佟威威 佟廣輝 王 婧 秦曉松 盧麗萍 劉 勇

(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院檢驗(yàn)科，沈陽(yáng) 110004)

肺癌在我國(guó)腫瘤發(fā)病率中位居首位，近年來(lái)呈現(xiàn)增高趨勢(shì)。血清中NSE、Cyfra21-1、SCCA 對(duì)肺癌的診斷、預(yù)測(cè)療效和轉(zhuǎn)歸等方面有較大的實(shí)用價(jià)值。本研究通過(guò)檢測(cè)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院100 例肺癌患者血清及胸水中Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 的水平，旨在探討其在肺癌的臨床分期、病理分型、判斷預(yù)后應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院2013 年1月～2014 年4 月內(nèi)科住院的肺癌患者的血清和癌性胸腔積液標(biāo)本100 例，其中男68 例，女32 例，男女比例為(2.13 ∶1)，年齡21～76 歲。臨床病理分期為:Ⅰ期17 例，Ⅱ期21 例，Ⅲ期29 例，Ⅳ期33例;病理學(xué)分型:小細(xì)胞肺癌24 例、大細(xì)胞未分化癌3 例、腺癌44 例、鱗癌29 例。同時(shí)收集明確診斷的50 例肺部感染性疾病(包括大葉性肺炎、肺結(jié)核、支原體肺炎等肺部感染性疾病)患者血清和滲出性胸腔積液。

1.1.2 病例組納入標(biāo)準(zhǔn) 肺癌患者的診斷符合2011 年版衛(wèi)生部發(fā)布的原發(fā)性肺癌診療規(guī)范，所有病例均經(jīng)詳細(xì)的臨床診斷和細(xì)胞學(xué)或組織病理學(xué)檢查確診并排除以下情況:(1)良性腫瘤;(2)結(jié)締組織病變;(3)肺炎。

1.2 儀器與試劑 羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)COBAS E601 及NSE、Cyfra21-1 配套試劑;ARCHITECT I2000 雅培化學(xué)發(fā)光分析儀及SCCA 配套試劑;BNII 西門子特種蛋白儀及CRP 配套試劑。

1.3 檢測(cè)方法 所有血清標(biāo)本均為空腹靜脈采血，血液及胸水標(biāo)本離心后，置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。檢測(cè)時(shí)均采用盲法，嚴(yán)格按照試劑盒所附說(shuō)明書操作步驟進(jìn)行。檢驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性率界限按照檢驗(yàn)科所驗(yàn)證各檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考區(qū)間上限所定。NSE＜16.3 ng/ml 為陰性;SCCA＜1.5 ng/ml 為陰性;CYFRA21-1＜3.3 ng/ml 為陰性;CRP ＜0.8 mg/L 為陰性，反之為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布采用±s 形式表示，不服從正態(tài)分布以(中位數(shù)±四分位數(shù)間距)形式表示。多組樣本計(jì)量資料采用K Independent Samples 非參數(shù)檢驗(yàn);兩組樣本計(jì)量資料采用2IndependentSamples非參數(shù)檢驗(yàn);率的比較采用χ2檢驗(yàn);以P＜0.05 為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 肺癌患者與感染性疾病患者血清中SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 的比較(見(jiàn)表1)肺癌組血清SCCA、NSE、Cyfra21-1 的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組SCCA、NSE、Cyfra21-1，P＜0.05。肺癌組血清中CRP 的陽(yáng)性率顯著低于對(duì)照組CRP，P＜0.05。

2.2 胸水中NSE、Cyfra21-1 在肺癌組與感染性疾病組的比較(見(jiàn)表2) 肺癌組胸水中NSE 和Cyfra21-1 的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組NSE、Cyfra21-1;P＜0.05。

2.3 血清中不同分期肺癌的SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 比較(見(jiàn)表3) 肺癌Ⅰ期血清中SCCA、NSE、Cyfra21-1 的陽(yáng)性率顯著低于Ⅲ期、Ⅳ期(P ＜0.05)，Ⅰ期與Ⅱ期比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，Ⅲ期與Ⅳ期比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，Ⅱ期低于Ⅲ期、Ⅳ期(P＜0.05)。血清CRP 的陽(yáng)性率在肺癌Ⅱ～Ⅳ期陽(yáng)性率均顯著高于Ⅰ期(P＜0.05)，Ⅱ期與Ⅲ期、Ⅲ期與Ⅳ期比較均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

