郭 豐，孫 華，郁敏燕，宋 健，馬曉琳，張美云

（南通大學(xué)附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，江蘇226001）

精液質(zhì)量對宮腔內(nèi)人工授精妊娠結(jié)局的影響

郭 豐，孫 華，郁敏燕，宋 健，馬曉琳，張美云

（南通大學(xué)附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，江蘇226001）

目的：研究宮腔內(nèi)人工授精（IUI）精液質(zhì)量對IUI妊娠結(jié)局的影響。方法：不孕癥夫婦151對共進(jìn)行294個(gè)IUI治療周期，分析精子正常形態(tài)率和前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)對妊娠率的影響。結(jié)果：294周期基礎(chǔ)正常形態(tài)精子＜4%組與>4%組比較，妊娠率分別為7.86%和17.1%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；294周期精液處理后前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)＜10×106、～30×106和＞30×106的3組妊娠率分別為16.2%、15.1%和9.3%。前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)＞30×106時(shí)妊娠率下降，但與其他兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：精子正常形態(tài)率和前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)影響IUI妊娠率。

不孕癥；宮腔內(nèi)人工授精術(shù)；前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)；精子形態(tài)；妊娠率；Diff-Quik染色法

宮腔內(nèi)人工授精術(shù)（IUI）作為一種簡單、經(jīng)濟(jì)、無創(chuàng)技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于不孕患者的助孕。IUI妊娠率在10%~20%，如何提高IUI妊娠率是臨床關(guān)注焦點(diǎn)。影響IUI妊娠率的因素有不孕癥原因、促排卵方案、精液質(zhì)量、精子處理方法以及授精時(shí)機(jī)等。我院生殖醫(yī)學(xué)中心2013年3月—2014年10月收治不孕癥夫婦151對294個(gè)IUI治療周期，本研究旨在通過分析精子形態(tài)和處理后前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)對IUI妊娠率的影響，作為IUI患者提高妊娠率的參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 不孕癥夫婦151例，女方年齡21~ 40歲，平均年齡（28.3±3.3）歲、男方年齡20~40歲，平均年齡（29.2±3.8）歲。不孕年限1~10年，平均不孕年限（3.14±1.96）年。共接受夫精人工授精294周期，所有患者均符合IUI適應(yīng)證并經(jīng)完善術(shù)前檢查無禁忌證。輸卵管碘油造影或?qū)m腔鏡下插管通液至少一側(cè)輸卵管通暢。

1.2 方法

1.2.1 排卵監(jiān)測:采用自然周期或促排卵周期，自然周期：月經(jīng)第10天開始陰道超聲監(jiān)測，記錄子宮內(nèi)膜厚度和分型。根據(jù)卵泡發(fā)育情況決定隔日或每日監(jiān)測，當(dāng)優(yōu)勢卵泡直徑達(dá)17~20 mm，子宮內(nèi)膜厚度大于7mm，肌肉注射 HCG 10 000 U或皮下注射GnRHa 0.1mg扳機(jī)。促排卵周期：使用克羅米芬（CC）、來曲唑（LE）和（或）尿促性腺素（HMG）誘導(dǎo)排卵，卵泡監(jiān)測和扳機(jī)方法同自然周期，但應(yīng)注意優(yōu)勢卵泡的大小和數(shù)目。扳機(jī)后24～36 h排卵前單次人工授精。

1.2.2 精液采集與檢測:男方禁欲2~7天，在本中心取精室IUI日通過手淫法取精。精液收集到無菌取精杯中，交予男科學(xué)實(shí)驗(yàn)室，置于37℃水浴鍋中，完全液化后進(jìn)行精液洗滌處理。采用梯度離心法，試劑購于Vitrolife（Sweden）。取15mL試管1個(gè)，由底部向上分層加入1.5 mL 90%Sperm Grad TM，1.5mL 45%Sperm GradTM和1~2mL液化后的精液，350g離心20min，去上部液體，保留底部沉淀，加入3mL G-MOPS混勻，350g離心 10min，收集沉淀，加0.5mL G-MOPS混勻，取10μL鏡檢。精液檢測：按照WHO第5版精液參數(shù)檢測方法進(jìn)行精液量、精子形態(tài)和功能等檢測，采用精子分析儀（北京偉力）計(jì)數(shù)并計(jì)算前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)目。精子形態(tài)采用Diff-Quik染色法分析，油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)精子形態(tài)，計(jì)算每份精液樣本中正常形態(tài)精子百分率。精子形態(tài)學(xué)根據(jù)Kruger標(biāo)準(zhǔn)評估[1]。

