高爽，王高亞，歐陽蘇珊，趙琦，王家寧，楊娉婷，肖衛(wèi)國

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽 110001）

·論著·

狼瘡腦病患者腦脊液白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子α水平及其臨床意義

高爽，王高亞，歐陽蘇珊，趙琦，王家寧，楊娉婷，肖衛(wèi)國

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽 110001）

目的探討狼瘡腦病患者腦脊液白細(xì)胞介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平及其在狼瘡腦病中的臨床意義。方法酶聯(lián)免疫吸附方法檢測15例狼瘡腦病患者腦脊液中的IL-6、TNF-α水平，將15例慢性頭痛但腦脊液常規(guī)檢測正常患者作為對照組。收集狼瘡腦病患者的臨床相關(guān)資料，評價2種細(xì)胞因子在狼瘡腦病中的臨床意義。結(jié)果狼瘡腦病組腦脊液IL-6的水平為（237.73±66.29）pg/mL，顯著高于對照組的（4.67±2.50）pg/mL（P＜0.01）。TNF-α在狼瘡腦病組和對照組水平分別為（39.07±24.48）pg/mL和（4.33±2.94）pg/mL，兩者相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01）。Pearson相關(guān)分析顯示，狼瘡腦病患者中腦脊液IL-6和TNF-α的水平與患者血沉、血清免疫球蛋白、C反應(yīng)蛋白、補(bǔ)體水平及系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動度評分等臨床指標(biāo)均無顯著相關(guān)。結(jié)論IL-6和TNF-α可能成為狼瘡腦病治療的有效靶點(diǎn)，其增高機(jī)制值得探索。

狼瘡腦?。话捉樗?；腫瘤壞死因子α

狼瘡腦病是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）的主要死因之一，嚴(yán)重影響SLE患者的預(yù)后。狼瘡腦病可以發(fā)生在SLE的任何時期，其主要依靠臨床癥狀、頭MRI、腦脊液檢查、腦電圖及心理測試等檢查綜合判定［1，2］。狼瘡腦病患者腦脊液常規(guī)檢查常缺乏特異表現(xiàn)，診斷意義亦十分有限。國外研究提示白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）在狼瘡腦病的診斷中具有重要意義［3～5］，而有關(guān)腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）在狼瘡腦病患者腦脊液的水平的研究結(jié)論尚不一致。由于狼瘡腦病患者腦脊液收集相對困難，國內(nèi)尚未見到類似研究的報告。我們的前期研究表明，將IL-6或TNF-α注射至大鼠杏仁核均可引起大鼠條件反射建立及消退的異常，提示這2種細(xì)胞因子可能在狼瘡腦病中發(fā)揮作用［6，7］。本研究通過檢測狼瘡腦病患者腦脊液中細(xì)胞因子IL-6和TNF-α水平的變化，探討其在狼瘡腦病中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 患者分組

所有狼瘡腦病患者均為來自2013年5月至2015年3月于中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院并確診為狼瘡腦病的患者。SLE患者15例，其中男2例，女13例，年齡（32.2±7.11）歲，均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會SLE的分類標(biāo)準(zhǔn)。狼瘡腦病的診斷依賴于臨床癥狀和頭影像學(xué)的綜合判定，并在排除尿毒癥、高血壓、全身或中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染及其他原因引起的神經(jīng)精神癥狀及甲潑尼龍沖擊治療和環(huán)磷酰胺治療后明顯緩解的基礎(chǔ)上得以確診。對照組為同期就診于陸軍總院以長期慢性頭痛為主訴且腦脊液常規(guī)正常的患者15例，其中男2例，女13例，年齡（37.6±10.69）歲。對照組患者就診時體格檢查無明顯神經(jīng)系統(tǒng)陽性體征，腦脊液及相關(guān)輔助檢查各項(xiàng)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)。狼瘡腦病組與對照組患者在年齡及性別構(gòu)成上無統(tǒng)計學(xué)差異。本研究獲得了中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，并獲得了所有患者的知情同意。

1.2 標(biāo)本采集

狼瘡腦病患者腦脊液的收集在甲潑尼龍沖擊治療和環(huán)磷酰胺治療前進(jìn)行。2組患者均留取腦脊液1 mL，迅速凍于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 臨床資料的收集

