陶鴿如 劉賢勇 索 勛

(中國農業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 100193)

兔球蟲病是由艾美耳屬Eimeria球蟲引起的、嚴重危害養(yǎng)兔業(yè)的寄生蟲病。各品種兔均易感，斷奶后至16周齡的幼兔尤為敏感(Sherkovetal., 1986)?；疾∽型脴O易繼發(fā)感染兔瘟病毒、產氣莢膜梭菌、大腸桿菌、巴氏桿菌等，使幼兔發(fā)育受阻，甚至大批死亡；而耐過仔兔常出現生長停滯，并成為污染源，致使兔場持續(xù)感染，造成巨大的經濟損失(Jingetal., 2012)。

兔球蟲病的藥物防治始于1942年，有學者利用磺胺類藥物(sulfonamides)、氯苯胍(robenidine)等對自然感染球蟲的家兔進行治療。雖然抗兔球蟲藥物的選擇可一定程度上參考雞球蟲病藥物(其病原均為艾美耳屬球蟲)，但經多年的研究發(fā)現，一些藥物雖可以有效防治雞球蟲病，但對兔球蟲病的防治效果卻不容樂觀，如砒啶類(Peetersetal., 1980；Joyneretal., 1983)；或者對家兔的安全使用范圍較窄，容易造成家兔中毒甚至死亡，如馬杜拉霉素(maduramicin) (Martinoetal., 2009)。因此，針對兔球蟲病的藥效試驗對臨床用藥更具有指導意義。

本文介紹了國內外兔球蟲病藥物防治的研究方法與成果，綜合論述了不同藥物臨床使用的優(yōu)缺點，旨在對實踐中合理選擇藥物、制定給藥程序提供建議。

1 國內外常用抗兔球蟲藥物

1.1 化學合成藥物

1.1.1 磺胺類：磺胺類藥物具有水溶性好、廣譜、高效等特點。其化學結構與對氨基苯甲酸(PABA)類似，可競爭性與二氫葉酸合成酶結合，影響二氫葉酸的合成，從而抑制細菌、原蟲生長繁殖。常用的磺胺類藥物包括磺胺嘧啶(sulfadiazine)、磺胺二甲嘧啶(sulfamethazine)、磺胺氯吡嗪鈉(sulfachloropyrazin sodium )、磺胺噁喹啉(sulfaquinoxaline)(Attaetal., 1999)、磺胺六甲氧嘧啶等(sulfamonomethoxine)。Horton等(1947)利用磺胺類藥物治療斯氏艾美耳球蟲Eimeriastiedae引起的兔肝球蟲病得到了良好的效果。蔣金書等(1981)驗證了1 g/kg磺胺六甲氧嘧啶與200 mg/kg磺胺二甲嘧啶對混合型兔球蟲病的良好治療效果。盡管磺胺類藥物廣譜、高效，但由于其毒性較大，長期高濃度服用會導致畜禽中毒(邢蘭君, 2005；王天有等, 2014)，因此，建議磺胺類藥物只作為治療用藥。另外，磺胺類藥物的代謝產物會隨尿液排出污染環(huán)境，存在生態(tài)安全隱患。

1.1.2 三嗪類：三嗪類藥物是一類新型、高效、廣譜的抗球蟲藥物，主要包括地克珠利(diclazuril)、妥曲珠利(toltrazuril)、帕托珠利(ponazuril)等，廣泛應用于雞球蟲病的防治。

1989年，地克珠利作為抗雞球蟲病藥物開始投入使用(Vanparijsetal., 1989)。同年，Peeters等(1989)報道了地克珠利抗兔球蟲感染的良好效果：飼料中添加1 mg/kg地克珠利即可治療感染了腸艾美耳球蟲E.intestinalis、大型艾美耳球蟲E.magna、穿孔艾美耳球蟲E.perforans的家兔，其增重和飼料轉化都與未感染組相當；即便是0.5 mg/kg的低濃度添加，也可一定程度地預防和治療兔球蟲病(Peetersetal., 1989)。在斯氏艾美耳球蟲潛隱期內，以1 mg/kg的濃度連續(xù)給藥7 d即可有效降低卵囊排出量，同時家兔的肝臟功能及生長性狀呈良好趨勢(周文江等, 1998)。近年來國內的研究成果顯示，地克珠利的抗兔球蟲效果良好，1～3 mg/kg的添加濃度即可有效預防和治療兔球蟲病(艾必燕等, 2005; 吳昌標, 2006；劉以民等, 2008;林青等, 2012;陳賽娟等, 2014)。此外，地克珠利還可通過皮下給藥的方式，以0.5、1或2 mg/kg體重的預防性給藥劑量，4 mg/kg體重的治療性給藥劑量防治肝球蟲病(Panetal., 2008)，一定程度避免長期給藥產生的耐藥性。

