王克才，何利昆，谷志大，段亞良，楊國麗，鄭洪玲，肖愛波

（1.遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧 沈陽 110164；2.遼寧省畜產品安全監(jiān)察所，遼寧 沈陽 110003）

豬瘟活疫苗與口蹄疫滅活疫苗同期與分期免疫效果對比試驗

王克才1，何利昆1，谷志大1，段亞良1，楊國麗1，鄭洪玲1，肖愛波2

（1.遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧 沈陽 110164；2.遼寧省畜產品安全監(jiān)察所，遼寧 沈陽 110003）

本試驗采用單因子試驗設計方法，將2窩同期出生的18頭仔豬，隨機分為試驗組和對照組。試驗組8頭仔豬分別于35、65日齡進行2輪次豬瘟活疫苗和口蹄疫滅活疫苗同期免疫；對照組10頭仔豬分別于25、35、55、65日齡進行相同疫苗的分期免疫。通過所有供試豬免疫后進行臨床跟蹤觀察，并于免疫前的23日齡、免疫后的55、95日齡分別檢測免疫抗體水平（應用國家規(guī)定的ELISA檢測方法）。試驗結果表明，兩種免疫方法免疫后7 d內均未觀察明顯的應激反應，試驗組與對照組兩種疫苗的免疫抗體合格率差異均不顯著。

豬瘟；口蹄疫；疫苗；同期免疫；分期免疫；效果

為探究豬瘟活疫苗與口蹄疫滅活疫苗同期免疫方法的安全性和有效性，本研究開展了兩種疫苗同期與分期免疫效果對比試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗豬 在遼陽市某養(yǎng)豬合作社隨機選擇臨床健康且處于同期、正常分娩的兩窩18頭仔豬作為供試豬，18日齡去勢，25日齡斷奶，飼養(yǎng)管理與場內正常管理措施保持一致。所有試驗豬皆為臨床健康豬。

1.1.2 試驗用疫苗 口蹄疫O型滅活疫苗，中牧實業(yè)股份有限公司生物藥品廠生產，批號：1212005；豬瘟活疫苗（傳代細胞苗），廣東永順生物藥品廠生產，批號：2012095。

1.1.3 檢測試劑 豬瘟抗體檢測試劑盒，美國IDEXX公司生產，批號：99-43220-A291A441；口蹄疫O型抗體檢測試劑盒，購自中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所，批號：2013050901。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗豬分組 將2窩18頭仔豬不分公母隨機分為試驗組（同期免疫組，包括第1窩5頭豬、第2窩3頭豬）和對照組（分期免疫組，包括第1窩5頭豬、第2窩5頭豬），并通過逐頭標記試驗號和耳標號。具體分組見表1。

表1 試驗豬分組明細表Table1 Subgroup specification o f test pig

1.2.2 試驗豬采樣檢測及免疫方法 第1次采血：試驗組和對照組同在23日齡（首免前2 d）時采血，檢測母源抗體；第1輪同期免疫：試驗組8頭仔豬于35日齡時在左右側頸部同時分別注射口蹄疫和豬瘟疫苗；第1輪分期免疫：對照組10頭仔豬于25日齡時，在頸部肌肉注射豬瘟疫苗，于35日齡時在頸部肌肉注射口蹄疫疫苗。

第2次采血：2組豬于完成首輪免疫后30 d（65日齡）同步進行；第2輪同期免疫：試驗組8頭仔豬于65日齡時在左右側頸部同時分別注射口蹄疫和豬瘟疫苗；第2輪分期免疫：對照組10頭仔豬于55日齡時，在頸部肌肉注射豬瘟疫苗，于65日齡時在頸部肌肉注射口蹄疫疫苗。

第3次采血：2組豬于加強免疫后30 d（約95日齡）同步進行；將上述所采全血分離血清，送實驗室進行口蹄疫和豬瘟免疫抗體檢測。

所用疫苗的免疫劑量按照說明書的規(guī)定，即豬瘟疫苗首免和二免均為1頭份/頭，口蹄疫疫苗首免為1 mL/頭、二免為2 mL/頭。有關免疫及采血程序詳見表2。

表2 試驗豬免疫程序表Table2 Imm une p rogramm e for child ren of test pig

1.2.3 試驗現場飼養(yǎng)管理及臨床觀察要求 試驗場地位于遼陽市文圣區(qū)桃花島村，場區(qū)相對獨立，附近無其他養(yǎng)豬場戶。圈舍飼養(yǎng)條件均一致，2個試驗組豬混群飼養(yǎng)，飼喂相同飼料。整個試驗場地封閉管理，固定飼養(yǎng)人員，嚴格消毒，杜絕無關人員出入。