表2 胸水中肺癌組與感染性疾病組的NSE、Cyfra21-1比較Tab.2 Comparison of pleural effusion NSE and Cyfra21-1 between control group and case group

表1 血清中肺癌組與感染性疾病組的SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 比較Tab.1 Comparison of serum SCCA，NSE，CRP，Cyfra21-1 between control group and case group

表3 血清中不同分期肺癌的SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 比較Tab.3 Comparison of serum SCCA，NSE，CRP，Cyfra21-1 among lung cancer of different TNM stages

2.4 胸水中不同分期肺癌組的NSE、Cyfra21-1 比較(見(jiàn)表4) 肺癌胸水中的Cyfra21-1 和NSE 的陽(yáng)性率在肺癌的Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別比較均差異顯著(P＜0.05)，Ⅱ期與Ⅲ期和Ⅲ期與Ⅳ期比較無(wú)差別(P＞0.05)。結(jié)果表明，Ⅱ～Ⅳ期Cyfra21-1 和NSE 的陽(yáng)性率均顯著高于Ⅰ期(P＜0.05)。

2.5 血清中不同病理分型肺癌的SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 比較(見(jiàn)表5) 鱗癌中血清Cyfra21-1 陽(yáng)性率顯著高于腺癌和小細(xì)胞癌(P ＜0.05)，而鱗癌與大細(xì)胞癌之間陽(yáng)性率差異不顯著;小細(xì)胞肺癌中血清NSE 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、鱗癌和大細(xì)胞癌(P＜0.05);鱗癌中血清CRP陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、小細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌(P＜0.05)，而大細(xì)胞癌與腺癌和小細(xì)胞癌之間陽(yáng)性率差異不顯著;鱗癌中血清SCCA 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌和小細(xì)胞癌(P＜0.05)，而大細(xì)胞癌與鱗癌之間陽(yáng)性率差異不顯著。

2.6 胸水中不同病理分型肺癌的NSE、Cyfra21-1比較(見(jiàn)表6) 鱗癌中胸水Cyfra21-1 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、小細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌(P＜0.05)，而腺癌、小細(xì)胞癌與大細(xì)胞癌之間陽(yáng)性率差異不顯著;小細(xì)胞癌中胸水NSE 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、小細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌(P＜0.05)，而腺癌、小細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌之間陽(yáng)性率差異不顯著。

2.7 聯(lián)合檢測(cè)血清中Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 在肺癌診斷中的作用(見(jiàn)表7) 血清中Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度顯著高于單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)的靈敏度(P＜0.05)。而聯(lián)合檢測(cè)的特異度顯著低于單項(xiàng)檢測(cè)(P＜0.05)。

2.8 聯(lián)合檢測(cè)胸水中Cyfra21-1、NSE在肺癌診斷中的作用(見(jiàn)表8) 胸水中Cyfra21-1、NSE 聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異度與單項(xiàng)檢測(cè)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表4 胸水中不同分期肺癌組的NSE、Cyfra21-1 比較Tab.4 Comparison of pleural effusion NSE and Cyfra21-1 among lung cancer of different TNM stages

表5 血清中不同病理分型肺癌的SCCA、NSE、CRP、Cyfra21-1 比較Tab.5 Comparison of serum SCCA，NSE，CRP，Cyfra21-1 among lung cancer of different pathological types

表6 胸水中不同病理分型肺癌的NSE、Cyfra211 比較Tab.6 Comparison of pleural effusion NSE and Cyfra21-1 among lung cancer of different pathological types

表7 聯(lián)合檢測(cè)血清中Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 在肺癌診斷中的作用Tab.7 Use of serum SCCA，NSE，CRP，Cyfra21-1 in combination in diagnosis of lung cancer