妥曲珠利是德國拜耳公司研發(fā)的抗球蟲藥物，商品名百球清(Baycox?)，具有廣譜、高效、不易產生耐藥性等優(yōu)點，但是價格昂貴，使用并不廣泛(馮秀娟, 2005)。研究表示，在飲水中添加15～25 mg/kg妥曲珠利，可預防和治療腸、肝球蟲病，基本消除兔球蟲病對家兔生產性能的影響(Singlaetal., 2000; 宋宏曉等, 2014)；即便是僅在兔球蟲裂殖生殖末期給藥，也對兔球蟲病具有一定的治療效果(Peetersetal., 1986)。

帕托珠利于2001年在美國上市，由拜耳公司開發(fā)，商品名為Marquis，主要用于治療原蟲引起的哺乳動物中樞系統(tǒng)疾病。帕托珠利是妥曲珠利在生物體內的代謝產物，也是妥曲珠利的藥效形式(張云飛等, 2011)。國內對帕托珠利抗兔球蟲效果的研究較少。根據李媛(2013)的報道，20 mg/kg的預防性給藥劑量、30 mg/kg的治療性給藥劑量可治療人工感染腸艾美耳球蟲引起的兔球蟲病。

1.1.3 胍類: 氯苯胍是一種預防性廣譜抗球蟲藥，可通過干擾球蟲蛋白質代謝，抑制其在宿主體內生長繁殖(才鳳峰, 2005)。一項研究顯示，自然感染腸艾美耳球蟲、大型艾美耳球蟲、中型艾美耳球蟲E.media、穿孔艾美耳球蟲的家兔，飼喂氯苯胍16 d之后停止排出卵囊；利用33 mg/kg的氯苯胍可大幅度降低患病兔的死亡率和卵囊排出量，體重增加和飼料轉化率都有所保證(Peetersetal., 1980)。然而，在國內的一些藥效對比實驗中，氯苯胍的抗兔球蟲效果卻表現平平，不能夠為家兔提供足夠的保護(吳昌標, 2006;艾必燕等, 2005; 劉以民等, 2008;林青等, 2012;陳賽娟等, 2014) ，可能是因為氯苯胍較易形成耐藥性，現階段使用劑量已不足以抵抗兔球蟲的感染。

1.1.4 吡啶類: 氯羥吡啶(clopidol)是一種廣譜的抗球蟲藥物，于1969年開始被用于預防和治療雞球蟲病，但其容易產生耐藥，且對艾美耳屬球蟲各蟲種抑制效果不同(Siegmannetal., 1969; 才鳳峰, 2005)。國內對氯羥吡啶治療兔球蟲病的效果褒貶不一，有學者認為其高效、低毒(俞海等, 1985)，也有學者認為抗兔球蟲效果劣于其他藥物(Peetersetal., 1980; 顏潔邦等, 1987; 周文江等, 1998; 林青等, 2012)。因此氯羥吡啶常與其他抗球蟲藥物混合使用，如樂百克(Lerbek)、可愛丹。

1.2 聚醚離子載體類抗生素

聚醚離子載體類抗生素是一類高效、低毒、廣譜的抗球蟲藥，通過破壞細胞內離子平衡從而達到殺滅病原的效果，可持續(xù)作用于球蟲的無性生殖和有性生殖階段。常見的聚醚離子類抗生素包括莫能菌素(monensin)、鹽霉素(salinomycin)、馬杜拉霉素等。

莫能菌素是第一個投放市場的抗生素類抗球蟲藥，從肉桂地鏈霉菌Streptomycescinnamonesis的培養(yǎng)物中獲得。蔣金書等(1991)利用40 mg/kg即達到了上述效果，但當劑量增加時，飼料的適口性差，對家兔的體增重有一定的影響。

鹽霉素來源于白色鏈霉菌Streptomycesalbus，由日本Agribio公司生產，商品名Biocox?。一項研究稱，利用50 mg/kg的鹽霉素、莫能菌素、沙拉里菌素(lasalocid)，均可治療兔球蟲??；其中，鹽霉素對卵囊排出的抑制作用最強(Pakandl, 1986)。甲基鹽霉素(narasin)來源于金色鏈霉菌S.aureofaciens的發(fā)酵產物，結構上比鹽霉素多一個甲基，商品名Monteban?。給家兔飼喂8～12 mg/kg的甲基鹽霉素可獲得最佳的增重和飼料轉化率；飼喂12～24 mg/kg 可達到最佳除蟲效果；劑量過高會影響家兔的生長(Peetersetal., 1981)。

