韓崇濤等

【摘 要】 通過搜集近年來有關(guān)Ⅱ型膠原羧基端端肽特點(diǎn)及其與骨關(guān)節(jié)炎關(guān)系的研究文獻(xiàn)，分析總結(jié)其在骨關(guān)節(jié)炎病情進(jìn)展中的水平變化，探討關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)志物Ⅱ型膠原羧基端端肽在骨關(guān)節(jié)炎患者中的臨床意義。Ⅱ型膠原羧基端端肽與骨關(guān)節(jié)炎關(guān)系密切，對(duì)骨關(guān)節(jié)炎早期診斷與病情評(píng)估具有一定的參考意義。

【關(guān)鍵詞】 骨關(guān)節(jié)炎；Ⅱ型膠原羧基端端肽；診斷意義；綜述

doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.10.019

骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）是一種中老年多發(fā)的慢性進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)疾病，以關(guān)節(jié)軟骨退行性改變伴軟骨下骨硬化和繼發(fā)性骨質(zhì)增生為主要病變，表現(xiàn)為不同程度的關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、畸形等癥狀[1]。目前OA的臨床診斷以臨床表現(xiàn)及影像學(xué)特征為主，往往比較滯后，對(duì)病變?cè)缙谠\斷比較困難。隨著研究的深入，關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)志物Ⅱ型膠原羧基端端肽（C-terminal crosslinking telopeptide of typeⅡcollagen，CTX-Ⅱ）日益成為研究熱點(diǎn)，本文就其與OA的關(guān)系綜述如下。

1 CTX-Ⅱ概述與特點(diǎn)

關(guān)節(jié)軟骨是一種特定類型的結(jié)締組織，由1%的軟骨細(xì)胞和99%的軟骨基質(zhì)組成，無血管、神經(jīng)及淋巴組織分布。其中軟骨基質(zhì)由膠原蛋白、水分及蛋白聚糖合成，膠原成分主要是Ⅱ型膠原，是由三股α1鏈組成的螺旋結(jié)構(gòu)，每條α鏈兩端分別是氨基端肽和羧基端肽，正常狀態(tài)下膠原網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的合成與降解維持著平衡，在OA的病情進(jìn)展中，這種平衡被打破，降解代謝大于合成代謝，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨的損傷，作為Ⅱ型膠原的降解產(chǎn)物之一的CTX-Ⅱ，來源于其羧基末端，因而被稱為Ⅱ型膠原羧基端端肽[2]。CTX-Ⅱ最早是由Eyre等在研究牛軟骨過程中發(fā)現(xiàn)，可被組織蛋白酶裂解成小分子多肽，其中EKGPDP小肽來自CTX-Ⅱ的中間部分。CTX-Ⅱ是目前唯一能夠同時(shí)在關(guān)節(jié)滑液、血液及尿液中檢測到的軟骨代謝標(biāo)志物，且完全來自于成熟的非合成的Ⅱ型膠原，其樣品穩(wěn)定性及可靠性時(shí)間較長，在OA的臨床檢測中更有意義，故檢測關(guān)節(jié)液、血液或尿液中的EKGPDP小肽，可以作為了解CTX-Ⅱ水平的指標(biāo)，并有良好的穩(wěn)定性和可靠性，是綜合反映關(guān)節(jié)軟骨損傷累計(jì)程度的生物標(biāo)志物[3-5]。

2 CTX-Ⅱ水平的測定

目前CTX-Ⅱ的測定采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），查閱資料發(fā)現(xiàn)，女性O(shè)A患者尿液中CTX-Ⅱ的水平明顯高于男性患者[6]；有研究表明，雌激素可影響男女CTX-Ⅱ水平[7]；也有學(xué)者提出，男性、女性間關(guān)節(jié)CTX-Ⅱ水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）[8]。目前CTX-Ⅱ測定方法需要進(jìn)一步研究。

3 CTX-Ⅱ與OA的關(guān)系

3.1 CTX-Ⅱ與OA關(guān)節(jié)軟骨及滑膜的關(guān)系 關(guān)于CTX-Ⅱ在軟骨損傷中的分子生物標(biāo)志作用，王麗華等[9]進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)采用T-2毒素造大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷模型，以透明軟骨的組織病理和超微結(jié)構(gòu)改變作為判斷軟骨損傷程度的依據(jù)，并用ELISA法檢測大鼠不同階段血清CTX-Ⅱ和脫氧吡啶啉（DPD）的水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組大鼠關(guān)節(jié)軟骨尤其是Ⅱ型膠原明顯損害；且實(shí)驗(yàn)組大鼠血清CTX-Ⅱ水平在3個(gè)月時(shí)含量比對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；6個(gè)月時(shí)，雖然仍比對(duì)照組高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。得出血清CTX-Ⅱ?qū)﹃P(guān)節(jié)軟骨早期反應(yīng)敏感，可以作為關(guān)節(jié)軟骨損傷早期的生物標(biāo)志物的結(jié)論。Nielsen等[10]采用前交叉韌帶切除術(shù)法誘導(dǎo)建立OA模型，并檢測病變區(qū)軟骨蛋白提取液中CTX-Ⅱ的含量變化，發(fā)現(xiàn)CTX-Ⅱ在術(shù)后1，2，4周的水平與假手術(shù)組比較，明顯升高。Jung等[11]研究發(fā)現(xiàn)，OA患者尿液中的CTX-Ⅱ水平與正常人相比，顯著增高。李正南等[12]探討了膝關(guān)節(jié)液CTX-Ⅱ水平與滑膜炎程度之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)膝關(guān)節(jié)液中CTX-Ⅱ水平可作為關(guān)節(jié)軟骨損傷累積程度的生物標(biāo)記物，并且還可以反映關(guān)節(jié)滑膜炎程度，其水平升高提示滑膜炎嚴(yán)重。但呂嘉[8]研究結(jié)果顯示，關(guān)節(jié)液中CTX-Ⅱ濃度作為單獨(dú)指標(biāo)在不同關(guān)節(jié)軟骨損傷程度的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），與軟骨損傷程度無相關(guān)性（P > 0.05）。

