xì)菌性陰道病診斷中的比較分析[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2011，9（32）：14-15.

[2] 馬芹，劉克平，葉香.細(xì)菌性陰道病陰道分泌物的檢測(cè)方法及治療方案分析[J].中國(guó)婦幼保健，2008，23（18）：2543-2544.

（收稿日期：20140611）