馬杜拉霉素是來源于紅足分枝菌Actinomadurarubra的四苯醌類，商品有抗球王、杜球等。5～6 mg/kg的添加劑量可很好的預防和治療雞球蟲病，但家兔對該藥較為敏感，超過安全用藥范圍可致家兔中毒甚至死亡。國內外已有多次馬杜拉霉素致家兔中毒的報道(石傳林, 1999; 王春和和孟紅, 2000; Martinoetal., 2009)，要謹慎使用。

1.3 混合制劑

依據聯(lián)合用藥的策略，將多種抗球蟲藥物組合形成的復方制劑比單一成分抗球蟲效果更佳。利用各組分在抗球蟲譜、對球蟲作用峰期的互補，商品化混合制劑有更強的抗球蟲效力。目前，混合制劑確切的配伍協(xié)同機理尚不明確，需經大量的臨床試驗才能確定各組分最佳配伍比例。目前較成功的混合制劑有：加強安保樂(Amprol Plus?)，主要成分為氨丙啉(amprolium)、乙氧酰胺苯甲酯(ethopabate)；樂百克，主要成分為氯羥吡啶、芐氧喹甲酯(methyl benzoquate)；猛安(Maxiban?)，主要成分為甲基鹽霉素、尼卡巴嗪(nicarbazin)；球菌凈，主要成分為鹽酸氨丙啉(amprolium hydrochloride)、磺胺喹惡啉 (才鳳峰, 2005)。一項研究對比了磺胺喹惡磷、氯苯胍、芐氧喹甲酯、氯羥吡啶和樂百克治療家兔肝球蟲病的療效，結果表明樂百克效果突出(Joyneretal., 1983)。然而，目前國內很多廠家并沒有完成足夠的臨床試驗證明復方制劑的藥效及副作用，僅僅將兩種甚至幾種藥物按推薦劑量混合在一起，其安全性、穩(wěn)定性、有效性沒有保證?；旌现苿┑拈_發(fā)和試制仍任重道遠。

1.4 中草藥

近年來，利用傳統(tǒng)中草藥預防和治療兔球蟲病的研究愈來愈多。常用的抗兔球蟲中藥成分包括常山Dichroafebrifuga、青蒿Artemisiaannua、葫蘆茶Tadehagiohashi、白頭翁Anemonechinensis等(杜紹范等, 1997; 吳昌標, 2006; 晉愛蘭等, 2009)。雖然利用中藥防控兔球蟲病的報道頻頻出現，但僅僅是經驗性使用，研究方法還停留在治療效果的描述階段，其藥物作用機理、有效成分的提取等針對性研究尚未開展，存在大量未知因素。鑒于此，中藥防控的方法應謹慎采用。

2 兔球蟲病藥物防治現存的問題

隨著抗兔球蟲藥物的廣泛使用，及我國兔業(yè)養(yǎng)殖水平的不斷提高，兔球蟲病對養(yǎng)兔業(yè)造成的危害有所減輕(Panetal., 2008; Jingetal., 2012)。但由于諸多因素的存在，并沒有完全消除其對生產造成的損失，隱患仍舊存在。

2.1 缺乏正確的藥物評估

縱觀國內外有關抗兔球蟲藥物防治的研究，我們發(fā)現，很多研究中由于種種人為因素，導致其實驗數據的真實性無法保證，因而各研究小組所得結果不盡相同。這些不確定因素包括:(1)實驗動物：未對實驗動物的用藥背景做詳細調查，例如，在實驗動物的購買、使用之前若已長期飼喂了某種抗球蟲藥，且形成了耐藥性，則該種藥物的藥效評價必然不可信。(2)球蟲病是自限性疾病(Levine, 1963)，感染一段時間后，即可完全排出卵囊，而一些研究者將這種卵囊排出的減少歸結為藥物作用。在藥效實驗中，排除相關因素，獲得真實準確的一手資料，才能對抗兔球蟲藥物進行可靠的評價。

