真德智 王曉彬 李云松 李 杰 韓 毅 劉志東*

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院/北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所胸外科，北京101149;2.內(nèi)蒙古林業(yè)總醫(yī)院胸心血管外科，內(nèi)蒙古牙克石022150;3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院/北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所腫瘤科，北京101149)

雖然近些年肺癌診斷和治療技術(shù)不斷發(fā)展，但是肺癌仍是目前全球最致命的癌癥之一［1］。在世界很多國家和地區(qū)肺癌的發(fā)病率已經(jīng)達(dá)到高峰而且成為主要的公共衛(wèi)生問題，這一問題在中國也尤為突出［2］。肺癌的發(fā)病機(jī)制至今仍不完全清楚，而除了吸煙之外，宿主因素包括遺傳多態(tài)性已成為導(dǎo)致肺癌的最重要單一因素，而且越來越多的肺癌發(fā)生機(jī)制相關(guān)研究開始關(guān)注這一因素［3］。

作為趨化因子家族的一員白細(xì)胞介素-8(interleukin-8，IL-8)是中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的化學(xué)誘導(dǎo)劑［4-5］。單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等多種正常細(xì)胞均可分泌IL-8［6］。IL-8的首要作用是白細(xì)胞趨化活性，主要參與急性炎性反應(yīng)的啟動(dòng)和放大［7］。另外，多種腫瘤細(xì)胞也可分泌 IL-8［8］，并參與血管生成和新生血管依賴的腫瘤生長［9-10］。在多種類型腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中都能檢測出IL-8過表達(dá)［11-13］。IL-8-251T/A(rs4073)的基因多態(tài)性分為主要的T/T純合子基因型、T/A雜合子基因型和罕見的A/A純合子基因型。

目前已有許多關(guān)于IL-8-251T/A(rs4073)基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的研究，但是結(jié)果并不一致。單中心研究，尤其是樣本量特別小的研究，無法檢測出基因多態(tài)性在肺癌中微小的影響。而基因多態(tài)性在不同人群中也會(huì)有不同作用。因此，本研究對(duì)符合納入標(biāo)準(zhǔn)的研究進(jìn)行Meta分析，以期得到更準(zhǔn)確的IL-8-251T/A(rs4073)基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 文獻(xiàn)檢索與篩選

在 PubMed 中 應(yīng) 用“IL-8”、“interleukin-8”、“-251T/A”、“rs4073”、“polymorphism”和“l(fā)ung cancer”詞語檢索2013年12月1日之前、全部語種和研究對(duì)象為人類的文獻(xiàn)。同時(shí)，對(duì)綜述中相關(guān)的參考文獻(xiàn)進(jìn)行手工檢索。只篩選可得到全文的文獻(xiàn)，排除綜述、信件、評(píng)述和病理報(bào)告。對(duì)于相同數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)，只納入近期或有完整數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析。

文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn):①評(píng)估了IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的文獻(xiàn);② 研究設(shè)計(jì)為病例對(duì)照研究;③提供了肺癌組和對(duì)照組的IL-8-251T/A各基因亞型例數(shù)。

1.2 數(shù)據(jù)提取

2名作者分別從符合上述納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)中提取數(shù)據(jù)。如果出現(xiàn)分歧，由2位作者討論解決。

從每篇文獻(xiàn)中提取如下數(shù)據(jù):第一作者姓氏、發(fā)表年份、種族、肺癌組例數(shù)、對(duì)照組例數(shù)、肺癌組基因亞型(T/T、T/A和A/A)例數(shù)和對(duì)照組基因亞型(T/T、T/A和A/A)例數(shù)。如果上述項(xiàng)目任何一項(xiàng)沒有在文獻(xiàn)中報(bào)道，那么這篇文章不被納入。其中種族按亞裔和非亞裔分類。對(duì)于病例數(shù)過少的研究不被納入本研究Meta分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有的統(tǒng)計(jì)應(yīng)用STATA11.0(Stata Corporation，College Station，TX)軟件進(jìn)行分析。用比值比(odds ratios，OR)及95%置信區(qū)間(confidence intervals，CI)來計(jì)算IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。A/A純合子基因型和攜帶A等位基因的(T/A+A/A)雜合子基因型與T/T純合子基因型的OR值進(jìn)行合并計(jì)算。根據(jù)種族進(jìn)行亞組分析。用基于卡方的Q檢驗(yàn)對(duì)異質(zhì)性進(jìn)行評(píng)估［14］。當(dāng)Q檢驗(yàn)P＞0.1時(shí)表明研究間沒有異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型(Mantel-Haenszel method)對(duì)OR進(jìn)行合并計(jì)算［15］，否則用隨機(jī)效應(yīng)模型(DerSimonian and Laird method)［16］。用單向敏感性分析來評(píng)估結(jié)果的穩(wěn)定性，即每次從Meta結(jié)果中剔除一項(xiàng)研究，以反映該項(xiàng)被剔除研究對(duì)結(jié)果的影響［17］。對(duì)于潛在的發(fā)表偏倚采用log(OR)的標(biāo)準(zhǔn)誤和log(OR)為橫縱坐標(biāo)的漏斗圖進(jìn)行評(píng)估。不對(duì)稱的點(diǎn)表示可能存在的發(fā)表偏倚。漏斗圖的不對(duì)稱性用OR的自然對(duì)數(shù)作為坐標(biāo)的線性回歸方法進(jìn)行評(píng)估即Egger’s線性回歸檢驗(yàn)。其截距的意義用t檢驗(yàn)反映Egger結(jié)果(P＜0.05被認(rèn)為有顯著的發(fā)表偏倚)［18］。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

