馬力?張靜?韓志梅?曲東霞

【摘要】 目的 探討乙二胺四乙酸（EDTA）依賴(lài)性假性血小板減少癥幾種檢測(cè)方法的可靠性。方法 對(duì)10例EDTA依賴(lài)性假性血小板減少癥病例采用XE-2100血液分析儀， 觀(guān)察不同條件（不加抗凝劑、EDTA、枸櫞酸鈉、肝素鋰）在不同時(shí)間段測(cè)定血小板的變化。結(jié)果 5 min即刻檢測(cè)， 各種抗凝劑血小板數(shù)值均正常。30 min后EDTA抗凝標(biāo)本血小板數(shù)值明顯下降。部分枸櫞酸鈉、肝素鋰標(biāo)本血小板數(shù)值也有不同程度下降。結(jié)論 對(duì)EDTA依賴(lài)性假性血小板減少癥可采取儀器旁即刻檢測(cè)方法， 而枸櫞酸鈉、肝素鋰檢測(cè)方法不可取。

【關(guān)鍵詞】 乙二胺四乙酸；血小板計(jì)數(shù)；血細(xì)胞分析；假性血小板減少癥

假性血小板減少是指血小板發(fā)生體外聚集而致血小板減少。由于血小板聚集成團(tuán)， 使血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀無(wú)法分辨血小板團(tuán)與單個(gè)血小板， 致使檢測(cè)的血小板計(jì)數(shù)較實(shí)際血小板數(shù)值低出許多， 導(dǎo)致臨床誤診誤治。據(jù)報(bào)道， 假性血小板減少與抗凝劑乙二胺四乙酸（EDTA）有明顯相關(guān)性[1]。因?yàn)閲?guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（ICSH）1993年確定EDTA為血細(xì)胞分析的首選抗凝劑并廣泛應(yīng)用， 因此EDTA依賴(lài)性假性血小板減少癥（ethylenediaminetetraacetic acid-dependent pseudo-thrombocytopenia， EDTA-PTCP）發(fā)生率明顯增加。本研究旨在探討不同抗凝劑不同時(shí)間段條件下， 糾正EDTA-PTCP血小板檢測(cè)的最佳方法， 為減少該病誤診誤治做出一點(diǎn)貢獻(xiàn)。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 患者標(biāo)本來(lái)源于本院2005～2014年門(mén)診與住院患者診斷EDTA依賴(lài)性假性血小板減少癥的10例患者。其中男6例， 女4例， 發(fā)病年齡：20～75歲， 其中4例為門(mén)診常規(guī)體檢就診， 3例原發(fā)性高血壓， 1例冠心病， 1例左輸尿管結(jié)石， 1例左腎癌術(shù)后。10例患者均為常規(guī)血細(xì)胞分析檢查發(fā)現(xiàn)血小板明顯減少， 但均無(wú)臨床出血傾向。白細(xì)胞、血紅蛋白、凝血指標(biāo)均正常。經(jīng)即刻采血及外周血涂片檢查明確診斷為EDTA-PTCP。

1. 2 儀器與試劑 Sysmex-2100型全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑和質(zhì)控品。

1. 3 方法 采患者靜脈血， 分別置于無(wú)任何抗凝劑管、EDTA抗凝管、枸櫞酸鈉抗凝管、肝素鋰抗凝管內(nèi)， 分別于5、30、60、120 min用Sysmex-2100型分析儀檢測(cè)血小板數(shù)值。

1. 4 血涂片 EDTA抗凝血（30、120 min）、患者新鮮耳血涂片各1張自然晾干， 用瑞-姬氏染色， 顯微鏡觀(guān)察血小板聚集情況。

2 結(jié)果

2. 1 不同時(shí)間， 4種方法測(cè)定血小板計(jì)數(shù) 5 min即刻儀器旁檢測(cè)：不加抗凝劑組， EDTA組， 枸櫞酸鈉組， 肝素鋰組均顯示血小板計(jì)數(shù)正常。（30～120 min） EDTA組血小板均減少， 并且隨時(shí)間延長(zhǎng)血小板減少程度增加。例4在枸櫞酸鈉、肝素鋰組30、60、120 min均出現(xiàn)血小板減少， 例6在枸櫞酸鈉組（60、120 min）出現(xiàn)血小板減少。例10在肝素鋰組（30、60、120 min）出現(xiàn)血小板減少。見(jiàn)表1。

2. 2 血涂片檢查 所有病例新鮮耳血涂片均可見(jiàn)血小板散在或小簇狀易見(jiàn)。EDTA 30 min時(shí)涂片可見(jiàn)體尾部血小板簇狀聚集， 片尾部呈小片狀聚集。120 min后涂片血小板在片尾部均可見(jiàn)大片狀聚集。

