劉曉慧李福平張煥靈

1.蛇口人民醫(yī)院產(chǎn)科，廣東深圳518067；2.深圳市婦幼保健院內(nèi)科，廣東深圳518028

基因TCF7L2多態(tài)性與中國(guó)妊娠期糖尿病相關(guān)性的研究

劉曉慧1李福平2張煥靈1

1.蛇口人民醫(yī)院產(chǎn)科，廣東深圳518067；2.深圳市婦幼保健院內(nèi)科，廣東深圳518028

目的探索基因TCF7L2rs11196218與中國(guó)漢族婦女妊娠期糖尿病(GDM)的關(guān)系。方法依據(jù)美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)2004年頒布的GDM標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷,將2009年6月—2012年6月收取的289例患者排除糖耐量異常以及I型糖尿病、胰腺炎及胰腺手術(shù)者，隨機(jī)分為對(duì)照組145例，病例組144例。且經(jīng)rs11196218的單核苷酸多態(tài)性（SNPs），對(duì)等位基因在二組間頻率分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組之間對(duì)照組剖腹產(chǎn)69（47.9%），非剖腹產(chǎn)75（52.1%），病例組剖腹產(chǎn)94（66.7%），非剖腹產(chǎn)47（33.3%），病例組剖腹產(chǎn)比率高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且兩組間rs11196218位點(diǎn)基因的基因頻率AA、GG、GA，對(duì)照組分別為5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例組分別為9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩組間等位基因A及G分布頻率分別為對(duì)照組31.5（21.9%）、112.5(78.1%)，病例組38(26.4%)、106(73.6%)，差異無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論未發(fā)現(xiàn)rs11196218與中國(guó)漢人GDM發(fā)病相關(guān)聯(lián)。高齡和雙胎妊娠是中國(guó)漢人婦女GDM的發(fā)病因素，合并GDM患者剖腹產(chǎn)率升高。

妊娠期糖尿?。粏魏塑账岫鄳B(tài)性；rs11196218

妊娠期糖尿病（GDM）在全球發(fā)病率逐步升高。國(guó)內(nèi)外的研究表明GDM與2型糖尿?。═2DM）有相似發(fā)病機(jī)理。轉(zhuǎn)錄因子7類似物2（Transcription factor 7 like2,TCF7L2）基因位于人類10號(hào)染色體q25.3區(qū),其rs7903146多態(tài)性是至今人類發(fā)現(xiàn)與T2DM相關(guān)性最顯著的。但Ng[1]等人發(fā)現(xiàn)rs7903146點(diǎn)位在香港漢族人群中突變率很低。以往研究表明，很多單核苷酸多態(tài)性（SNPs）是外國(guó)人種某些疾病的遺傳基礎(chǔ)，但在中國(guó)漢人中研究結(jié)果不同。TCF7L2的另一點(diǎn)位rs11196218在課題申請(qǐng)時(shí)僅有Ng等報(bào)道與漢人T2DM相關(guān)[1]。有必要在漢人GDM中開展調(diào)查研究。該研究選取2009年6月—2012年6月在該院產(chǎn)科住院的孕產(chǎn)婦為研究對(duì)象，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

研究對(duì)象為2009年6月—2012年6月在該院產(chǎn)科住院的孕產(chǎn)婦。于孕24～28周行75 g口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）,依據(jù)美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)2004年頒布的GDM標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。研究對(duì)象均為同期住院分娩孕產(chǎn)婦,排除糖耐量異常以及I型糖尿病，胰腺炎及胰腺手術(shù)者，其中病例組144例，年齡22～45歲，平均（31.88±4.21）歲，新生兒體重1740～4900 g,平均體重(3366.88±529.36)g;對(duì)照組為145例，年齡18～41歲，平均（28.78±4.23）歲，新生兒體重1050～4750 g，平均體重（3265.07±510.92）g，兩組患者的一般資料如年齡、新生兒體重等差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。該研究獲醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

收集病例組和對(duì)照組的靜脈血，用酚氯仿法提取全血基因組DNA，采用美國(guó)sequenom公司MassARRAY時(shí)間飛行質(zhì)譜技術(shù)，先通過(guò)PCR擴(kuò)增，SAP酶處理，延伸引物單堿基，樹脂除鹽純化。芯片點(diǎn)樣，質(zhì)譜儀檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)步驟，最終使用Typer.4軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，獲得分型結(jié)果。標(biāo)本準(zhǔn)確率為99.66%。引物序列如下。見表1。

表1 引物序列

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 研究對(duì)象的臨床特點(diǎn)

2.1.1 產(chǎn)婦年齡比較病例組144例,最小年齡22歲，最大年齡45歲,平均年齡（31.88±4.21）歲;對(duì)照組145例，最小年齡18歲，最大年齡41歲，平均年齡（28.78±4.23）歲；兩組年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.248，P=0.0001）。

2.1.2 新生兒體重比較病例組141例，最大體重4900 g，最小體重1740 g，平均體重（3366.88±529.36）g；對(duì)照組144例，最大體重4750 g，最小體重1050 g，平均體重（3265.07±510.92）g；兩組嬰兒體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.652，P=0.100）。

2．1.3兩組間不同產(chǎn)式比較病例組剖腹產(chǎn)比率高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.230，P=0.001），見表2。

表2 兩組間不同產(chǎn)式比較[n(%)]

2.2 Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)

經(jīng)分析rs11196218的基因型在病例組和對(duì)照組的分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。

