王洪 周國義 林舟橋 林丹丹

·基礎研究·

輔酶Q10對視網膜神經節(jié)細胞及高眼壓動物模型氧化應激損傷保護作用的研究

王洪 周國義 林舟橋 林丹丹

目的 探討輔酶Q10對體外培養(yǎng)的人視網膜神經節(jié)細胞(RGC)及高眼壓動物模型氧化應激損傷的保護所用，并對其作用機制進行分析。方法 體外培養(yǎng)人RGC，輔酶Q10干預，干預后暴露于過氧化氫(H2O2)24 h，通過光鏡觀察RGC形態(tài)改變；CCK-8檢測細胞活性改變；用DCFH-DA熒光法檢測細胞內活性氧(ROS)水平；流式細胞儀技術檢測細胞凋亡情況。高眼壓動物模型利用Wistar大鼠鞏膜上靜脈燒灼模型。輔酶Q10每日胃腸灌注喂養(yǎng)。Tonopen方法檢測動物模型眼壓水平；利用熒光金上丘逆行標記方法檢測存活的RGC。用Western-印跡法檢測與氧化應激及凋亡相關的caspase3，cytochrome c，BAX 及BCL2蛋白的表達。結果 輔酶Q10可改善暴露于氧化應激環(huán)境中的人RGC活力，并能在一定程度上抑制RGC的凋亡。DCFH-DA法結果表明輔酶Q10能夠抑制RGC內ROS的產生。動物模型實驗結果顯示，鞏膜上靜脈燒灼術可以穩(wěn)定地升高動物眼壓。輔酶Q10可以保護RGC免受高眼壓損傷。Western印跡法結果顯示，經輔酶Q10預處理后的RGC及動物模型caspase3，cytochrome c及BAX表達量降低，而抑制凋亡的BCL2表達升高。結論 輔酶Q10對體外培養(yǎng)的人RGC及高眼壓動模型具有抗氧化損傷的保護作用，這種保護作用可能與抑制細胞凋亡有關。(中國眼耳鼻喉科雜志，2014，14：165-170，176)

輔酶Q10； 氧化應激損傷； 視網膜神經節(jié)細胞； 青光眼

青光眼是一種以視神經萎縮和視野缺損為特征的疾病，最終導致不可逆性視力喪失[1]。據統(tǒng)計，目前全世界有超過6 800萬人患有青光眼，其中大約700萬人因此致盲，致盲率居全世界致盲性眼病的第二位[2]。有關專家預測，到2020年，全球青光眼患者將增加到7 960萬[3]。在西方國家，原發(fā)性開角型青光眼(primary open angle glaucoma, POAG)是最常見的青光眼類型[4]。流行病學調查[5]顯示，我國以原發(fā)性閉角型青光眼(primary angle closure glaucoma，PACG)為最常見的類型。但近年來隨著人口老齡化和診斷水平的提高，我國的POAG患病率有上升趨勢。盡管目前POAG的確切發(fā)病機制尚不十分清楚，但眼壓(intraocular pressure, IOP)增高、機械性損傷、遺傳異常因素、氧化損傷、谷氨酸水平增高、一氧化氮代謝異常等因素都參與POAG的發(fā)病過程[4-5]。近年來越來越多的研究表明，氧化損傷在POAG的發(fā)病機制中占有重要作用。

