張英俊

摘要：

目的：研究并探討在在乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷中采用快速免疫組化技術(shù)診斷的應(yīng)用價(jià)值，以及采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞是否具有臨床的可行性，科學(xué)性，以及安全性。方法：將80例乳腺腫瘤患者隨機(jī)分為觀察組和對照組，觀察組采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)，對照組采用常規(guī)免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)。將兩種效果進(jìn)行分析和比較，并將這些資料進(jìn)行回顧性分析研究。結(jié)果：采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞在30分鐘之內(nèi)均完成了檢測，而且還有兩種抗體的陽性表達(dá)結(jié)果，都是比較明確和定位可靠的。另外觀察組快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)的檢測結(jié)果的陽性率以及陽性強(qiáng)度均高于對照組中的用常規(guī)免疫組化技術(shù)檢測乳腺腫瘤細(xì)胞。結(jié)論：在乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷中采用快速免疫組化技術(shù)具有很高的應(yīng)用價(jià)值，意義也是非常巨大的，另外這種診斷方法也是具有極高的臨床的可行性，科學(xué)性，以及安全性。

關(guān)鍵詞：快速免疫組化技術(shù)；乳腺腫瘤；細(xì)胞學(xué)；應(yīng)用分析；診斷

【中圖分類號】

Q2-06 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）05-0236-02

細(xì)胞學(xué)診斷的特點(diǎn)是將成塊組織或者是非成塊的組織以及液體標(biāo)本制成涂片，并將所得到的在光鏡下觀察。免疫組化技術(shù)：這種技術(shù)所花的實(shí)驗(yàn)的時(shí)間比較的長，一般需要4到20個(gè)小時(shí)，因此這種技術(shù)目前已經(jīng)難以滿足快速的診斷的需求。而采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞顯得尤為重要。對此我醫(yī)學(xué)院做出以下研究，將兩種效果進(jìn)行分析和比較，并將這些資料進(jìn)行回顧性分析研究?，F(xiàn)將研究成果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料： 選取80例乳腺腫瘤患者，作為研究對象。將研究對象隨機(jī)分為兩組，觀察組和對照組。觀察組的患者為40例，觀察組采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)。乳腺腫瘤患者的年齡在35～65歲之間，平均年齡為48.2±8.6歲?；颊叩牟↓g為1.5～4年之間，平均病齡為0.7±1.2年。對照組的患者也為40例，對照組采用常規(guī)免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞學(xué)。乳腺腫瘤患者年齡在35～65歲之間，平均年齡為34.2±9.6歲，患者的病齡為1.5～8年之間，平均病齡為2.5±1.2年。研究中的所有患者均為女性。

1.2 快速免疫組化技術(shù)檢測細(xì)胞學(xué)圖片的方法： 1將脫蠟切片并放到水中，并使用PAS 沖洗，沖洗次數(shù)為2到3次，每次為15分鐘。 2.在封閉內(nèi)源性過氧化物酶中使用新配置的濃度為0.3%的 H2O2^[1]，放在23°的地方，持續(xù)時(shí)間為30 分鐘。 3.降低非特異性著色的使用，并將正常血清稀釋到原來濃度的1/20，將稀釋后的血清放在溫度為23°的地方，持續(xù)時(shí)間為30分鐘。 4 增加聚合物增強(qiáng)劑，將其放在溫度為37°的地方，持續(xù)時(shí)間為5分鐘。并使用PBS 沖洗，沖洗次數(shù)為2到3次，每次為15分鐘。5 增加酶標(biāo)抗鼠聚合物，將其放在溫度為37°的地方，持續(xù)時(shí)間為5分鐘。并使用PBS 沖洗，沖洗次數(shù)為2到3次，每次為15分鐘。6使用DAB顯示劑，將其放在溫度為37°的地方進(jìn)行染色，持續(xù)時(shí)間為1分鐘。并使用新配置的濃度為0.3%的 H2O2來沖洗，沖洗次數(shù)為2到3次，每次為5分鐘。7使用Mayer 蘇木精復(fù)染胞核15分鐘，并將其放在溫度為45°的水中，等到顏色變?yōu)樗{(lán)色即可。