記錄狼瘡腦病患者在甲潑尼龍沖擊治療和環(huán)磷酰胺治療前的血沉（erythrocyte sendimentation rate，ESR）、C反應(yīng)蛋白（C-reaction protein，CRP）、免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）、IgG、IgM、補(bǔ)體3（component 3，C3）、C4和SLE疾病活動度評分（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）。

1.4 檢測方法

ELISA法檢測2組患者腦脊液中IL-6、TNF-α的水平。檢測步驟嚴(yán)格按照R&D公司ELISA試劑盒說明書進(jìn)行。每個標(biāo)本均復(fù)孔檢測，誤差控制在10%以內(nèi)，結(jié)果以2次平均值計算。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 狼瘡腦病組腦脊液常規(guī)檢查結(jié)果

狼瘡腦病患者腦脊液常規(guī)檢測在狼瘡診斷中缺乏特異性表現(xiàn)。所有慢性頭痛患者的腦脊液均為正常水平，其中腦脊液壓力增高（＞200 mmH2O）11例，細(xì)胞數(shù)增高（＞10/μL）6例，蛋白增高（＞0.45 g/L）13例，葡萄糖異常（2.5～4.5 mmol/L）3例，氯化物異常（119～129 mmol/L）2例，具體數(shù)值未列出。

2.2 腦脊液IL-6和TNF-α水平

狼瘡腦病組和對照組腦脊液IL-6的水平分別為（237.73±66.29）pg/mL和（4.67±2.50）pg/mL，TNF-α的水平分別為（39.07±24.48）pg/mL和（4.33±2.94）pg/mL，兩組相比均有統(tǒng)計學(xué)差異（均P＜0.01）。

2.3 腦脊液IL-6和TNF-α的水平與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析

Pearson分析顯示，狼瘡腦病患者組腦脊液IL-6和TNF-α的水平與治療前患者的血沉、CRP、血清IgA、IgG、IgM、C3、C4、SLEDAI均無明顯相關(guān)。

表1 細(xì)胞因子水平與各臨床指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)Tab.1 Correlation efficient between cellular factor level and each clinical index

3 討論

本研究著眼于狼瘡腦病患者腦脊液細(xì)胞因子水平的變化，發(fā)現(xiàn)IL-6和TNF-α在狼瘡腦病患者的腦脊液中顯著增高，提示細(xì)胞因子在狼瘡腦病發(fā)病過程中可能扮演重要角色。

眾所周知，狼瘡腦病是SLE診治的難點(diǎn)。由于狼瘡腦病患者腦脊液常規(guī)檢測特異性較差，很難與感染等其他疾病相鑒別，所以常規(guī)腦脊液檢測對狼瘡腦病的診斷意義十分有限。我們的研究結(jié)果提示，除了蛋白和細(xì)胞數(shù)在狼瘡腦病患者腦脊液高于正常上限外（蛋白增高更為顯著），并無其他特征性改變。而事實(shí)上，除了抗磷脂綜合征導(dǎo)致的血栓與狼瘡的病情活動不相關(guān)外，其他所有形式的狼瘡腦病都是狼瘡高度活動的表現(xiàn)，炎癥一定是其發(fā)病的重要病理學(xué)基礎(chǔ)，所以探索狼瘡腦病患者腦脊液中細(xì)胞因子水平的變化十分必要。

有研究顯示，IL-6在狼瘡腦病患者的腦脊液中顯著增高，在狼瘡腦病的診斷具有較好的特異性［3］。而有關(guān)TNF-α在狼瘡腦病腦脊液中水平的結(jié)論并不一致。我們調(diào)查了國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)，未能發(fā)現(xiàn)有關(guān)中國人的相關(guān)報道。在本研究中，我們首次在國內(nèi)證實(shí)IL-6和TNF-α在中國人狼瘡腦病患者的腦脊液中均顯著增高，為探索這2種細(xì)胞因子在狼瘡腦中的作用提供了有意義的依據(jù)。