2.2 藥物殘留問題備受關注

藥物及其代謝產物在食用動物體內的殘存，一直是養(yǎng)殖業(yè)關注的焦點(Pakandl, 2009)。發(fā)達國家對食品動物的藥物使用有著嚴格的規(guī)定，對于抗球蟲藥物，歐盟禁用喹乙醇(olaquindox)、二硝托胺(dinitolmide)、氯羥吡啶、氨丙啉和尼卡巴嗪，日本禁用氯羥吡啶、磺胺類、尼卡巴嗪和乙胺嘧啶(pyrimethamine)。加強獸藥管理、控制藥物殘留，是提高我國食品衛(wèi)生安全水平的有效手段。根據我國農業(yè)部公告第278號規(guī)定，使用部分藥物必須在畜禽許可屠宰或其產品(蛋、乳)上市之前間隔一定的時間。其中，對常用抗球蟲藥如地克珠利預混劑、鹽霉素鈉預混劑、磺胺二甲嘧啶等都有明確的休藥期規(guī)定。在利用藥物防治兔球蟲病時，藥物的選擇和使用必須注意以下幾點原則：(1)嚴格使用獸藥管理機構認定的抗球蟲藥物；(2)提高獸藥安全意識，積極關注獸藥安全評價；(3)遵循正確的藥物使用策略，嚴格實行休藥期規(guī)定。

2.3 耐藥蟲株在生產中不斷出現

抗球蟲藥物的耐藥性一直是養(yǎng)殖人員面臨的最嚴峻的問題。早在1989年，Peeters等(1989)的報道中就出現了對氯苯胍耐受的大型艾美耳球蟲蟲株。長期低劑量使用單種藥物，是耐藥蟲株出現的直接原因。由于養(yǎng)殖人員無法及時、準確地辨別球蟲何時對何種藥物產生何種程度的耐藥性，導致有些已產生耐藥性的藥物仍在使用；同時與該藥結構相似或作用機理相同的藥物產生交叉耐藥性，成為兔球蟲病爆發(fā)的隱患。一項調查顯示，在使用抗球蟲藥物的兔場中，感染率仍然高達80%(閆文朝等, 2010)。據吳昌標的報道，就抗兔球蟲藥耐藥性形成的速度而言，喹諾酮類產生耐藥性的速度最快，其次是氯羥吡啶，中等速度的有氯苯胍、磺胺類，較慢的有氨丙啉、尼卡巴嗪，離子載體類藥物的耐藥性形成最慢(吳昌標, 2007)。2012年的一項報道顯示了國內抗兔球蟲藥物使用與感染率的關系(Jingetal., 2012)，根據調查結果可以看出，雖然各兔場所處地理環(huán)境不同，衛(wèi)生條件亦有所差異，但聯(lián)合用藥的效果優(yōu)于單獨用藥。因此，臨床用藥時，必須遵循短時間內有計劃地輪換或穿梭使用不同種類抗球蟲藥的原則(張海芬等, 2009)，最大限度地控制耐藥蟲株的出現，消除兔球蟲病爆發(fā)隱患。

2.4 新藥開發(fā)困難

耐藥性的產生促使人們探求非傳統(tǒng)藥物抗球蟲的療效，并研發(fā)新的藥物品種。但由于對球蟲藥物靶點的研究尚不深入，對藥物殘留和環(huán)境衛(wèi)生的要求愈來愈高，加之新藥研發(fā)成本巨大，而使得新藥開發(fā)相當困難(吳昌標, 2007)。例如，一項報道稱，將5 g/kg的二氟甲基鳥氨酸(difluoromethylornithine)——一種最初用來治療布氏岡比亞錐蟲Trypanosomabruceigambiense藥物添加于飲水中，可使家兔的卵囊排出總量、腸道病變明顯降低，從而治療腸、肝兔球蟲病(Sanetal., 1988)。將適量的大蒜素添加至飼料中，可預防肝球蟲病(Toulahetal., 2007)。沒藥Commiphoramyrrha，一種橄欖科植物的干燥樹脂及其商品化提取物Mirazid亦具有抗球蟲效果(Baghdadietal., 2010)。然而，這些新型藥物的抗兔球蟲效果有限，并沒有真正投入到生產實踐中。

3 總結與展望

兔球蟲病是感染率最高的兔病之一，依賴藥物的防治手段并未徹底消除其對養(yǎng)兔業(yè)的影響，藥物殘留問題、耐藥蟲株的不斷出現給我們帶來了巨大的挑戰(zhàn)。我們必須規(guī)范抗兔球蟲藥物的使用，總結藥效試驗、生產實踐中的問題與經驗，更加合理地、安全地利用抗兔球蟲藥物；同時，積極開發(fā)以弱毒蟲株為基礎的兔球蟲病活卵囊疫苗，最大限度地控制兔球蟲病帶來的經濟損失，推動我國養(yǎng)兔業(yè)的迅速發(fā)展。