許建梅等

摘要：目的 觀察復(fù)方中藥組分（黃連生物堿40%、三七總皂苷35%、麥冬多糖25%）對(duì)糖尿病大鼠血糖、果糖胺及胰島素水平的影響，并探討其作用機(jī)制。方法 隨機(jī)抽取10只大鼠作為空白組，其余大鼠采用鏈脲佐菌素腹腔注射制作大鼠糖尿病模型。成模大鼠隨機(jī)分為中藥高、中、低劑量組和二甲雙胍組、模型組，每組10只。各給藥組每日給予相應(yīng)藥物灌胃，連續(xù)4周。斷頭采血及尾靜脈采血，葡萄糖氧化酶法檢測(cè)空腹血糖（FBG），放射免疫雙抗法檢測(cè)胰島素水平，果糖胺法檢測(cè)果糖胺含量。結(jié)果 與空白組比較，4周后模型組FBG含量和果糖胺含量明顯升高、胰島素含量明顯降低（P<0.01）；與模型組比較，給藥4周后中藥中、高劑量組和二甲雙胍組FBG和果糖胺含量降低、胰島素水平升高（P<0.05）。結(jié)論 復(fù)方中藥組分可能通過降低糖尿病大鼠FBG、果糖胺含量，提高其基礎(chǔ)胰島素水平。

關(guān)鍵詞：中藥組分；糖尿病；空腹血糖；果糖胺；基礎(chǔ)胰島素；大鼠

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.08.018

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2015）08-0067-03

Effects of Chinese Herbal Compounds on Levels of Blood Glucose， Froctosamine and Insulin of Diabetic Rats XU Jian-mei1， SONG Qian2， JIN Bing2， SUN Qi-wei2， GAO Pu2 （1.Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029， China；2.Xiyuan Hospital of China Academy of Chinese Medicine Sciences， Beijing 100091， China）

Abstracts：Objective To observe the effects of Chinese herbal compounds （alkaloid of Coptidis Rhizoma 40%， total saponin of panax notoginseng 35%， and polysaccharide of Ophiopogonis Radix 25%） on levels of blood glucose， fructosamine， and insulin of diabetic rats， and explore mechanism of action. Methods Ten rats were randomly chosen as blank control group， and other rats were used to establish diabetic rat models by STZ intraperitoneal injection. Successfully molding rats were randomly divided into Chinese herbal compounds high， medium， low dose groups， metformin group， and model group， 10 rats in each group. Each rat received gavage for continuous 4 weeks. Then rat blood was collected by cutting head and taking caudal vein. FBG was detected by glucose oxidase method；insulin level was detected by radio-immunity double antibody method；fructosamine content was detected by fructosamine method. Results Compared with the blank control group， model group the levels of FBG， froctosamine content increased， while fasting insulin level were lower after 4 weeksmedication. Compared with the model group， the levels of FBG， froctosamine content in Chinese herbal compounds high and medium dose groups and metformin group were lower， while fasting insulin level increased after 4 weeksmedication （P<0.05）. Conclusion TCM herbal compounds can increased the basic insulin level by decreasing the contents of FBG and fructosamine.

Key words：Chinese herbal compounds；diabetes；FBG；fructosamine；basic insulin；rats

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81173617）；中國(guó)博士后科學(xué)基金面上項(xiàng)目（2014M551000）

糖尿病是由于胰島素絕對(duì)或相對(duì)缺乏所致的高血糖狀態(tài)的代謝性疾病。近年來，糖尿病患病率快速增長(zhǎng)，給社會(huì)帶來巨大的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。中藥組分是一類理化性質(zhì)和藥理活性相似的成分按照一定比例有機(jī)組合形成的具有完整結(jié)構(gòu)和藥理活性的單位，成分明確，便于定量分析。本研究觀察復(fù)方中藥組分（麥冬多糖40%、黃連生物堿35%、三七總皂苷25%）對(duì)糖尿病模型大鼠血糖、果糖胺及血漿胰島素的影響，旨在探討其治療糖尿病的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)SD種系大鼠60只，雌雄各半，8周齡，體質(zhì)量190～210 g，遼寧省長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（遼）2009-0010。所有大鼠均予常規(guī)動(dòng)物飼料和水，飼料為繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料（遼寧省長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司）。