3 討論

文獻(xiàn)報(bào)道EDTA-PTCP的發(fā)病率約為0.07%～0.21%[1]， 且隨著EDTA抗凝劑在血常規(guī)檢查中的廣泛應(yīng)用， 發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。EDTA-PTCP的發(fā)生原因可能與以下機(jī)制有關(guān)：抗體介導(dǎo)的血小板聚集；血小板衛(wèi)星現(xiàn)象；抗磷脂抗體[2]等。已證實(shí)大多數(shù)假性血小板減少的患者抗血小板抗體作用靶點(diǎn)是GPIIb/IIIa[3]。正常情況下， 血小板膜抗原表位隱藏在血小板膜GPIIb的亞單位中， 而鈣離子螯合劑改變GPIIb/IIIa的分子構(gòu)象， 引起血小板膜糖蛋白的暴露及分子修飾， 進(jìn)而被抗血小板抗體識(shí)別， 結(jié)合， 引起血小板聚集。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[4， 5]， 初步懷疑EDTA-PTCP的患者， 許多醫(yī)院喜歡換用枸櫞酸鹽抗凝劑或肝素抗凝劑重新檢測(cè)。EDTA是最常見(jiàn)的鈣離子螯合劑， 可以引起EDTA-PTCP。而其他弱的鈣離子螯合劑抗凝劑如枸櫞酸鹽類(lèi)也可以引起血小板體外聚集成團(tuán)， 導(dǎo)致假性血小板減少。另外肝素能引起血小板聚集及腫脹， 在計(jì)數(shù)時(shí)， 由于其體積較大， 會(huì)被儀器誤認(rèn)為其他細(xì)胞而導(dǎo)致血小板減少。本研究20%的病例（每組2例）經(jīng)枸櫞酸鹽、肝素抗凝后， 血小板數(shù)值均有不同程度的下降。與胡先泳等[6]報(bào)道相符。因此， 作者認(rèn)為對(duì)于懷疑EDTA-PTCP患者， 不應(yīng)更換枸櫞酸鹽或肝素類(lèi)抗凝劑再次檢測(cè)， 而應(yīng)該用不加任何抗凝劑管的全血做儀器旁即刻檢測(cè)， 則血小板數(shù)值比較準(zhǔn)確。

EDTA-PTCP可見(jiàn)于許多疾病[7-9]， 如高血壓、高血脂、糖尿病、自身免疫性疾病、肝病、腫瘤、膿毒血癥， 隨著病情控制， 血小板可逐漸恢復(fù)正常， 也可見(jiàn)于正常人。鄺妙歡等[8]報(bào)道， 腫瘤患者中EDTA-PTCP發(fā)生與性別、合并常見(jiàn)病、腫瘤類(lèi)型、治療方式可能無(wú)關(guān)。本研究中10例EDTA-PTCP患者患有心臟病、腫瘤等疾病， 也有正常人， 同時(shí)無(wú)性別差異， 與上述報(bào)道相符。

將EDTA-PTCP的血液制品輸給受血者， 后者血小板仍可獲得滿(mǎn)意提升[10]， 證明EDTA-PTCP的良性病程。因此， EDTA-PTCP本身無(wú)臨床意義， 關(guān)鍵要盡早診斷， 將其與其他血小板減少進(jìn)行鑒別， 避免不必要的檢查與治療。文獻(xiàn)報(bào)道中對(duì)多例EDTA-PTCP患者行骨髓穿刺檢查， 予血小板輸注， 甚至予大劑量糖皮質(zhì)激素沖擊治療， 增加患者的身心痛苦及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此接診一個(gè)血小板明顯減少的患者， 應(yīng)仔細(xì)詢(xún)問(wèn)病史及查體， 如皮膚有無(wú)瘀點(diǎn)、瘀斑， 有無(wú)臨床出血表現(xiàn)， 臨床表現(xiàn)與血小板減少程度是否相符等。如臨床無(wú)出血表現(xiàn)， 而血小板減少明顯者， 需要考慮EDTA-PTCP的診斷。endprint

最后建議臨床上對(duì)無(wú)任何出血傾向而血小板減少明顯患者， 采取以下應(yīng)對(duì)措施：①警惕EDTA-PTCP的發(fā)生， 避免臨床誤診誤治。②疑似EDTA-PTCP患者可在儀器旁， 即刻采血直接行血小板計(jì)數(shù)。不建議更換枸櫞酸鹽或肝素抗凝劑重復(fù)采血。③血常規(guī)做涂片染色， 加EDTA抗凝劑者可見(jiàn)片尾大量血小板聚集， 不加抗凝劑者可見(jiàn)血小板散在或小堆簇狀存在。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2014-05-06]endprint

最后建議臨床上對(duì)無(wú)任何出血傾向而血小板減少明顯患者， 采取以下應(yīng)對(duì)措施：①警惕EDTA-PTCP的發(fā)生， 避免臨床誤診誤治。②疑似EDTA-PTCP患者可在儀器旁， 即刻采血直接行血小板計(jì)數(shù)。不建議更換枸櫞酸鹽或肝素抗凝劑重復(fù)采血。③血常規(guī)做涂片染色， 加EDTA抗凝劑者可見(jiàn)片尾大量血小板聚集， 不加抗凝劑者可見(jiàn)血小板散在或小堆簇狀存在。

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