表8 聯(lián)合檢測(cè)胸水中Cyfra21-1、NSE 在肺癌診斷中的作用Tab.8 Use of pleural effusion NSE and Cyfra21-1 in combination in diagnosis of lung cancer

3 討論

肺癌的發(fā)病率和死亡率在全球惡性腫瘤中位居首位，并且近年來(lái)呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，早期診斷和治療是降低肺癌死亡率有效措施［1］。有研究顯示血清中NSE、Cyfra21-1 可作為許多可以預(yù)測(cè)療效和生存的因素［2，3］?，F(xiàn)代研究指出，NSE 和Cyfra21-1 可能分別為小細(xì)胞肺癌及非小細(xì)胞肺癌的較特異血清腫瘤標(biāo)志物，兩者同時(shí)陽(yáng)性且測(cè)定值明顯升高者具備區(qū)分肺癌種類診斷意義［4-6］。SCCA 主要存在于宮體、宮頸、頭頸等鱗狀上皮細(xì)胞的胞漿中，特別是高分化型大細(xì)胞中含量豐富，是臨床宮頸鱗癌監(jiān)測(cè)中最常用的血清腫瘤標(biāo)志物［7，8］。發(fā)熱和急性相反應(yīng)是大范圍的惡性腫瘤的普遍特點(diǎn)，因此，CRP 在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有顯著變化。關(guān)于SCCA 和CRP在肺癌中的應(yīng)用價(jià)值缺少有報(bào)道。本研究主要分析血清中SCCA、NSE、Cyfra21-1 三種腫瘤標(biāo)志物和炎性介質(zhì)CRP 并結(jié)合胸水 中NSE、Cyfra21-1 濃度，探討其在分別腫瘤臨床分期、病理分型及不同標(biāo)記物聯(lián)合診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值。

本研究發(fā)現(xiàn)血清中NSE、Cyfra21-1、和SCCA 在肺癌組陽(yáng)性率顯著高于感染性疾病組，并且胸腔積液中NSE、Cyfra21-1 在兩組之間也有顯著性差異，但是血清CRP 卻恰好相反，其在肺癌組的陽(yáng)性率低于感染性疾病組。由于CRP 是機(jī)體非特異性免疫機(jī)制的一部分，炎癥反應(yīng)時(shí)，它通過(guò)結(jié)合C-多糖并在Ca2+存在時(shí)結(jié)合細(xì)胞膜上磷酸膽堿，可激活補(bǔ)體的經(jīng)典途徑，增強(qiáng)白細(xì)胞的吞噬作用，調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞或單核/巨噬系統(tǒng)功能，并促進(jìn)巨噬細(xì)胞組織因子的生成。因此，感染性疾病組CRP 顯著增高。

近年來(lái)血清CRP 在診斷惡性腫瘤方面的意義逐漸受到重視［9］。關(guān)于CRP 與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系的研究也越來(lái)越多。Claire 等［10］研究報(bào)道，CRP增高者比正常者的癌癥發(fā)病率增高38%，即使去除5 年的潛伏期的影響，發(fā)病率仍增高26%。國(guó)內(nèi)外學(xué)者提出，CRP、IL-6、TNF 與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，會(huì)大大增加腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，而且在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中所起的作用更加明顯，其中CRP 的預(yù)測(cè)價(jià)值尤為突出，并且CRP 水平的增高與罹患肺癌危險(xiǎn)性顯著相關(guān)［11］。本研究中Ⅱ～Ⅳ期血清CRP 陽(yáng)性率均顯著高于Ⅰ期，進(jìn)一步揭示了CPR 的含量在腫瘤進(jìn)展中的作用。

Cyfra21-1 是一種酸性蛋白質(zhì)，主要存在于肺癌、食管癌等上皮起源腫瘤細(xì)胞的胞漿中，當(dāng)腫瘤細(xì)胞溶解或壞死時(shí)，Cyfra21-1 可釋放到血液中，是肺癌的腫瘤標(biāo)志物之一［12］。本試驗(yàn)中鱗癌中血清Cyfra211 陽(yáng)性率顯著高于腺癌和小細(xì)胞癌。鱗癌中胸水Cyfra21-1 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、小細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌。因此該項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷有重要價(jià)值。