2.3 兩組間位點(diǎn)差異情況比較

rs11196218位點(diǎn)基因型頻率和等位基因頻率比較，見表3、4。

表3 兩組間位點(diǎn)差異情況比較

表4 等位基因分布頻率比較

2.4 與國(guó)內(nèi)報(bào)道結(jié)果的比較

見表5。

3 結(jié)語(yǔ)

rs11196218基因型和等位基因分布頻率在GDM組和對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的差別，表明未發(fā)現(xiàn)rs11196218與中國(guó)漢人GDM發(fā)病相關(guān)聯(lián)。我們與張春[4]等報(bào)道的rs11196218的基因型頻率和等位基因頻率不相同。高齡和雙胎妊娠是中國(guó)漢人婦女GDM的發(fā)病因素，合并GDM患者剖腹產(chǎn)率升高。

4 討論

上述研究中除回園敕等和該研究的病例組為GDM外均為T2DM。Syeda Sadia Najam[3],等研究發(fā)現(xiàn)rs11196218的單核苷酸多態(tài)性與T2DM顯著性相關(guān)聯(lián)，其他研究均未發(fā)現(xiàn)該SNPs與T2DM或GDM有顯著的相關(guān)性。由以上結(jié)果可知，對(duì)照組和病例組采用GDM和非GDM方式相比較，對(duì)照組剖腹產(chǎn)69（47.9%），非剖腹產(chǎn)75（52.1%），病例組剖腹產(chǎn)94（66.7%），非剖腹產(chǎn)47（33.3%），病例組剖腹產(chǎn)比率高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且兩組間rs11196218位點(diǎn)基因的基因頻率AA、GG、GA，對(duì)照組分別為5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例組分別為9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩組間等位基因A及G分布頻率分別為對(duì)照組31.5（21.9%）、112.5(78.1)，病例組38 (26.4%)、106(73.6%)，差異無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果均與花巍，竇昊穎，黃海超，等[7]在關(guān)于細(xì)胞周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)亞單位相關(guān)蛋白1類似物1基因多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性的研究進(jìn)展中的相關(guān)數(shù)據(jù)相一致，具有臨床意義。且國(guó)內(nèi)外已有的研究表明T2DM與GDM有著相似的發(fā)病機(jī)理。

表5 與國(guó)內(nèi)報(bào)道結(jié)果比較

與其他學(xué)者報(bào)道的差異如何解釋?有人從該SNPs對(duì)研究的所有人群(包括病例組和對(duì)照組)某些影響糖代謝的生理特征如早相胰島素分泌量進(jìn)行定量研究。巳知GDM和T2DM一樣是受多基因遺傳影響的[7-9],假定G純合子可使早相胰島素分泌量產(chǎn)生一定量減少,但由于其對(duì)疾病發(fā)生貢獻(xiàn)量很小，且影響疾病的其他基因均正?；蛲瑫r(shí)攜帶有抑制糖尿病的遺傳基因，各種基因相互作用，從整體水平上不會(huì)發(fā)生GDM[10]。也就會(huì)出現(xiàn)有國(guó)人報(bào)道對(duì)致糖尿病的某一生理特征有影響，該研究發(fā)現(xiàn)在整體水平上等位基因在兩組間分布無(wú)顯著差別的情況。由于條件限制該研究標(biāo)本量小，也應(yīng)擴(kuò)大標(biāo)本量來(lái)得出更可靠結(jié)論。

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Study on the correlation between gestational diabetes mellitus andChinese gene TCF7L2 polymorphism

LIU Xiaohui1LI Fuping2ZHANG Huanling1
1.Obstetric Shekou people's Hospita，Shenzhen 518067，China；2.Shenzhen City Maternal and Child Health Hospital Department of Internal Medicine，Guangdong 518028，China

ObjectiveExploration of gestational diabetes gene TCF7L2rs11196218 and China women of Han(GDM)relationship.MethodsOn the basis of diagnosis American Diabetes Association issued in 2004 by the GDM standard,will be charged 289 patients excluded IGT and type I diabetes,pancreatitis and pancreatic operation,were randomly divided into control group of 145 cases,144 cases.And the single nucleotide polymorphism of rs11196218(SNPs),allele frequency distribution in the two groups were statistically.ResultsFound between the 2 groups control group,caesarean section 69(47.9%),noncaesarean section 75(52.1%) cases of caesarean section,94(66.7%),non caesarean section 47(33.3%)cases,the rate of cesarean section was higher than the control group,with significant difference.And the gene frequency of AA,GG,GA between the two groups of rs11196218 genes,the control group were 5(3.5%),86(59.7%),53(36.8%),the case group were 9(6.3%),77(53.5%),58(40.2%),the difference was not significant,no statistical significance.And between the two groups of A and G allele distributionfrequencies were 31.5 in the control group 21.9%,112.5(78.1%),38(26.4%)cases,106(73.6%),no significant difference statistically significant.ConclusionNo rs11196218 is associated with the pathogenesis of GDM China Han found.The elderly and twin pregnancy were factors in China Han women in GDM patients with GDM,increased cesarean section rate.

Gestational diabetes mellitus;Single nucleotide polymorphism;rs11196218

R473.74

A

1672-5654（2014）12（c）-0007-03

2014-09-11）

劉曉慧，女，50歲，主任醫(yī)師，本科，蛇口人民醫(yī)院產(chǎn)科主任，研究方向：高危妊娠。