輔酶Q10，也稱為泛醌，在線粒體中參與ATP的生物合成，并且其還原形式是一種脂質抗氧化劑，因此，輔酶Q10在氧化代謝過程中起著關鍵的作用[6]。輔酶Q10是一種比維生素E和其他一些抗氧化劑更有效的脂類抗氧化劑。輔酶Q10可清除活性氧，并回收利用維生素E[7]。輔酶Q10水平的下降被認為是衰老的重要原因之一，并且在許多退化性或慢性疾病，如動脈粥樣硬化、帕金森、阿爾茨海默癥和白內障的發(fā)病機制中起著重要的作用[8]。已經發(fā)現，隨著年齡的增長，視網膜內輔酶Q10的水平可降低約40%[9]。這種含量的下降可能會降低視網膜的抗氧化能力，并造成視網膜內ATP合成減少。因此，輔酶Q10水平降低可能與年齡相關性黃斑變性的發(fā)生和發(fā)展有關。在本研究中，我們通過體外及體內實驗研究了輔酶Q10對視網膜神經節(jié)細胞(retinal ganglion cell,RGC)及高眼壓模型的抗氧化作用及其可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 細胞處理 體外常規(guī)用DMEM-F12(Hyclone，US)培養(yǎng)基及10%血清(Hyclone，US)培養(yǎng)人RGC(ATCC，RGC-5 視網膜神經節(jié)細胞株細胞，貨號AA-CELL-5)。培養(yǎng)細胞經過Thy1.1細胞標記進行鑒定。培養(yǎng)細胞經不同濃度輔酶Q10溶液預處理48 h后置于200 μmol/L的過氧化氫(H2O2)溶液中繼續(xù)孵育2 h。實驗分組為：無處理的正常細胞對照組、單純H2O2處理對照組、10 μmol/L輔酶Q10溶液預處理組、1 μmol/L輔酶Q10溶液預處理組和0.1 μmol/L輔酶Q10溶液預處理組。

1.2 細胞形態(tài)學觀察 RGC消化傳代接種于6孔板中，靜置培養(yǎng)24 h后吸棄上清液，更換為無血清培養(yǎng)液，同步化處理24 h，用完全培養(yǎng)液將輔酶Q10儲存液稀釋為10、1、0.1 μmol/L，分別加入6孔板中。其中正常對照、H2O2對照孔加入完全培養(yǎng)液2 mL，置于細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48 h。吸棄上清，加入磷酸鹽緩沖液(phosphate-buffered saline, PBS)漂洗2次。用基礎培養(yǎng)液將H2O2稀釋為200 μmol/L，每孔加入2 mL。其中正常對照只加基礎培養(yǎng)液。置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)2 h。在倒置相差顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)變化，并采集圖像。

1.3 細胞活性、增殖檢測(CCK-8法) 96孔板接種1×104RGC。設立正常對照及單純H2O2處理2 h對照組。其他組RGC經不同濃度(10、1、0.1 μmol/L)輔酶Q10溶液預處理48 h后，置于200 μmol/L的H2O2溶液中繼續(xù)孵育2 h。將10%的CCK-8工作液(用完全培養(yǎng)基稀釋配制)加入各組樣品中，同時設立空白對照(無細胞，只加入CCK-8工作液)。置于培養(yǎng)箱中靜置30 min。用酶標儀檢測每孔OD值，檢測波長為450 nm。每組設立5個復孔，實驗重復3次。

1.4 細胞凋亡檢測(Annexin V/PI法) 6孔板接種RGC。設立正常對照及單純H2O2處理3 h對照組。其他組RGC經不同濃度(10、1、0.1 μmol/L)輔酶Q10溶液預處理48 h時后，置于200 μmol/L的H2O2溶液中繼續(xù)孵育2 h。收集細胞，加入500 μL上樣液重懸細胞，分別加入5 μL Annexin V 和10 μL PI 吹打混勻，室溫下避光孵育5 min。立即用流式細胞儀檢測(ex/em=488/530 nm)，用FITC通道(FL1)檢測Annexin V，PE通道(FL2)檢測PI。

1.5 細胞內活性氧檢測(DCFH-DA) 利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH，生成有熒光的DCF，從而檢測細胞內活性氧(ROS)的水平。6孔板接種RGC。設立正常對照及單純H2O2處理2 h對照組。其他組RGC經不同濃度(10、1、0.1 μmol/L)輔酶Q10溶液預處理48 h后，置于200 μmol/L的H2O2溶液中繼續(xù)孵育2 h。收集細胞，每管分別加入新鮮置備1 μmol/L DCFH-DA工作液500 μL，重懸細胞吹打混勻，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內避光孵育30 min。終止孵育，棄探針工作液后，分別加入500 μL PBS重懸細胞。立即用流式細胞儀檢測(ex/em= 488/530 nm)，每次收集10 000個細胞。實驗至少重復3次。