NSE 是存在于神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)中的一種糖酵解酶，是神經(jīng)內(nèi)分泌起源性腫瘤，而小細(xì)胞肺癌最常表現(xiàn)為有神經(jīng)分泌性質(zhì)的腫瘤［13］。肺癌患者血清、胸水NSE 的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組。這是因?yàn)檎Ｈ搜錘SE 水平為5～15 ng/ml，含量極低，小細(xì)胞肺癌屬于神經(jīng)分泌腫瘤，所以小細(xì)胞肺癌患者血清及胸腔積液中NSE 水平較高［14-16］。本研究結(jié)果顯示，小細(xì)胞肺癌中血清中NSE 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌、鱗癌和大細(xì)胞癌，并且胸水中NSE的陽(yáng)性率在不同組織分型中的比較進(jìn)一步證實(shí)了其在小細(xì)胞肺癌的特異性。這一結(jié)果與其他學(xué)者關(guān)于小細(xì)胞肺癌患者NSE 水平明顯增高的結(jié)論相一致［17，18］。因此，NSE 被認(rèn)為是監(jiān)測(cè)小細(xì)胞支氣管癌的首選標(biāo)志物。

肺癌血清中Cyfra21-1、NSE 的陽(yáng)性率均顯著高于肺癌Ⅰ、Ⅱ期Cyfra21-1、NSE 陽(yáng)性率。肺癌胸水中Ⅱ～Ⅳ期Cyfra21-1、NSE 的陽(yáng)性率均顯著高于Ⅰ期?？梢?jiàn)Cyfra21-1、NSE 陽(yáng)性率與疾病進(jìn)展的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，并且胸水中的Cyfra21-1、NSE 升高的肺癌分期早于血清Cyfra21-1 的肺癌分期。因此，血清及胸水中的Cyfra21-1、NSE 檢測(cè)對(duì)肺癌的臨床診斷、組織分型及疾病進(jìn)展具有重要的臨床價(jià)值。

SCCA 是1977 年Kato 和Torigoe［19］從宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中提純出一種組織抗原，其含量與宮頸癌的診斷、臨床分期、腫瘤大小相關(guān)，是宮頸鱗癌一項(xiàng)較好的腫瘤標(biāo)志物。SCCA 在正常人和良性疾病中SCCA 僅輕微升高，而在宮頸癌患者中SCCA 顯著升高，這使其在宮頸癌診斷中有較好的特異性［20］。我們檢測(cè)鱗癌中血清SCCA 陽(yáng)性率均顯著高于腺癌和小細(xì)胞癌，而大細(xì)胞癌與鱗癌之間陽(yáng)性率差異不顯著。這是因?yàn)檠褐蠸CCA 水平較低，而腫瘤的浸潤(rùn)性生長(zhǎng)使SCCA 擴(kuò)散入血成為可能，因此鱗癌患者的血SCCA 水平通常較高。本研究中，肺癌血清中Ⅲ、Ⅳ期中SCCA 陽(yáng)性率均顯著高于肺癌Ⅰ、Ⅱ期，表明SCCA 與肺癌的進(jìn)展程度相關(guān)，并可應(yīng)用于臨床上監(jiān)測(cè)惡性腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

血清中Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度顯著高于單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)的靈敏度。而聯(lián)合檢測(cè)的特異度顯著低于單項(xiàng)檢測(cè)。既往關(guān)于血清腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)研究中很少有聯(lián)合CRP 的檢測(cè)。有研究顯示聯(lián)合檢測(cè)、CEA、CYFRA21-1、NSE、CA125 和CA242 五種腫瘤標(biāo)志物在肺癌腫的診斷敏感性為92.8%［21］。而在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)Cyfra21-1、NSE、CRP 和SCCA 診斷肺癌的靈敏度可高達(dá)95%，較大程度地降低了肺癌的漏診率。因此，聯(lián)合檢測(cè)NSE、CYFRA21-1、CRP、SCCA，將有助于臨床對(duì)于肺癌的鑒別診斷、組織分型和分期的辨別以及與其他癌癥的鑒別。

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