1.3 快速免疫組化技術(shù)檢測細(xì)胞學(xué)圖片的注意事項(xiàng)：1在實(shí)驗(yàn)過程中必須要嚴(yán)格控制沖洗的次數(shù)以及沖洗的時(shí)間，這樣做是為了防止非特異性背景染色。2只有當(dāng)PBS完成干了之后，才可以添加試劑。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：統(tǒng)計(jì)學(xué)處理的所有數(shù)據(jù)均按照SPSS110^[2]的軟件進(jìn)行過處理。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P<0.05

2 結(jié)果

2.1 表1 快速免疫組化技術(shù)檢測的結(jié)果 [n（%）]

注：*標(biāo)注具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義（P<0.05）。

2.2使用快速免疫組化技術(shù)染色的結(jié)果比常規(guī)免疫組化技術(shù)染色的圖片結(jié)果更加的清晰，也沒有干擾信號。另外快速免疫組化技術(shù)染色的效果和常規(guī)免疫組化技術(shù)染色的背景差不多。

3 討論

3.1 快速免疫組化技術(shù)染色的特點(diǎn)： 1快速免疫組化技術(shù)是在原有的ENVISION的基礎(chǔ)上改進(jìn)的，因此具有靈敏度比較高的特點(diǎn)，另外它對常用抗體的檢測只有2個(gè)步驟。比較的方便。2快速免疫組化技術(shù)是將聚合物作為連接物的，因此被認(rèn)為是最新一代的免疫組化非生物素檢測的系統(tǒng)。3通過將過氧物酶和抗兔，抗鼠的LGC分子相聚合，使得抗原體相互結(jié)合的信號得到了擴(kuò)大，最終使得免疫組化技術(shù)染色的圖片的效果更加的清晰，也使核定位更加的明確^[3]。4過氧物酶和抗兔，抗鼠的LGC分子相聚合后，導(dǎo)致了分子進(jìn)一步的變大，再加上聚合物增加劑的使用，使大分子的聚合物膜結(jié)合通道得到了打開，從而使其吸附能力得到了加強(qiáng)，更加牢固。這也是快速免疫組化技術(shù)可以在30 分鐘內(nèi)完成檢測的原因^[4]。

3.2 快速免疫組化技術(shù)的應(yīng)用： 免疫組化技術(shù)所花的實(shí)驗(yàn)時(shí)間比較長，一般需要4到20個(gè)小時(shí)，因此這種技術(shù)目前已經(jīng)難以滿足快速的診斷的需求。而采用快速免疫組化技術(shù)來診斷乳腺腫瘤細(xì)胞顯得尤為重要^[5]。1通過快速免疫組化技術(shù)為患者的病例診斷提供了指標(biāo)，也進(jìn)一步提高了診斷乳腺腫瘤細(xì)胞的準(zhǔn)確率。2確定了乳腺腫瘤的分化程度。3通過診斷，為臨床提供了治療的方案。4指導(dǎo)乳腺腫瘤的治療等等。

參考文獻(xiàn)

[1] 周小鴿.免疫組織化學(xué)染色的干擾因素及其處理[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2006，22（4）：389～391

[2] 何沁，徐華.乳腺腫瘤冷凍切片診斷中快遞ELIVISION技術(shù)的價(jià)值[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2007，23（5）：553～6

[3] 孟冬婭，牛景陽，徐亮.血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞5分類法原理[J].沈陽部隊(duì)醫(yī)藥，2010，23（4）：277-279.

[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：132-135.

[5] 朱麗丹，陳小劍，干素娥.血細(xì)胞分析儀檢測漿膜腔積液細(xì)胞數(shù)的初探[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2011，22（22）：131.