免疫前后對試驗豬進行臨床觀察精神狀態(tài)、采食狀況及生長發(fā)育是否發(fā)生明顯變化，尤其注意觀察免疫后是否發(fā)生疫苗過敏反應。

1.2.4 數據處理與分析 對2個試驗組定期臨床觀察、免疫及采樣，記錄相關情況。將檢測結果進行收集匯總和對比分析。

2 試驗結果及分析

2.1 試驗安全性觀察結果①試驗期間該場存欄數100頭，其中種豬40頭，臨床觀察豬群未發(fā)生疫情，所有試驗豬精神狀態(tài)良好，采食正常，試驗開始時（25日齡）2組仔豬平均體重為6.5±0.5 kg，試驗結束時（95日齡）2組仔豬平均體重為40±1.5 kg，2組試驗豬生長發(fā)育正常，無明顯差異。②每次免疫注射后觀察3 d，均未發(fā)生速發(fā)型過敏反應及死亡情況。

2.2 試驗豬免疫前母源抗體檢測結果同期免疫組8頭仔豬豬瘟抗體合格率為3/8，分期免疫組10頭仔豬豬瘟抗體合格率為5/10；同期免疫組口蹄疫抗體合格率為3/8，分期免疫組口蹄疫抗體合格率為2/ 10。詳見表3～5。

表3 不同時期檢測豬瘟、口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計表Tab le3 Qualification rate statistica l tab le at diverse period of sw ine pest and foot-and-m outh disease

表4 試驗豬口蹄疫檢測結果明細表Tab le4 Foot-and-mouth disease detection consequence specification o f test pig

表5 試驗豬豬瘟檢測結果明細表Tab le5 Sw ine pest detection consequence specification of test pig

2.3 首免后3030 d d免疫抗體檢測結果同期免疫組8頭仔豬豬瘟抗體合格比率為7/8，分期免疫組10頭仔豬豬瘟抗體合格比率為8/10；同期免疫組8頭仔豬口蹄疫抗體合格比率為5/8，分期免疫組10頭仔豬口蹄疫抗體合格比率為7/10。

2.4 加強免疫后3030 d d免疫抗體檢測結果同期免疫組8頭仔豬豬瘟抗體合格比率為7/8，口蹄疫抗體合格比率為7/8；分期免疫組10頭仔豬豬瘟抗體合格比率為7/10，口蹄疫抗體合格比率為10/10。

2.5 組內、組間豬瘟抗體水平差異性比較

2.5.1 依據表3數據，同期免疫組8頭仔豬中，免疫前有3頭抗體合格，首免后30 d檢測3頭均合格；免疫前有5頭抗體不合格，首免后30 d檢測有4頭合格，1頭不合格。說明同期首免后8頭豬中豬瘟免疫抗體水平向主動免疫方向轉化比率至少為7/8，且免疫抗體合格率為7/8。加強免疫后的抗體水平基本維持了上一次的免疫效果。

2.5.2 依據表3數據，分期免疫組10頭仔豬中，免疫前有5頭抗體合格，首免后30天檢測4頭合格，1頭接近合格；免疫前有5頭抗體不合格，首免后30 d檢測有4頭合格，1頭接近合格。說明分期首免后10頭豬中豬瘟免疫抗體水平向主動免疫方向轉化比率為10/10，且免疫抗體合格率為8/10。加強免疫后的抗體水平也維持了上一次的免疫效果。

22..66 組內、組間口蹄疫抗體差異性比較

2.6.1 依據表4數據，同期免疫組8頭仔豬中，免疫前有3頭抗體合格，首免后30 d檢測2頭合格，1頭不合格；免疫前有5頭仔豬抗體不合格，首免后30 d檢測有3頭合格，2頭不合格（2頭不合格仔豬的抗體水平呈上升趨勢）。說明同期首免8頭仔豬后，口蹄疫免疫抗體水平向主動免疫方向轉化的比率7/8，免疫抗體合格率為5/8。加強免疫后的抗體水平普遍有所上升。

2.6.2 依據表4數據，分期免疫組10頭仔豬中，免疫前有2頭仔豬抗體合格，首免后30 d檢測1頭合格，1頭不合格；免疫前8頭仔豬抗體不合格，首免后30 d檢測有6頭合格，2頭不合格（1頭抗體水平呈上升趨勢、1頭保持原來抗體水平）。說明分期首免10頭仔豬后，口蹄疫免疫抗體水平向主動免疫方向轉化率8/10，免疫合格率為7/10。加強免疫后的抗體水平普遍有所上升。