本篇Meta分析，根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)共納入6篇文獻(xiàn)，其中肺癌組3 265例和對(duì)照組3 607例［19-24］，主要特征見表1。所納入的6篇均為英文文獻(xiàn)，標(biāo)本量從231～4 260例不等，所有病例均有病理證實(shí)，其中對(duì)照組主要是健康人群。6篇文獻(xiàn)中2篇為針對(duì)亞裔人群的研究，另外4篇為非亞裔人群。

2.2 Meta 分析結(jié)果

Meta分析的主要結(jié)果見表2。合并計(jì)算所有納入研究A/A純合子和攜帶A等位基因的(T/A+A/A)雜合子與野生型純合子(T/T)的OR值，肺癌組3 265例OR=1.03(95%CI:0.92～1.14，異質(zhì)性 P=0.235)，對(duì)照組3 607例 OR=1.07(95%CI:0.96～1.19，異質(zhì)性P=0.245，圖1)。對(duì)數(shù)據(jù)按種族進(jìn)行亞組分析，發(fā)現(xiàn)在亞裔人群中攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子(OR=1.48，95%CI:1.04 ～2.11，異質(zhì)性P=0.030)和 A/A純合子(OR=1.35，95%CI:

1.02～1.92，異質(zhì)性P=0.090)與T/T純合子有著顯著的肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性。而在非亞裔人群中，無論是A/A純合子和T/T野生型純合子(OR=1.12，95%CI:0.72～1.25，異質(zhì)性P=0.284)還是攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子和野生型T/T純合子(OR=1.03，95%CI:0.92 ～1.15，異質(zhì)性 P=0.602)都沒有發(fā)現(xiàn)顯著的肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性。

表1 納入Meta分析的IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性研究主要特點(diǎn)Tab.1 Main characteristics of studies investigated the association between IL-8-251 T/A polymorphisms and lung cancer risk in the Meta-analysis

表2 Meta 分析中合并的比值比(OR)和95%置信區(qū)間(CI)Tab.2 Main results of pooled odds ratios(OR)with confidence interval(CI)in the meta-analysis

圖1 IL-8-251 T/A基因多態(tài)性(TA+AA)和TT與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的森林圖Fig.1 Forest plot(fixed-effects model)of lung cancer risk associated with IL-8-251 T/A polymorphism for(TA+AA)versus TT

2.3 敏感性分析

每次剔除Meta分析中的一項(xiàng)研究重新合并計(jì)算OR值，來觀察剔除該單個(gè)研究后的OR值是否有改變，結(jié)果證實(shí)沒有某一研究被剔除后導(dǎo)致合并后OR值發(fā)生明顯變化。

2.4 發(fā)表偏倚

用Begg’s漏斗圖和Egger’s檢驗(yàn)來評(píng)估文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚。經(jīng)Egger’s檢驗(yàn)評(píng)估發(fā)表偏倚，未發(fā)現(xiàn)明顯的發(fā)表偏倚(P=0.283)。此外，發(fā)表偏倚的漏斗圖也沒顯示不對(duì)稱性(圖2)。上述檢驗(yàn)結(jié)果未發(fā)現(xiàn)潛在的發(fā)表偏倚。

圖2 IL-8-251 T/A基因多態(tài)性(TA+AA)和TT與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的Begg’s漏斗圖Fig.2 Begg’s funnel plot of IL-8-251 T/A polymorphism and lung cancer risk for(TA+AA)versus TT