這些研究提示，CTX-Ⅱ能夠在血液、局部關(guān)節(jié)液及尿液中檢測到，并且在反映骨、軟骨及滑膜代謝水平方面有一定的意義。

3.2 CTX-Ⅱ在OA早期診斷中的意義

3.2.1 診斷及病情監(jiān)測 任戈亮等[13]采用前交叉韌帶切除術(shù)誘導(dǎo)大鼠OA模型，研究血清CTX-Ⅱ在OA早期診斷及病情評(píng)估的意義，發(fā)現(xiàn)血清CTX-Ⅱ水平在未出現(xiàn)病理變化時(shí)就已經(jīng)開始升高，與病灶區(qū)軟骨中CTX-Ⅱ表達(dá)一致，可作為OA早期診斷和病情評(píng)估的參考指標(biāo)。劉淵[14]采用Kellgren和Lawrence法對(duì)70例符合標(biāo)準(zhǔn)的OA患者進(jìn)行放射學(xué)病情分級(jí)，研究發(fā)現(xiàn)，在Ⅰ級(jí)、Ⅳ級(jí)患者血清CTX-Ⅱ水平與Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)患者水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），在OA早期上升不顯著，關(guān)節(jié)狹窄時(shí)水平最高，隨著關(guān)節(jié)間隙的進(jìn)一步狹窄其水平又有所下降，并且CTX-Ⅱ與OA病變相關(guān)性最高，呈正相關(guān)（r = 0.923）。得出結(jié)論，血清CTX-Ⅱ水平是反映軟骨代謝的特異性指標(biāo)，可以反映OA病情、證型等變化。還有研究顯示，關(guān)節(jié)滑液中CTX-Ⅱ在OA早期還未顯示放射學(xué)改變時(shí)就顯著升高，水平高達(dá)正常對(duì)照組的2倍[15]。

3.2.2 藥物療效監(jiān)測 由于影像學(xué)表現(xiàn)在OA的診斷中比較滯后，因此在監(jiān)測治療OA的藥物療效方面，OA生物標(biāo)志物可以較早地反映出效果。有研究發(fā)現(xiàn)，口服硫酸氨基葡萄糖12個(gè)月的OA患者，CTX-Ⅱ水平明顯下降，表明氨基葡萄糖對(duì)軟骨高代謝具有抑制作用[16]。

4 生物標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用

雖然目前有研究證實(shí)CTX-Ⅱ可用于OA的早期診斷中，但是單一檢測還是聯(lián)合其他標(biāo)志物檢測，尚存在爭議。于偉光等[17]實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上，聯(lián)合CTX-Ⅱ、基質(zhì)金屬蛋白酶-3、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1進(jìn)行檢測，對(duì)OA早期診斷更充分靈敏；血清CTX-Ⅱ在診斷早期OA方面缺乏靈敏性。劉淵[14]研究發(fā)現(xiàn)，CTX-Ⅱ聯(lián)合軟骨寡基質(zhì)蛋白（COMP）能大大提高OA診斷的準(zhǔn)確性，在膝OA的發(fā)病機(jī)制中具有重要的作用。

5 結(jié)語與展望

綜上所述，CTX-Ⅱ在反映關(guān)節(jié)軟骨的損傷、OA的早期診斷及病情監(jiān)測、監(jiān)測藥物療效方面表現(xiàn)出日益明顯的優(yōu)勢。雖然有研究顯示其敏感性不高，在單一檢測還是聯(lián)合其他軟骨生物標(biāo)志物檢測還存在爭議，而且關(guān)于聯(lián)合標(biāo)志物檢測的研究存在不一致，主要體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)選擇的標(biāo)志物和數(shù)量不一致，缺乏最優(yōu)聯(lián)合。在檢測方面，CTX-Ⅱ的水平受性別、年齡、樣品離心前的存放時(shí)間及溫度、體重及藥物等方面的影響，在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，需要考慮這些影響因素。以上這些因素都會(huì)影響檢測的準(zhǔn)確性，相信隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，CTX-Ⅱ的研究會(huì)有所突破，尋找到特異性和靈敏性兼有的生物標(biāo)記物，從而為OA的早期診斷和治療提供依據(jù)。

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收稿日期：2015-06-03；修回日期：2015-07-06