張博雅，李永健，黨 群，金 喆

(天津市南開醫(yī)院，天津300100)

男性是冠心病的獨立危險因素之一，但迄今為止沒有證據(jù)顯示雄激素可以使冠心病的發(fā)病率增高。研究發(fā)現(xiàn)，男性性激素水平隨其衰老而降低，而睪酮水平越低冠心病發(fā)病率越高。最近，已有丙酸睪酮治療心衰的大規(guī)模臨床觀察研究，并顯示出良好的治療效果。2005年7月～2006年7月，我們在行去勢術(shù)的雄性SD大鼠急性心肌梗死(AMI)后6 h開始應(yīng)用大、小劑量睪酮，觀察其對AMI病死率及心室重構(gòu)的影響?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 雄性清潔SD大鼠85只，體質(zhì)量250～350 g，購自中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心，飼養(yǎng)條件:常溫、普通飼料、自由飲水。隨機(jī)選取10只行睪丸切除假手術(shù);其余75只均行睪丸切除術(shù)。所有去勢及假去勢大鼠均行冠脈結(jié)扎術(shù)。術(shù)后6 h大鼠正式分組并第1次給藥:其中睪丸切除假手術(shù)大鼠給予安慰劑，為假手術(shù)對照組;去勢術(shù)+冠脈結(jié)扎術(shù)大鼠隨機(jī)分為3組，其中一組給予安慰劑，為安慰劑對照組;一組給予睪酮肌注37.5 mg/kg，每周2次，為大劑量試驗組;一組給予睪酮肌注10 mg/kg，每周2次，為小劑量試驗組;共給藥6周。安慰劑為生理鹽水，肌注0.4 mL/kg，每周2次。觀察6周，記錄大鼠死亡例數(shù)。

1.2 大鼠生存情況觀察 清潔飼養(yǎng)各組冠脈結(jié)扎心梗術(shù)后的SD大鼠，6周后記錄各組存活大鼠及死亡大鼠數(shù)量，計算各組大鼠存活率。

1.3 大鼠心臟標(biāo)本留取及左室游離壁梗死區(qū)厚度心肌橫斷面積(MCSA)的測量 開腹分離腹主動脈，在兩側(cè)髂總動脈分叉處，進(jìn)針放血，同時于下腔靜脈放置滯留針，閉合下腔靜脈遠(yuǎn)端，通過滯留針推注4℃的預(yù)冷PBS液約50 mL，直至動脈出血處血液顏色變淡。迅速開胸，打開心包，從主動脈根部離斷心臟，取出心臟，迅速放置于4℃ PBS液中洗凈殘血。沿冠狀動脈溝分離心房和心室組織，將心室組織放置于濾紙上1 min去除殘存水滴。稱量心室總重量，而后分離左、右心室，室間隔保留于左室，分別稱量二者重量。將左室放置于10%甲醛溶液中固定10～14 d，切片，進(jìn)行HE染色。①左室游離壁梗死區(qū)厚度的測量:在40倍視野下，每張切片隨機(jī)選取5～6個完全包含梗死區(qū)游離壁自心內(nèi)膜至心外膜的區(qū)域，應(yīng)用Image Pro Plus4.5圖像分析軟件計算其平均厚度;②MCSA的測量:在彩色圖像下選取細(xì)胞核位于中心且較圓的細(xì)胞進(jìn)行分析，以保證其測量的均一性［1，2］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件。計量資料以±s表示，多組間均數(shù)比較采用One-way ANOVA的 LSD法，如方差不齊，用 Tamhane's T2法。計數(shù)資料比較用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 睪酮對AMI大鼠病死率的影響 4組行冠脈結(jié)扎心梗術(shù)大鼠共計85只，6周后存活42只，存活率為49.41%。其中，假手術(shù)對照組6周后存活6只，存活率為60.00%;安慰劑對照組33只，存活11只，存活率為33.33%;大劑量試驗組20只，存活13只，存活率為65.00%;小劑量試驗組22只，存活12只，存活率為54.55%。大劑量試驗組較安慰劑對照組存活率高(P＜0.05)。

2.2 睪酮對AMI大鼠心室重構(gòu)的影響 左室心肌切片HE染色大體觀見圖1。梗死區(qū)室壁厚度、MCSA比較見表1。

圖1 各組大鼠左室心肌切片HE染色

表1 各組大鼠心肌梗死區(qū)室壁厚度及MCSA比較(±s)

表1 各組大鼠心肌梗死區(qū)室壁厚度及MCSA比較(±s)