1.6 大鼠高眼壓(慢性視神經損傷)動物模型的建立及給藥方法 縱向切開3條鞏膜上靜脈相應處結膜，利用30號燒灼頭，以25～30 V電壓燒灼2條背側鞏膜上靜脈及1條顳側鞏膜上靜脈，直至靜脈完全阻塞，無血流通過?；貜徒Y膜瓣，結膜囊內涂抗生素眼膏，靜置大鼠于復溫毯直至清醒。所有高眼壓模型右眼為實驗眼，左眼為對照眼。Tono-Pen XL測量大鼠眼壓，取連續(xù)的4個讀數進行記錄，連續(xù)4個讀數的平均值為該日的日平均眼壓，眼壓測量均于9:00～10:30進行。對于任意時間點 (除外手術后即刻) 高眼壓模型的眼壓低于正常對側眼眼壓的1.6倍，或高于對側眼2.8倍者予以排除。同時用蓋玻片壓平角膜，觀察高眼壓動物模型眼底。對于具有缺血表現者也予以排除。

所有大鼠每日給予輔酶Q10灌腸給藥，給藥劑量為10 mg/kg/day[10]，持續(xù)4周。4周后處死大鼠進行相關檢測。實驗分組為：正常大鼠對照組、高眼壓模型對照組、PBS對照處理組、輔酶Q10處理組。

1.7 熒光金上丘逆行標記及細胞計數 大鼠置于三維立體定位儀，耳棒固定大鼠頭部，尖刀切開頂骨中央皮膚。于冠狀縫后6.0 mm水平線上，在矢狀縫兩側旁開1.0 mm位置打孔，直徑為1.5 mm×1.5 mm。刮除位于上丘之上部分大腦皮質，將配制好的4%熒光金染料 (Fluorochrome, Englewood, Colorado) 經顯微注射系統(tǒng)注入兩側上丘各2 μL，明膠海綿填塞缺損區(qū)處。5-0黑絲線對位縫合皮膚。高眼壓動物模型在實驗終止前1周進行標記。

取出眼球后，角膜剪全周剪開鞏膜，移去眼前節(jié)及玻璃體腔液體。將眼杯浸泡在4%多聚甲醛溶液中固定30 min。剝離視網膜后將其按照4個象限方向剪開，平鋪于載玻片上，并在Zeiss熒光顯微鏡(Carl Zeiss Meditec, Jena, 德國)藍色光源20×放大倍率情況下進行視網膜圖像采集。采集圖像時，移動載物臺，同時在距離視神經1、2、3 mm處分別采集視網膜圖像1張，每個象限采集3張，全視網膜4個象限共12張圖片。對所有圖片中的RGC進行計數，所有實驗的RGC均以OD(右眼)/OS(左眼)%進行計算，RGC計數以均數±標準誤進行記錄。

1.8 Western印跡法檢測Fas蛋白表達量 經過不同處理的RGC以及大鼠視網膜進行蛋白提取，BCA法測定蛋白濃度并繪制標準曲線。加入等量的蛋白Marker及各組蛋白樣品進行電泳分離，所有電泳的SDS-PAGE膠為12%。轉膜時電流一般不超過0.15 A，電壓為20～25 V。轉膜2 h，把膜在洗滌緩沖液中洗后，放入20 mL脫脂奶粉(0.05 g/mL)內封閉，4 ℃過夜；取出后在TBST內洗一下后，加入一抗4 ℃過夜；經TBST洗滌后，加二抗振搖1 h，加入發(fā)光液進行曝光。一抗為抗caspase3，cytochrome c，BAX 及BCL2抗體，均來源于Cell signaling technology，按照1∶1 000比例進行稀釋。Western印跡法重復3次，將膠片掃描，用Image J 軟件對曝光的條帶進行灰度分析，并進行統(tǒng)計學處理。

1.9 統(tǒng)計學處理 使用Graphpad Prism 5.0統(tǒng)計軟件(Graphpad software Inc., Sandiego, CA)進行統(tǒng)計分析。所有實驗至少重復3次，計量資料數據以mean±SEM表示，多組之間用單因素方差分析(Oneway ANOVA分析)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 輔酶Q10保護H2O2誘導的RGC形態(tài)改變 通過倒置相差顯微鏡觀察(圖1)，200 μmol/L H2O2處理細胞2 h后，形態(tài)發(fā)生了明顯的變化，表現為細胞胞體皺縮變圓，呈空泡狀，部分細胞脫壁導致細胞密度減少。相比之下，輔酶Q10(0.1、1、10 μmol/L)干預對RGC具有一定的保護作用，RGC保持相對健康的形態(tài)。

