羅發(fā)維 余貴亮

膀胱癌的預(yù)后和環(huán)氧化酶-2的關(guān)系

羅發(fā)維 余貴亮

目的 探討膀胱癌的預(yù)后和環(huán)氧化酶-2的關(guān)系。方法 分析56例膀胱癌術(shù)后患者臨床資料, 通過(guò)免疫組化的方法對(duì)環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率進(jìn)行判定。結(jié)果 膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān), 膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)(P＜0.05)。結(jié)論 環(huán)氧化酶-2和膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后有著密切的聯(lián)系, 為指導(dǎo)臨床合理用藥提供了可靠的理論依據(jù)。

膀胱癌；預(yù)后；環(huán)氧化酶-2；關(guān)系

膀胱癌是泌尿外科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一, 其往往呈現(xiàn)多個(gè)中心、浸潤(rùn)性生長(zhǎng)的生物學(xué)特性［1］。其目前臨床診斷方式主要集中在尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查、膀胱鏡下檢查和活檢。有研究表明［2］, 手術(shù)切除膀胱癌灶或進(jìn)行膀胱部分切除術(shù)是常用的治療方法, 但仍有2/3患者出現(xiàn)復(fù)發(fā), 雖然術(shù)后通過(guò)化療藥物灌注可以在一定程度上改善預(yù)后, 防止復(fù)發(fā), 但是總體上很難降低膀胱癌復(fù)發(fā)率。因此, 有效的診斷膀胱癌和及早對(duì)膀胱癌預(yù)后水平進(jìn)行預(yù)警顯得尤為重要。本研究通過(guò)56例膀胱癌患者臨床資料進(jìn)行分析, 擬探討膀胱癌的預(yù)后和環(huán)氧化酶-2的關(guān)系, 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取兩院2008年9月～2015年1月收治的56例膀胱癌術(shù)后患者, 其中男36例, 女20例, 年齡42～73歲,平均年齡(54.6±10.8)歲, 組織病理學(xué)證實(shí)：移行上皮癌30例, 乳頭狀瘤20例, 膀胱鱗狀細(xì)胞癌6例。參照國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：T1期16例, T2期20例, T3期16例, T4期4例。腫瘤病灶情況：?jiǎn)伟l(fā)性病灶38例, 多發(fā)性病灶18例。

1.2 試劑和方法

1.2.1 試劑 采用美國(guó)Santa Cruz公司生產(chǎn)的山羊抗人/大鼠/小鼠環(huán)氧化酶-2多克隆抗體作為一抗, 封閉采用正常兔血清, 生物素標(biāo)記抗山羊免疫球蛋白G(IgG)作為二抗、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉卵白素, 二氨基聯(lián)苯胺顯色劑。

1.2.2 免疫組化染色 本組研究中通過(guò)磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。①石蠟切片厚度調(diào)整為4～5 μm, 通過(guò)二甲苯進(jìn)行脫蠟, 分別采用乙醇水化和3%雙氧水甲醇溶液將內(nèi)源性酶去除, 然后再用緩沖液進(jìn)行洗滌；②抗原修復(fù)：先在枸櫞酸抗原修復(fù)液進(jìn)行浸潤(rùn), 逐步的提高溫度, 溫度范圍在95～98℃, 處理20 min, 然后逐步的降到室溫；③通過(guò)磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗, 逐步加入正常兔血清封閉, 在室溫條件下孵育；④通過(guò)磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗, 然后將山羊抗人/大鼠/小鼠環(huán)氧化酶-2多克隆抗體作為一抗進(jìn)行滴加, 注意稀釋比例為1：50, 4℃放置12 h；⑤通過(guò)磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗, 然后滴加生物素標(biāo)記抗山羊IgG作為二抗, 在室溫下進(jìn)行孵育；⑥通過(guò)磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗, 然后再滴加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉卵白素, 在室溫下進(jìn)行孵育；⑦通過(guò)磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗, 加入二氨基聯(lián)苯胺進(jìn)行顯色, 然后再通過(guò)蘇木素進(jìn)行復(fù)染, 進(jìn)行脫水、透明和封片。

1.2.3 環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn) 環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性為胞質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒的陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn), 陽(yáng)性細(xì)胞依據(jù)比例情況進(jìn)行分組：(-)：陽(yáng)性細(xì)胞比例＜5%；(+)：陽(yáng)性細(xì)胞比例5%～29%；(++)：陽(yáng)性細(xì)胞比例30%～49%；(+++)：陽(yáng)性細(xì)胞比例≥50%。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 觀察膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性情況：低級(jí)別組主要是指高分化G1期, 高級(jí)別組主要是指低分化或者未分化期。

1.3.2 觀察膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性情況。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。膀胱癌患者預(yù)后和環(huán)氧化酶-2的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性 膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性 膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表1 膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性(n)

表2 膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2相關(guān)性(n)