注:與安慰劑對照組比較，*P＜0.05

組別 n 梗死區(qū)厚度(mm) MCSA(μm2)假手術(shù)對照組6 2.62 ±0.28 307.25 ±70.74安慰劑對照組 11 2.97 ±0.42 275.09 ±15.10大劑量試驗組 13 3.01 ±0.88 295.98 ±49.67小劑量試驗組 12 2.94 ±0.39 319.78 ±52.42*

3 討論

越來越多的證據(jù)顯示，雄激素與心血管疾病和衰老的關(guān)系密切。高TC、LDL、TG血癥是動脈粥樣硬化的獨立危險因素之一，而高HDL則具有保護(hù)作用。在臨床上常用LDL/HDL即動脈粥樣硬化指數(shù)進(jìn)行冠心病一級預(yù)防的危險分層［3］。

關(guān)于睪酮對血脂影響的研究迄今為止已有很多，觀點比較一致，大部分橫斷面研究顯示:內(nèi)源性睪酮與 HDL 呈正相關(guān)［4～6］，與 TC、TG、LDL 呈負(fù)相關(guān)［7，8］。近年研究結(jié)果顯示，去勢術(shù)對心梗大鼠血漿脂蛋白水平無顯著性影響。在大多數(shù)人群中，外源性睪酮治療會導(dǎo)致HDL減低［9］，但對于老年患者或性腺機(jī)能低下者，這種影響并不顯著。有研究顯示，其可能與此類患者多存在肥胖及胰島素抵抗有關(guān)。睪酮水平與肥胖呈負(fù)相關(guān)［10］，而肥胖與HDL水平也呈負(fù)相關(guān)，外源性睪酮治療可顯著減少內(nèi)臟及皮下脂肪。一般來說，青年男性及運動員脂肪含量較低，且無胰島素抵抗，而老年人或性腺機(jī)能低下者脂肪含量高，并且多有不同程度的胰島素抵抗，所以減低了睪酮對HDL的抑制作用。這就可以解釋為什么睪酮對HDL的抑制作用在青年男性或運動員要比老年人或性腺機(jī)能低下者顯著的多。動物實驗［11］顯示，給予外源性雄激素可改善冠脈血流，增加心室縮短分?jǐn)?shù)和心肌耗氧峰值，因而具有改善心功能的作用，而去勢則會導(dǎo)致心室射血分?jǐn)?shù)和舒張功能降低。臨床研究［12］發(fā)現(xiàn)，冠心病患者補充雄激素可使其冠脈血流增加，運動耐量加強。臨床觀察資料顯示，AMI時所有男性患者血漿睪酮水平均顯著降低［13］，因此，AMI時補充睪酮治療，具有合理的病理生理依據(jù)。但是，迄今為止國內(nèi)外關(guān)于雄激素治療AMI的動物實驗研究很少，國內(nèi)尚未見報道，而且尚未見雄激素治療AMI的臨床研究報道。目前，已有2個研究組在動物實驗中嘗試應(yīng)用雄激素治療AMI，但是他們的實驗結(jié)果幾乎對立。Nahrendorf等［14］在雄性大鼠去勢后給予十一酸睪酮替代治療，2周后行左前降支結(jié)扎，觀察十一酸睪酮對心室重構(gòu)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠左室重量顯著增加，心房鈉尿肽(ANP)mRNA無顯著變化，α/β-肌球蛋白重鏈(MHC)表達(dá)增加，心臟膠原含量無顯著改變。因此，Nahrendorf等認(rèn)為，睪酮治療可直接作用于心肌細(xì)胞而引發(fā)一種類似“生理性”心肌肥厚，而并非由心臟負(fù)荷改變所致;并且，睪酮治療可有效降低左室舒張末期壓力(對心梗后心室重構(gòu)沒有產(chǎn)生有害影響，甚至具有改善心功能的作用。而Cavasin等［15］在雄性小鼠去勢后給予睪酮替代治療6周，而后行左前降支結(jié)扎術(shù)。結(jié)果顯示，與對照組相比，睪酮治療組心室腔顯著擴(kuò)大，心臟射血功能下降，心臟破裂發(fā)生率明顯增加。因而，Cavasin等認(rèn)為，雄激素治療對心梗后心室重構(gòu)是有害的?；谏鲜鲑Y料，因此，雄激素對AMI心室重構(gòu)的影響目前尚無定論，其作用機(jī)制更不明確。

本研究結(jié)果顯示，雄性去勢大鼠AMI后，大劑量睪酮治療可降低AMI的致死率，對梗死區(qū)室壁厚度及MCSA無顯著影響;小劑量睪酮治療使MCSA增加，對梗死區(qū)室壁厚度無顯著影響。因此，睪酮對AMI心室重構(gòu)影響具有劑量依賴性的特點。

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