圖1. 倒置相差顯微鏡觀察不同干預組細胞形態(tài)變化 左圖control為正常對照；中間圖為經過1 μmol/L輔酶Q10處理的RGC；右圖為單純200 μmol/L H2O2處理細胞2 h 后RGC形態(tài)。顯微鏡×100

2.2 輔酶Q10抑制H2O2誘導的RGC增殖抑制及活性降低 如圖2所示輔酶Q10預處理組細胞活性較單純H2O2處理組活細胞數量多，且細胞活性強。1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理48 h組與H2O2組相比，差異均有統(tǒng)計學意義。輔酶Q10的這種保護作用呈濃度依賴性，與其濃度呈正相關。實驗重復至少3次。

2.3 輔酶Q10抑制H2O2誘導的RGC凋亡 細胞凋亡采用Annexin V/PI雙染色，用流式細胞儀定量檢測。如圖3所示，在給予相同濃度及作用時間(200 μmol/L，2 h)的H2O2的情況下， 給予預處理的輔酶Q10濃度越高，凋亡細胞的百分比越低。0.1 、1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理的抗氧化應激抗細胞凋亡作用依次增強，1、10 μmol/L預處理組與單純H2O2處理組相比，差異有統(tǒng)計學意義。

2.4 輔酶Q10抑制H2O2誘導的RGC內ROS的產生 氧化損傷會導致細胞內ROS生成增加。采用DCFH-DA法流式細胞儀檢測。如圖4所示，H2O2組與基線相比，有著顯著的ROS水平增高；與H2O2組相比，0.1、1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理組的細胞內ROS的水平均有所下降，且輔酶Q10的濃度越高，細胞內ROS水平越低，即輔酶Q10抑制ROS產生的作用呈劑量依賴性。其中，1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理組與H2O2組相比，差異均有統(tǒng)計學意義。

圖2. CCK-8法檢測細胞活性 0.1，1，10分別表示為0.1、1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理48 h組；Ctl為正常對照；H2O2為單純H2O2處理2 h組；F=8.654,P=0.029 6； 1 μmol/L組P=0.041 2，10 μmol/L組P=0.0016；*P<0.05；**P<0.01

圖3. Annexin V/PI雙染色，流式細胞儀檢測RGC凋亡 A.統(tǒng)計分析柱狀圖；B. 正常對照組；C. H2O2對照組；D. 0.01 μmol/L輔酶Q10預處理48 h組；E. 1 μmol/L輔酶Q10預處理48 h組；F. 10 μmol/L輔酶Q10預處理48 h組。UR:晚期凋亡細胞(右上方格)；LR：早期凋亡細胞(右下方格)。F=9.874,P=0.010 64。1 μmol/L組P=0.031 6，10 μmol/L組P=0.004 0；*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

2.5 輔酶Q10抑制H2O2誘導的RGC caspase3，cytochrome c及BAX表達量，促進抑制凋亡的BCL2表達 如圖5所示，氧化損傷會導致RGC內與凋亡相關的caspase3，cytochrome c及BAX表達增加，以及使抑制凋亡的BCL2表達量減少。與H2O2處理組相比，1、10 μmol/L的輔酶Q10預處理組的細胞內caspase3，cytochrome c及BAX表達水平均有所下降，而BCL2表達增加。且輔酶Q10的濃度越高，細胞內凋亡相關蛋白水平越低，即呈劑量依賴性。

圖4. DCFH-DA法流式細胞儀檢測RGC內ROS水平 統(tǒng)計分析柱狀圖顯示輔酶Q10抑制ROS產生的作用呈劑量依賴性F=7.745 6，P=0.021 7，n=5。1 μmol/L組P=0.028 4，10 μmol/L組P=0.007 3；*P<0.05；**P<0.01

圖5. Western印跡法檢測RGC caspase3，cytochrome c，BAX及BCL2蛋白表達 圖A、B、C、D分別顯示Western印跡法檢測caspase3，cytochromec，BAX及BCL2蛋白的條帶及統(tǒng)計分析柱狀；F=9. 956，P=0.013，n=3，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001

2.6 輔酶Q10保護高眼壓模型神經節(jié)細胞存活 高眼壓模型建立的成功與否關鍵需要對眼壓進行檢測。在本動物模型中，如圖6所示，建模即刻眼壓驟升，隨后趨于平穩(wěn)，但始終保持在20 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)以上的眼壓， 說明此動物模型在4周的建模時間內為穩(wěn)定的高眼壓模型。