3 討論

IL-8基因位于4號(hào)染色體q13-21，包括4個(gè)外顯子、3個(gè)內(nèi)含子和鄰近的啟動(dòng)子區(qū)。這個(gè)基因的編碼序列表現(xiàn)出多種功能上的基因多態(tài)性，已知的特征有15個(gè)。研究［25］發(fā)現(xiàn)，在同樣的致癌因素暴露中一些個(gè)體對(duì)某類腫瘤存在易感性。宿主因素即參與致瘤作用的基因多態(tài)性，導(dǎo)致這種易感性的差異。因此，癌癥的基因易感性已成為目前研究的熱點(diǎn)。最近，IL-8基因多態(tài)性與多種腫瘤的發(fā)生相關(guān)性被越來越多的關(guān)注。近期，有2篇關(guān)于IL-8-251A＞T基因多態(tài)性的Meta分析［26-27］發(fā)現(xiàn)IL-8-251T/A基因多態(tài)性與胃癌、乳腺癌和鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有顯著相關(guān)性。本研究Meta分析總結(jié)了IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的數(shù)據(jù)，包括肺癌組3 265例和對(duì)照組3 607例。本研究結(jié)果顯示在全部人群中IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)沒有相關(guān)性，但是在亞裔人群中IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性顯著增加。

當(dāng)按種族進(jìn)行亞組分析［28］時(shí)，發(fā)現(xiàn)在亞裔人群中攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子和A/A純合子個(gè)體比野生型T/T純合子個(gè)體表現(xiàn)出更高的肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。而在非亞裔人群中，無論何種基因型均未發(fā)現(xiàn)與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)具有相關(guān)性。這一發(fā)現(xiàn)表明IL-8-251T/A基因多態(tài)性在某個(gè)特定種族中是肺癌發(fā)生的重要影響因素，A等位基因?qū)τ诜伟┌l(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響因種族而有所不同。種族不同反映的是遺傳背景及環(huán)境因素的不同，對(duì)于全部人群可能出現(xiàn)疾病與標(biāo)志物相關(guān)性的假陽性或假陰性結(jié)果，因此按人群特征分層研究具有重要意義。

IL-8-251T/A的A等位基因可以增加肺癌發(fā)病率的機(jī)制還不清楚。T/A單核苷酸多態(tài)性在具有251對(duì)堿基的IL-8基因的啟動(dòng)子區(qū)上游的轉(zhuǎn)錄啟始位點(diǎn)，并且體外實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)其可影響IL-8的產(chǎn)生和IL-8啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性［29-30］。幾乎先前所有的研究［30-32］都證實(shí)-251的A等位基因與較高的IL-8轉(zhuǎn)錄活性直接相關(guān)。因此，A/A基因型可能具有激活代謝誘導(dǎo)劑和致癌物質(zhì)作用。

本研究Meta分析存在局限性。第一，Meta的結(jié)果分析存在潛在的異質(zhì)性。雖然試圖通過全面的檢索策略、嚴(yán)格的納入標(biāo)準(zhǔn)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臄?shù)據(jù)提取及分析盡可能最小化異質(zhì)性的影響，但異質(zhì)性仍出現(xiàn)在幾乎所有研究間。異質(zhì)性可因?yàn)閷?duì)照組選擇、年齡分布、生存環(huán)境因素等的差異而產(chǎn)生。盡管大多數(shù)研究選擇健康人群作為對(duì)照組，但一些研究在肺癌患者的親屬或朋友中或在其他疾病的患者中選擇對(duì)照組，從而產(chǎn)生不可避免的異質(zhì)性。第二，僅納入已發(fā)表的文獻(xiàn)，那些得到不明顯的陽性或陰性結(jié)果的研究沒有被發(fā)表導(dǎo)致發(fā)表偏倚的存在。第三，本研究結(jié)果均是未修正的，如果能夠得到個(gè)人數(shù)據(jù)，可以根據(jù)年齡、種族、家族史、環(huán)境因素和生活習(xí)慣等因素對(duì)結(jié)果進(jìn)行修正，從而得到更加精確的分析結(jié)果。最后，即便觀察到種族差異，也可能是因?yàn)闃?biāo)本量少導(dǎo)致的統(tǒng)計(jì)效力不足所致。本篇Meta分析僅納入2篇亞裔人群的研究，因此所觀察到的種族差異也可能是樣本量少導(dǎo)致的偶然結(jié)果。因此，還需要進(jìn)行采用標(biāo)準(zhǔn)化、科學(xué)方法，入組同質(zhì)性肺癌患者和匹配的對(duì)照組的大樣本雙盲實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，本篇Meta分析表明IL-8-251T/A基因多態(tài)性在全部人群中與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無相關(guān)性，但是在亞裔人群中A等位基因的存在與肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)。

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