姜銀松 李新宇

[摘要] 目的 探討心臟驟停后延遲心肺復(fù)蘇對(duì)大鼠海馬病理變化的影響。方法 成年雄性SD大鼠54只，隨機(jī)分為假手術(shù)組（S組）、即刻復(fù)蘇組（A組），延遲復(fù)蘇組（B組），每組按血管穿刺后（S組）或自主循環(huán)恢復(fù)（ROSC）后（A組、B組）0.5 h斷頭取海馬。A組、B組采用窒息法致大鼠心臟驟停和心肺復(fù)蘇模型。光學(xué)顯微鏡下觀察海馬病理變化。結(jié)果 光鏡下，S組海馬神經(jīng)元表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)、分布正常，幾乎無(wú)變性、壞死神經(jīng)元；與S組比較，A組、B組海馬神經(jīng)元可見(jiàn)明顯的細(xì)胞水腫、核固縮等病理改變，且B組比A組損傷更為嚴(yán)重。結(jié)論 延遲心肺復(fù)蘇不僅降低心臟驟停大鼠ROSC成功率，亦可加重海馬組織病理?yè)p傷。

[關(guān)鍵詞] 心肺復(fù)蘇；腦損傷；自主循環(huán)恢復(fù)

[中圖分類(lèi)號(hào)] R459.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）04（a）-0022-02

雖然心臟驟停后心肺復(fù)蘇研究不斷深入[1]，自主循環(huán)恢復(fù)（restoration of spontaneous circulation，ROSC）后腦功能的預(yù)后仍是難點(diǎn)問(wèn)題[2]，心臟驟?；颊吆茈y在第一時(shí)間得到救治，血流中斷時(shí)間延長(zhǎng)致使腦組織損傷加重。為更好接近臨床并且保證大鼠心臟驟停模型成功率，本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)探討心臟驟停后延遲3 min CPR 對(duì)大鼠病理?yè)p傷的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、試劑、儀器

健康SD雄性大鼠54只，體重350-450g；MP50多參數(shù)監(jiān)護(hù)儀（德國(guó)飛利浦）；HX-200S動(dòng)物呼吸機(jī)（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 分組 隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為假手術(shù)組（S組，n=18）；即刻復(fù)蘇組（A組，n=18）：窒息5±1 min后，常規(guī)復(fù)蘇；延遲復(fù)蘇組（B組，n=18）：窒息8±1 min（心臟驟停后3 min）后常規(guī)復(fù)蘇。

1.2.2 模型制作 本實(shí)驗(yàn)參考有關(guān)文獻(xiàn)并加以改進(jìn)[3]。大鼠稱(chēng)重，3%戊巴比妥鈉（35 mg/kg）腹腔注射麻醉，仰臥固定。正中切口，暴露氣管，行氣管插管。剝離右側(cè)股動(dòng)脈，左側(cè)股靜脈，24G套管針向近心端穿刺置管后固定。連接壓力換能器。連接心電肢體導(dǎo)聯(lián)，至監(jiān)護(hù)儀正常顯示股動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓、心電圖。傷口處敷蘸生理鹽水紗布。穩(wěn)定10 min后，呼氣末氣管夾閉誘導(dǎo)窒息致心臟驟停（CA）后，進(jìn)行CPR：開(kāi)放氣道，接小動(dòng)物呼吸機(jī)（呼吸頻率80 次/min，潮氣量6 ml/kg），同時(shí)經(jīng)股靜脈推注腎上腺素20 μg/kg。

1.2.3 CA標(biāo)準(zhǔn) 心電圖呈室顫、停搏或電機(jī)械分離，股動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓<25 mmHg[4]；動(dòng)物皮膚粘膜明顯發(fā)紺。

1.2.4 ROSC標(biāo)準(zhǔn) 心電圖呈自主節(jié)律，股動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓≥60 mmHg[4]，持續(xù)時(shí)間超過(guò)10 min；動(dòng)物皮膚粘膜發(fā)紺明顯減輕。

1.2.5 標(biāo)本留取 S組按血管穿刺后0.5 h斷頭取腦；A組、B組按ROSC后0.5 h斷頭取腦。

1.2.6 檢測(cè)方法 低溫冰臺(tái)上斷頭剝離海馬后，于4%多聚甲醛中固定至少24 h。脫水、透明、浸蠟及包埋，海馬組織5 um厚切片，HE（Hematein Eosin）染色。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。組間ROSC成功率比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 ROSC成功率

S組成功率100%，A組成功率88.9%，B組成功率50%；B組與A組比較，ROSC成功率明顯下降（P<0.05）。

2.2 各組大鼠海馬組織病理觀察

S組：海馬神經(jīng)元表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)、分布、間隙正常，幾乎無(wú)變性、壞死神經(jīng)元（圖1）；A組：海馬神經(jīng)元有部分變性、壞死，病理?yè)p傷較重（圖2）；B組：海馬神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)明顯的胞核凝固、深染，胞漿溶解，存在較多壞死神經(jīng)元，病理?yè)p傷比A組更重（圖3）。

3 討論

學(xué)者們[5]對(duì)心肺復(fù)蘇ROSC患者預(yù)后相關(guān)因素進(jìn)行分析，薛繼可[6]對(duì)725例CPR患者進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)CPR開(kāi)始時(shí)間≤5 min的460例患者ROSC為140例（30.4%），CPR開(kāi)始時(shí)間>5 min的265例患者ROSC僅為47例（17.7%）。廖紅[7]采用窒息法制作CA大鼠模型，在20只大鼠CA后即刻進(jìn)行復(fù)蘇，復(fù)蘇成功率約為70%，本實(shí)驗(yàn)中，A組即刻復(fù)蘇的復(fù)蘇成功率為88.9%，可能由于實(shí)驗(yàn)條件、生理鹽水以及腎上腺素的使用不同，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中的復(fù)蘇成功率存在一定差異。本實(shí)驗(yàn)B組大鼠復(fù)蘇成功率為50%，與A組比較復(fù)蘇成功率明顯降低（P<0.05），這再次證明了心臟驟停持續(xù)時(shí)間是決定ROSC的關(guān)鍵因素之一，臨床上只有真正縮短開(kāi)始心肺復(fù)蘇的時(shí)間，才有可能根本上改善復(fù)蘇的預(yù)后。

大腦細(xì)胞尤其是海馬等組織在ROSC早期仍處于相對(duì)低灌注或再灌注損傷階段，此期大鼠海馬組織已經(jīng)發(fā)生了明顯的病理變化。觀察病理形態(tài)學(xué)改變， B組大鼠海馬病理?yè)p傷較A組更為嚴(yán)重，其機(jī)制可能與缺血時(shí)間延長(zhǎng)、缺血-再灌注損傷加重、鈣超載、興奮性氨基酸釋放增多等有關(guān)。

該實(shí)驗(yàn)表明延遲復(fù)蘇不僅能降低ROSC成功率，還能加重海馬組織病理?yè)p傷，因此，臨床上應(yīng)爭(zhēng)分奪秒地對(duì)CA患者實(shí)施CPR，盡快使腦組織恢復(fù)血供，真正改善ROSC患者的預(yù)后。

[參考文獻(xiàn)]

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[7] 廖紅，倪新莉，井蕊等.肝素對(duì)心肺復(fù)蘇大鼠腦損傷的影響[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2010，32（10）：873-874.

（收稿日期：2013-12-28）