3 討論

膀胱癌病例中90%以上屬于膀胱移行細(xì)胞癌, 其發(fā)病率和復(fù)發(fā)率均較高, 初次發(fā)病腫瘤中有80%屬于淺表性乳頭狀瘤, 單純進(jìn)行手術(shù)切除后復(fù)發(fā)率達(dá)到30%～70%, 隨著腫瘤復(fù)發(fā)和病理學(xué)分級(jí)的增高, 近1/3的腫瘤侵犯肌層, 逐步發(fā)展成浸潤(rùn)性癌或者轉(zhuǎn)移性癌, 因而膀胱癌的死亡率也隨之增高。探尋影響膀胱癌預(yù)后的預(yù)警指標(biāo), 對(duì)于有效的預(yù)防膀胱癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移顯得尤為重要。環(huán)氧化酶屬于一種限速酶, 其主要在前列腺合成的過(guò)程中發(fā)揮作用, 也被叫做前列腺內(nèi)過(guò)氧化物合酶, 其可以促進(jìn)花生四烯酸發(fā)生代謝, 進(jìn)而產(chǎn)生前列腺素E2、前列腺素H2, 從而影響機(jī)體的生理和病理學(xué)變化。環(huán)氧化酶可以分為環(huán)氧化酶-1和環(huán)氧化酶-2, 環(huán)氧化酶-2屬于誘導(dǎo)性酶, 其在正常的組織中表達(dá)很少甚至沒(méi)有表達(dá),但是在腫瘤的組織中呈現(xiàn)高表達(dá), 其可能促進(jìn)著腫瘤細(xì)胞增殖、抑制腫瘤細(xì)胞凋亡, 促進(jìn)新生血管成形, 從而在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要的作用。有資料顯示［3］, 環(huán)氧化酶-2表達(dá)和腫瘤的淋巴管的形成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)明顯的正相關(guān), 也就是說(shuō)其可能調(diào)控著淋巴管的生成。環(huán)氧化酶-2通過(guò)過(guò)氧化反應(yīng)促使環(huán)境和食物的不同前致癌物變?yōu)橹掳┪? 這一類的致癌物可以激活癌基因或者促進(jìn)P53等抑癌基因發(fā)生突變［4］。環(huán)氧化酶-2可以促進(jìn)前列腺素E2產(chǎn)生,其屬于免疫抑制劑, 可以抑制機(jī)體對(duì)于癌灶細(xì)胞的免疫監(jiān)視,促使癌灶細(xì)胞可以發(fā)生免疫脫逃。環(huán)氧化酶-2還可以催化促進(jìn)前列腺素產(chǎn)生, 促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖、抑制腫瘤細(xì)胞凋亡, 刺激了腫瘤細(xì)胞新生血管的形成［5］。環(huán)氧化酶-2的高表達(dá)還可以促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá), 降低了E-粘附素水平, 造成腫瘤細(xì)胞易粘附在細(xì)胞外基質(zhì), 從而促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)生長(zhǎng)和進(jìn)一步發(fā)生轉(zhuǎn)移［6］。本研究通過(guò)分析兩院2008年9月～2015年1月收治的56例膀胱癌術(shù)后患者臨床資料, 通過(guò)免疫組化的方法對(duì)環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率進(jìn)行判定。結(jié)果表明, 膀胱癌不同病理分級(jí)和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān), 膀胱癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和環(huán)氧化酶-2陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的正相關(guān), 提示環(huán)氧化酶-2高表達(dá)可能和膀胱癌的病理和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系, 臨床上可以根據(jù)環(huán)氧化酶-2表達(dá)情況, 給予環(huán)氧化酶-2抑制劑, 從而有效的降低膀胱癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的發(fā)生率, 進(jìn)而提高患者的預(yù)后水平。

綜上所述, 環(huán)氧化酶-2和膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后有著密切的聯(lián)系, 為指導(dǎo)臨床合理用藥提供了可靠的理論依據(jù)。

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Relationship between prognosis of bladder cancer and cyclooxygenase-2

LUO Fa-wei， YU Gui-liang.
Shenzhen City Guangming New District Guangming Central Hospital， Shenzhen 518107， China

Objective To investigate relationship between prognosis of bladder cancer and cyclooxygenase-2.Methods Clinical data of 56 bladder cancer patients were analyzed after operation.Immunohistochemical method was applied to detect positive rate of cyclooxygenase-2.Results There was a obviously positive correlation between pathological classification of bladder cancer and positive rate of cyclooxygenase-2.Lymphatic metastasis of bladder cancer also had positive correlation with positive rate of cyclooxygenase-2 (P＜0.05).Conclusion Cyclooxygenase-2 is closely related with occurrence, progression and prognosis of bladder cancer, and it can provide reliable theoretical reference for clinical rational drug use.

Bladder cancer; Prognosis; Cyclooxygenase-2; Relationship

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.21.003

2015-03-11］

518107 深圳市光明新區(qū)光明中心醫(yī)院(羅發(fā)維)；深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院(余貴亮)