1.2 藥物

三七總皂苷，北京同仁堂制藥有限公司；麥冬多糖、黃連生物堿，北京阜康仁生物制藥科技有限公司；中藥組分配比為麥冬多糖40%、黃連生物堿35%、三七總皂苷25%；二甲雙胍片，山東博山制藥有限公司，批號(hào)20130812，用蒸餾水配制成所需濃度的藥液。

1.3 主要試劑與儀器

鏈脲佐菌素（STZ），Sigma公司；125I-胰島素放射免疫分析藥盒，北京原子高科核技術(shù)應(yīng)用股份有限公司；果糖胺測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所；三諾SXT-1快速血糖測(cè)試儀，長(zhǎng)沙三諾生物傳感技術(shù)有限公司。

1.4 造模、分組及給藥

參考文獻(xiàn)[1]方法，采用STZ腹腔注射制作大鼠糖尿病模型。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)取10只作為空白組，其余腹腔注射STZ 0.055 mg/g體質(zhì)量，1周后檢查空腹血糖（FBG），F(xiàn)BG≥11.1 mmol/L為造模成功。成模大鼠隨機(jī)分為模型組、二甲雙胍組和中藥高、中、低劑量組，每組10只、雌雄各半。中藥高、中、低劑量組每日馬給予復(fù)方中藥0.45、0.15、0.05 g/kg灌胃，二甲雙胍組每日給予二甲雙胍0.05 mg/kg灌胃，模型組和空白組每日給予等體積生理鹽水灌胃，給藥胃體積均為10 mL/kg。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)

分別于給藥前1 d及給藥4周后，取尾靜脈血，采用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)FBG，嚴(yán)格按照試劑盒說明書檢測(cè)。給藥4周后斷頭處死采血，采用放射免疫雙抗法檢測(cè)胰島素水平，采用果糖胺法檢測(cè)果糖胺，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以—x±s表示，符合正態(tài)性和方差齊性的資料，采用方差分析，多重比較，兩組間比較采用LSD法，不符合則采用非參數(shù)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方中藥組分對(duì)大鼠空腹血糖含量的影響

與空白組比較，模型組給藥前、給藥4周后FBG含量明顯升高（P<0.01）；與模型組比較，中藥中、高劑量組和二甲雙胍組給藥4周后FBG含量明顯降低（P<0.05）。結(jié)果見表1。

2.2 復(fù)方中藥組分對(duì)大鼠血漿胰島素及果糖胺含量的影響

與空白組比較，模型組胰島素含量明顯降低、果糖胺含量明顯升高（P<0.01）；與模型組比較，中藥高、中劑量組和二甲雙胍組胰島素含量明顯升高、果糖胺含量明顯降低（P<0.05）。結(jié)果見表2。

3 討論

糖尿病患者血糖水平的監(jiān)測(cè)是一項(xiàng)長(zhǎng)期的任務(wù)，控制血糖觀測(cè)指標(biāo)有快速血糖、動(dòng)態(tài)血糖、糖化血紅蛋白、果糖胺等?？焖傺鞘亲詈?jiǎn)單的方式，其中FBG反映了機(jī)體在12 h未進(jìn)食情況下的血糖水平，可以直接反映血糖狀態(tài)，對(duì)隨時(shí)監(jiān)測(cè)血糖水平有一定的臨床意義，但穩(wěn)定性不夠強(qiáng)；動(dòng)態(tài)血糖監(jiān)測(cè)雖然精確、靈敏，但需要長(zhǎng)期背負(fù)監(jiān)測(cè)儀器，給生活帶來不便；糖化血紅蛋白可反映3個(gè)月左右的血糖整體水平，但測(cè)定較快速血糖及果糖胺繁瑣；而果糖胺是血漿中各種蛋白質(zhì)與葡萄糖非酶過程中形成的酮胺結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，受到生理因素的影響較FBG小，可以反映糖尿病患者2～3周總體血糖情況，可用于監(jiān)測(cè)近期患者血糖控制的指標(biāo)，穩(wěn)定性較FBG高。血糖水平控制得好，果糖胺水平下降較糖化血紅蛋白快，血糖水平較高時(shí)，果糖胺也較糖化血紅蛋白升高得快，可以彌補(bǔ)即刻血糖及糖化血紅蛋白的不足，故在臨床上是較常用的監(jiān)測(cè)血糖水平的指標(biāo)。胰島素是一種蛋白質(zhì)類生物激素，在生物體內(nèi)是由胰島β細(xì)胞分泌的，具有降低血糖、調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝的作用，糖尿病的發(fā)生正是由于胰島素的絕對(duì)或相對(duì)分泌不足引起血糖升高所致，血漿胰島素水平可以反映胰島β細(xì)胞的功能。故本研究中用FBG、果糖胺水平反映大鼠血糖水平，血漿胰島素水平反映糖尿病大鼠胰島細(xì)胞的分泌功能狀態(tài)。