3 討論與小結

3.1本試驗應用豬瘟活疫苗與豬口蹄疫滅活疫苗，對仔豬實施同期免疫和分期免疫，免疫后經臨床觀察，兩種免疫方法均未發(fā)現明顯的免疫不良反應。

3.2采取2種免疫方法，首免和加強免疫后檢測豬瘟免疫抗體合格率，同期免疫組略高于分期免疫組（同期分別為7/8和7/8，分期分別為8/10和7/10），經卡方檢驗，差異不顯著（P＞0.05）。檢測發(fā)現，分期免疫組中存在個別豬免疫水平存在差異的原因，可能與分期免疫組豬瘟首免日齡早于同期免疫組10 d，受到母源抗體干擾作用較大有關，不能證實與同期免疫口蹄疫疫苗有關。

3.3采取兩種免疫方法，首次和加強免疫后口蹄疫免疫抗體合格率略存在差異（同期免疫2次分別為5/8和7/8，分期免疫分別為7/10和10/10），經統(tǒng)計學卡方檢驗，差異不顯著（P＞0.05）。2組中個體檢測結果存在差異的主要表現是：同期和分期2個試驗組中都有1頭來自窩1的仔豬檢測到免疫反應不正常，與同期注射豬瘟活疫苗不存在必然聯系。

3.4現階段，免疫仍然是有效防控豬瘟（CSF）和口蹄疫（FMD）的關健技術措施。目前，在具體實施CSF和FMD疫苗強制免疫方面，實行兩種疫苗首免時間隔7～10 d注射，且在間隔1個月后各加強1次免疫的方法，存在免疫周期長、注射輪次多、抓豬應激頻繁，執(zhí)行起來存在一定阻力等問題。本試驗結果與國內有關研究結論[1-2]和2012年省疫控中心內對錦州市黑山、北鎮(zhèn)、凌海等3個縣（市）進行的豬瘟與口蹄疫疫苗田間同期免疫效果抽檢的結果[3]基本一致。

3.5本試驗證明，豬瘟與口蹄疫疫苗同期分部位免疫方法與分期錯時免疫方法相比，無論是安全性，還是免疫效果，均無顯著差異。建議對35日齡仔豬及其以上的適齡豬，可推行豬瘟活疫苗與口蹄疫滅活疫苗實行同期分部位免疫措施，在具體實施中，要根據不同疫苗廠家、批次及養(yǎng)殖戶免疫接受能力等實際，先行試免，確認安全后，再擴大推廣面。

[1]張作仁，胡成林，熊金洲，等.優(yōu)化豬瘟、口蹄疫免疫效果試驗與研究[J].養(yǎng)殖與飼料，2005，9：30-34.

[2]楊慧，封林，黎強，等.豬口蹄疫和豬瘟疫苗同時注射免疫試驗技術報告[J].中國動物檢疫，2009，1：38-41.

[3]楊本勇，王克才，李井春，等.不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫效果比較[J].現代畜牧獸醫(yī)，2013，11：37-39.

（編輯：張婷婷）

Study on the synchronization and stating immune effect check experimentof sw ine p lague live vaccine and foot-and-mouth disease inactivated vaccine

Wang Kecai1，He Likun1,Gu zhida1,Duan Yal iang1Yang Guol i1,Zheng Hongl ing1,Xiao Aibo2
（1.Liaoning Province Animal Disease Prevention and Control Center,Liaoning Shenyang 110164；2.Liaoning Province Bureau of Livestock Product Safety Supervision,Liaoning Shenyang 110003）

The test was car ried using simple factor experiment method.18 piglets f rom 2 broods born in the same period were divided into experiment group and control group.The experiment group,which has 8 piglets,was injected swine plague l ive vaccine and foot-and-mouth disease inactivation vaccine in the cor responding time period on 35 days and 65 days respectively.The control group which has 10 piglets was injected swine plague live vaccine and foot-and-mouth disease inactivation vaccine by stages 25,55 and 65 days respectively.The test were cl inical accompaniment and observation al l test pigs af ter immunizing,simul taneously,immune antibody level at pre-immune 23 days and af ter immune 55,95 days was detected,the experiment method was using count ry formulary ELISA detection method.The test resul t indicated that these 2 methods have not shown conspicuous alarm reaction in 7 days af ter immunizing.The qual if ication rate di f ference of immune antibody between the experiment group and the cont rol group was quiet.

Swine plague;Foot-and-mouth disease;Synchronization immune;Stating immune;Ef fect

S858.28

：B

：1672-9692(2014)04-0043-05

2014-03-03

王克才（1965-），男，大專，高級獸醫(yī)師，主要從事動物疫病防控工作。