分析以上2種細(xì)胞因子增高的原因可能有兩個方面。首先，在狼瘡腦病的發(fā)病機(jī)制中，血腦屏障的破壞可能是關(guān)鍵環(huán)節(jié)［8］。所以我們有理由推測，伴隨著血腦屏障的破壞，SLE患者外周血中增高的IL-6和TNF-α進(jìn)入腦脊液可能是導(dǎo)致其檢測水平增高的機(jī)制之一［9］。此外，腦脊液高水平的IL-6及TNF-α亦可能由腦內(nèi)具有免疫潛能的膠質(zhì)細(xì)胞所產(chǎn)生［10，11］。除神經(jīng)元細(xì)胞外，腦內(nèi)80%以上細(xì)胞成分是膠質(zhì)細(xì)胞，它們主要由星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞組成，而兩者都能在免疫激活狀態(tài)下釋放細(xì)胞因子及趨化因子。膠質(zhì)細(xì)胞在多發(fā)性硬化的研究相對較多，而在狼瘡腦病中研究尚屬空白。明確膠質(zhì)細(xì)胞的激活對腦局部IL-6和TNF-α的貢獻(xiàn)是一個非常值得探討的問題。

本研究中我們也探討了IL-6和TNF-α與SLE患者其他臨床指標(biāo)和SLEDAI的相關(guān)性，但結(jié)果未顯示以上2種細(xì)胞因子與ESR、血清免疫球蛋白水平、CRP及SLEDAI之間明顯相關(guān)。這恰恰從另外一個側(cè)面提示腦局部免疫激活在腦脊液細(xì)胞因子水平的變化及狼瘡腦病的發(fā)病機(jī)制中可能具有關(guān)鍵作用。

總之，我們的研究揭示了IL-6和TNF-α在狼瘡腦病中可能扮演的角色，為應(yīng)用臨床IL-6或TNF-α拮抗劑治療難治性狼瘡腦病提供了有利的依據(jù)。本研究的例數(shù)較少，我們將增加樣本量進(jìn)一步評價以上2種細(xì)胞因子在狼瘡腦病中的臨床意義。

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（編輯 陳 姜）

Expression ofInterleukin-6 and Tumor Necrosis Factorαin CerebrospinalFluid ofPatientswith Lupus Encephalopathy and Their ClinicalSignificance

GAO Shuang，WANG Gao-ya，OUYANGSu-shan，ZHAOQi，WANGJia-ning，YANGPing-ting，XIAOWei-guo
（DepartmentofRheumatology and Immunology，The FirstHospital，China MedicalUniversity，Shenyang110001，China）

ObjectiveTo evaluate the expression levels of interleukin 6（IL-6）and tumor necrosis factor α（TNF-α）in cerebrospinal fluid（CSF）of patients with lupus encephalopathy（LE），and explore their clinical significance.MethodsCSF were collected from 15 patients with LE and 15 patients with chronic headache.The CSF routine examinations in patients with chronic headache were allnormal.The expression levels ofIL-6 and TNF-α were measured by enzyme-linked immunosorbent assay.Clinical features and laboratory data were collected from the patients with LE.ResultsThe levels of IL-6（237.73±66.29 pg/mL vs 4.67±2.50 pg/mL）and TNF-α（39.07±24.48 pg/mLvs 4.33±2.94 pg/mL）were significantly different between the patients with LE and those with chronic headache（both P＜0.01）.No significant correlations were found between the levels of IL-6 or TNF-α and erythrocyte sendimentation rate，serum immunoglobulin levels，serum C-reaction protein level，serum component levels，complete levels as well as SLE disease activity index.ConclusionIL-6 and TNF-α could be the new targets in the treatment of LE.The mechanisms of the increased expression ofIL-6 and TNF-αin CSF ofpatientswith LEis worthy to be investigated.

lupus encephalopathy；interleukin-6；tumor necrosis factor-α

R593.24

A

0258-4646（2015）09-0783-03

國家自然科學(xué)基金（81271324）；遼寧省醫(yī)學(xué)高峰建設(shè)工程重點(diǎn)科研項(xiàng)目（2010006）；遼寧省自然科學(xué)基金（201202250）

高爽（1984-），女，主治醫(yī)師，碩士研究生.

楊娉婷，E-mail：yangpingtingting@163.com

2015-05-06

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