本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的復(fù)方中藥組分由麥冬多糖、黃連生物堿、三七總皂苷組成，分別為麥冬、黃連、三七的主要有效成分之一。相比較而言，傳統(tǒng)中藥配伍成分復(fù)雜、作用靶點(diǎn)多、難定量分析，中藥組分配伍符合中醫(yī)特色與復(fù)方整體作用特點(diǎn)，且便于定量分析。如《本草正義》“麥冬寒潤(rùn)、補(bǔ)陰解渴用之藥”，黃連清熱燥濕、瀉火解毒，三七化瘀活血定痛，三者配伍與糖尿病陰虛為本、燥熱為標(biāo)，兼有血瘀的基本病機(jī)相吻合，符合滋陰清熱、活血化瘀的治療大法。現(xiàn)代研究表明，古代用于治療消渴的麥冬發(fā)揮著重要作用，如郭氏[2]對(duì)明清醫(yī)案用藥分析及郭氏等[3]對(duì)《中藥方劑大辭典精選本》分析發(fā)現(xiàn)，麥冬為治療消渴使用頻次最高的藥物。故本復(fù)方組分中用于滋陰的麥冬所占比例最高，麥冬多糖占40%，充分體現(xiàn)了該治療大法?，F(xiàn)代研究表明，單用麥冬多糖[4-5]、黃連生物堿[6-7]、三七總皂苷對(duì)糖尿病亦具有治療作用。既往研究顯示，通過降低糖尿病模型大鼠糖耐量水平、抑制非酶糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生、減輕血管炎癥反應(yīng)等來改善糖尿病微血管并發(fā)癥[8-9]。

本研究結(jié)果顯示，模型組FBG、果糖胺含量明顯高于空白組，胰島素含量明顯低于空白組，高糖狀態(tài)下基礎(chǔ)胰島素分泌量降低。中藥中、高劑量組和二甲雙胍組與模型組比較，給藥4周后FBG、果糖胺含量降低，胰島素含量升高，表明中藥組分可以降低糖尿病大鼠的FBG、果糖胺水平，升高胰島素水平，改善了胰島細(xì)胞的功能，從而起到對(duì)糖尿病大鼠的治療作用。二甲雙胍降低血糖的機(jī)制包括延緩胃腸道對(duì)血糖的吸收，增加胰島素的敏感性，增加外周葡萄糖的利用，抑制肝、腎過度糖異生來實(shí)現(xiàn)降糖的目的。本實(shí)驗(yàn)是在大鼠空腹12 h后采集標(biāo)本檢測(cè)，排除了腸道吸收血糖機(jī)制的影響，檢測(cè)胰島素的含量，考慮中藥組分降糖作用可能是通過改善胰島細(xì)胞功能，提高基礎(chǔ)胰島素的水平來實(shí)現(xiàn)，其中中藥高劑量組療效最佳，故建議選擇高劑量中藥組分用于糖尿病的治療。

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（收稿日期：2015-03-04；編輯：華強(qiáng)）