圖6. 高眼壓動物模型眼壓曲線圖 OD：右眼；OS：左眼；IOP：眼壓

RGC是青光眼性視神經損傷中最主要的受累細胞。在高眼壓模型中，RGC計數也是最關鍵的評價指標。如圖7所示，高眼壓模型中，RGC的存活率與正常視網膜相比為(71.15±1.13)%，PBS對照組的存活率為(72.51±1.93)%，而輔酶Q10處理組的RGC存活率為(85.33±2.41)%，明顯高于未處理組網膜。

2.7 輔酶Q10抑制高眼壓模型中caspase3，cytochrome c及BAX表達量，而促進抑制凋亡的BCL2表達 如圖8所示，高眼壓損傷會導致高眼壓模型視網膜與凋亡相關的caspase3，cytochrome c及BAX表達增加，以及使抑制凋亡的BCL2表達量減少。與單純青光眼模型相比，輔酶Q10經胃腸給藥的大鼠視網膜中caspase3，cytochrome c及BAX表達水平均減低，而BCL2表達增加。

3 討論

RGC位于視網膜最內層，將視覺信息傳遞至大腦。目前認為青光眼致視功能損害的共同病理基礎是神經節(jié)細胞的進行性死亡和神經纖維丟失，導致不可逆性視神經萎縮和視野改變，構成青光眼的最終改變[11]。許多因素如高眼壓、氧化損傷、視網膜缺血再灌注損傷等都可能與RGC凋亡有關[11]。作為人體內代謝較活躍的細胞之一，RGC更易受到氧化損傷[12]。在正常視網膜，代謝過程中產生的氧自由基能被機體自身的抗氧化系統(tǒng)中和；而在青光眼患者，過度產生的氧自由基超過了機體的抗氧化能力，最終導致RGC發(fā)生細胞凋亡。

輔酶Q10是一種內源性抗氧化劑，是機體自身存在的物質，且目前臨床上已應用于許多其他疾病，這是其藥物安全性的保障。據文獻報道口服輔酶Q10，人體血清中、線粒體及心肌內的輔酶Q10水平升高[13]。因此，給予輔酶Q10外源補充后，視網膜內輔酶Q10含量可以適當提高，這也構成了本研究的實驗基礎。幾乎所有的人體組織，包括心、肺、脾、腎、肝、胰腺、腎上腺等組織，輔酶Q10的含量都隨著年齡的增長而下降[13-14]。由于輔酶Q10在體內作用的廣泛性，認為它的下降與老化及許多退化性和(或)慢性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關。輔酶Q10參與ATP在線粒體內的生物合成，在氧化代謝中起著不可或缺的作用。此外，其還原形式有抗脂質過氧化作用[13-14]。輔酶Q10能保護細胞膜磷脂脂質過氧化，保護線粒體膜蛋白質和DNA免受氧化損傷[13]。已發(fā)現血漿中的輔酶Q10水平隨著年齡的增長而下降。輔酶Q10的保護作用機制尚不清楚。在本研究中，我們試圖研究輔酶Q10是否可以在體內和體外保護氧化損傷的RGC和高眼壓的視網膜組織。

本研究探討了輔酶Q10對H2O2誘導的體外培養(yǎng)的人RGC氧化損傷的保護作用。H2O2是最常用的氧化劑之一，并且在青光眼患者前房水以及玻璃體液中均能檢出。作為RGC的氧化損傷誘導劑，H2O2在體外

圖7. 上丘逆行標記熒光金顯示CoQ10可以延緩青光眼模型RGC死亡 分別在視網膜的不同部位選取RGC進行拍照計數，經統(tǒng)計顯示輔酶Q10可以延緩高眼壓所致的RGC死亡

圖8. Western印跡法檢測高眼壓模型視網膜中caspase3，cytochrome c，BAX及BCL2蛋白表達 圖A、B、C、D分別顯示Western印跡法檢測caspase3，cytochrome c，BAX及BCL2蛋白的條帶及統(tǒng)計分析柱狀。與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學意義(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)