1.2.3 人工授精：接受IUI婦女取膀胱截石位，暴露宮頸，用0.9%氯化鈉甲硝唑溶液清潔宮頸及陰道穹隆部，用特制的人工授精管接1mL的注射器，吸取處理后的精子懸液0.5mL，將導(dǎo)管置入宮腔，緩慢將精子懸液注入，患者術(shù)后抬高臀部仰臥30min。所有接受IUI的患者術(shù)后均接受黃體支持。

1.2.4 妊娠判斷：IUI后14日作血HCG測定，大于5IU/L為生化妊娠，IUI后5周陰道B超發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)孕囊和原始心管搏動(dòng)，確診為臨床妊娠。以臨床妊娠成功統(tǒng)計(jì)周期妊娠率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

將294個(gè)周期基礎(chǔ)精液檢測結(jié)果按正常形態(tài)率分為2組：正常形態(tài)精子<4%組89個(gè)周期中臨床妊娠成功7例，周期妊娠率7.9%；正常形態(tài)精子>4% 組205個(gè)周期中臨床妊娠成功35例，周期妊娠率17.1%。正常形態(tài)精子>4%組妊娠率明顯高于正常形態(tài)精子<4%組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P< 0.05）。294個(gè)周期精液處理后前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)分為3組：前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)<10×106組74個(gè)周期中臨床妊娠成功12例，周期妊娠率16.2%；前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)～30×106組166個(gè)周期中臨床妊娠成功25例，周期妊娠率15.1%；前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)＞30×106組54個(gè)周期中臨床妊娠成功5例，周期妊娠率9.3%。前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)＞30×106組周期妊娠率較其他兩組低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討 論

預(yù)測IUI周期妊娠率比較困難，多數(shù)研究注重女方年齡、優(yōu)勢卵泡數(shù)、子宮內(nèi)膜厚度、不孕年限等女方因素對妊娠率的影響，對精液質(zhì)量與IUI妊娠率關(guān)系關(guān)注不多[2]。男方因素中精液量、精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)和精子形態(tài)等精液參數(shù)是主要內(nèi)容，其中以精子形態(tài)和洗滌后的前向精子總數(shù)與妊娠關(guān)系最為重要[3]。根據(jù)Kruger精子形態(tài)學(xué)嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行精子形態(tài)學(xué)評估，WHO第5版精液分析指南界定正常形態(tài)精子小于4%為畸精。研究發(fā)現(xiàn)精子正常形態(tài)率影響IUI妊娠結(jié)局，當(dāng)精子正常形態(tài)大于4%時(shí)妊娠率增高[4-6]，但有學(xué)者認(rèn)為精子形態(tài)對IUI妊娠率并無直接關(guān)系[7]。本研究發(fā)現(xiàn)精子正常形態(tài)大于4%時(shí)IUI妊娠率為17.1%。而當(dāng)小于4%時(shí)妊娠率僅為7.86%，結(jié)果支持精子正常形態(tài)率對IUI妊娠結(jié)局有一定的預(yù)測價(jià)值。

精液處理后前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)達(dá)到一定數(shù)量，才能獲得較理想的IUI妊娠率。文獻(xiàn)認(rèn)為前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)>10×106時(shí)，可獲得較高的臨床妊娠率[8]，另外一項(xiàng)研究認(rèn)為洗滌后的前向精子總數(shù)達(dá)0.3×106到20×106行IUI都可獲得較好的妊娠率[9]。但臨床妊娠率并不會(huì)隨著前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)的進(jìn)一步增加而升高。本研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)注入宮腔內(nèi)的前向運(yùn)動(dòng)精子總數(shù)超過30×106時(shí)，妊娠率由16.2%下降至9.3%，兩組差異雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但過多的前向運(yùn)動(dòng)精子使IUI妊娠率呈下降趨勢，可是本組樣本數(shù)較少，需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來繼續(xù)觀察。過多的前向運(yùn)動(dòng)精子使IUI妊娠率下降，可能與下述因數(shù)有關(guān)：（1）大量精子進(jìn)入女性生殖道，在與卵子結(jié)合時(shí)導(dǎo)致多精子受精；（2）大量精子死亡后產(chǎn)生毒素，對胚胎的運(yùn)行和植入產(chǎn)生不良影響。所以對IUI洗滌后精子密度過高者進(jìn)行適當(dāng)稀釋，使注入宮腔的精子總數(shù)在20×106以內(nèi)，對提高IUI治療效果有積極的意義。

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2014-11-12

1006-2440（2014）06-0713-02