能誘導 ROS 產生和細胞凋亡，因此被廣泛用于各種急性和(或)慢性氧化損傷模型[14]。我們的研究結果顯示了H2O2對RGC樣細胞(RGC-5細胞系)具有氧化損傷的作用，并呈現時間依賴性。隨著時間的延長，其損傷逐漸加深。雖然RGC-5細胞系并非真正的人RGC，但是在我們的前期觀察中發(fā)現，RGC-5細胞株可以表達神經細胞特異的Thy1.1標記，因此具有一定的研究意義。在我們的實驗中，通過分子生物學手段證實了輔酶Q10可以抑制H2O2對RGC造成的損傷，其可能的機制是通過抑制細胞的氧化損傷，抑制凋亡相關因子如caspase-3、cyto-c、BAX等，同時上調凋亡抑制因子BCL-2而起作用的。同時，為了進一步驗證我們的體外結果，我們在高眼壓動物模型上也進行了驗證。而在Wistar動物模型中的結果與體外結果一致，更進一步證實了該結果的可靠性。

以往關于輔酶Q10在眼科的應用及相關的基礎研究很少。我們的研究結果提示，輔酶Q10在體外有抗氧化損傷、保護RGC樣細胞的作用，在體內可以通過抗凋亡作用，保護高眼壓模型視網膜免受損傷，因此提示輔酶Q10可能成為一種有前景的青光眼神經保護治療藥物之一。雖然本實驗中對于輔酶Q10在氧化損傷中的作用機制及高眼壓動物模型中的保護機制進行了一定的探索，但鑒于氧化損傷與線粒體代謝有著極為重要的關系，因此，還需要在下一步的實驗研究中對線粒體的形態(tài)、功能及呼吸鏈進行深入的研究與探索。

志謝：感謝溫州醫(yī)科大學基礎實驗平臺幫助構建動物模型，桑迪亞醫(yī)藥技術(上海)有限責任公司幫助完成有關細胞試驗及細胞檢測項目和動物模型構建成功后的組織檢測。

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(本文編輯 諸靜英)

Protective effect of coenzyme Q10 for retinal ganglion cells and glaucoma against oxidative stress injury

WANGHong，ZHOUGuo-yi，LINZhou-qiao，LINDan-dan.

DepartmentofOphthalmology,People’sHospitalofLeqinginZhejiangProvince,Leqing325600,China

WANG Hong, Email: wg_2009@126.com

Objective To investigate the protective effect of coenzyme Q10 (CoQ10) for retinal ganglion cells (RGC) and glaucoma against oxidative stress injury, and to analyze its potential mechanisms. Methods The RGC line was used for theinvitrostudies. RGCs were pretreated with 10, 1, 0.1μmol/L CoQ10 for 1 h, and sustained oxidative stress was induced by subjecting RGCs to 200 μmol/L hydrogen peroxide (H2O2) for 24 h. CCK-8 assay was used to determine cell viability. Changes of intracellular reactive oxygen species (ROS) and apoptosis were analyzed by DCFG-DA and flow cytometry. Three episcleral veins were cauterized to induce high intraocular pressure (IOP) in Wistar rats and the IOP was measured by Tonopen. The rats were fed with CoQ10 every day. Surviving RGCs were quantified. Activation of caspase3, cytochrome c, BAX and BCL2 was quantified by Western blotting in RGCs bothinvitroandinvivo. Results Theinvitrostudy showed that when RGCs were pretreated with CoQ10, the cell viability increased; while the intracellular ROS and apoptosis significantly decreased. In theinvivostudy, chronic mild IOP elevation was induced for 4 weeks. In the CoQ10-treated rats, CoQ10 protected the RGCs from death. In both H2O2-treated RGCs and RGCs in the glaucoma model, caspase3, cytochrome c and BAX were down-regulated and BCL2 was up-regulated in CoQ10 treated groups. Conclusions CoQ10 was shown to have protective effect for RGC cells and glaucoma against oxidative stress damage. The protective effect may be associated with the down-regulation of pro-apoptotic proteins. (Chin J Ophthalmol and Otorhinolaryngol,2014,14:165-171,176)

Coenzyme Q10; Oxidative stress injury; Retinal ganglion cell; Glaucoma

浙江省樂清市人民醫(yī)院眼科 樂清 325600

王洪(Email:wg_2009@126.com)

2013-11-07)