張 健，吳 建

(第二軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院，上海 200003)

鼻咽癌是中國東南部和東南亞地區(qū)常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和遠處轉(zhuǎn)移率都較高，嚴重威脅人類健康。microRNAs是動植物體內(nèi)的一種小分子的單鏈RNA，在生物活動調(diào)控中有重要作用。近來發(fā)現(xiàn)microRNAs與人類的鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系，是一大研究熱點。本文將近幾年來microRNAs與鼻咽癌的相關(guān)研究進展作一綜述。

microRNAs于1993年第一次被發(fā)現(xiàn)［1］，之后其家族迅速壯大，目前已發(fā)現(xiàn)超過1 000種。microRNAs為長度約21～30 nt的單鏈小RNA分子，高度保守，屬于內(nèi)源性非編碼RNA，存在于迄今為止幾乎所有的動植物體內(nèi)［2］，在生物體內(nèi)能發(fā)揮一系列調(diào)控作用。鼻咽癌是一種頭頸部上皮來源的惡性腫瘤，具有高度的侵襲性和轉(zhuǎn)移性，好發(fā)于中國東南部和東南亞地區(qū)。越來越多的研究證實，microRNAs與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展和生化、侵襲、轉(zhuǎn)移、治療有密切的關(guān)系。

1 microRNAs的生物學特點

microRNAs是由其編碼基因轉(zhuǎn)錄的。編碼基因首先轉(zhuǎn)錄出初始 microRNAs，然后被加工為前提microRNAs，再通過核糖核酸酶的剪切作用加工為成熟的microRNAs。在 RNA誘導沉默復合物(RNA induced silencing complex，PDSC)的引導下與靶mRNA的5端非編碼區(qū)(UTR)配對，降解靶mRNA或抑制其轉(zhuǎn)錄，在基因轉(zhuǎn)錄后水平負向調(diào)節(jié)蛋白合成，進而調(diào)節(jié)生物的功能。主要有2種方式:①microRNA與UTR的不完全互補配對，抑制翻譯過程;②microRNA與UTR的完全互補配對，則將靶mRNA降解。通過這2種方式，microRNAs來調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化、凋亡等生物學過程［3］。

2 microRNAs與鼻咽癌

基因芯片微陣列檢測技術(shù)在microRNAs的研究中被廣泛應用。多個研究運用這種技術(shù)對鼻咽癌細胞和非鼻咽癌患者黏膜上皮細胞進行檢測［4－7］，或者對鼻咽癌不同細胞系進行檢測［8－11］，或者對不同分期的鼻咽癌標本進行檢測［12］，發(fā)現(xiàn)了多種差異表達的microRNAs。這些差異表達的基因，可能與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系。

2.1 microRNAs與鼻咽癌細胞的產(chǎn)生和增殖

2.1.1 促進生長，抑制凋亡 近來發(fā)現(xiàn)，miR－421可以通過下調(diào)FOXO4的表達來促進癌細胞的增生并抑制其凋亡［13］，miR －214、miR －18a、miR －663 則通過各種機理促進腫瘤的發(fā)生［14－16］，BART是由 EB病毒編碼的微 RNA。Lei等［17］研究發(fā)現(xiàn)，miR－BART3在鼻咽癌細胞中大量表達，并闡明其機理為通過抑制腫瘤抑制因子DICEI來發(fā)揮其促癌作用。

2.1.2 抑制生長，促進凋亡 陳景亮等［18］發(fā)現(xiàn)外源過表達hsa－miR－136能明顯抑制鼻咽癌細胞5～8f的增殖;同時流式細胞技術(shù)檢測顯示hsa－miR－136能誘導5～8f細胞發(fā)生晚期凋亡。通過構(gòu)建靶向特定基因的質(zhì)粒并移植到宿主細胞抑制癌細胞的生長。然而僅僅知道有抑制作用是不夠的，還必須知道抑制作用的靶點是什么。蔡鑫章等通過構(gòu)建靶向hTERT［19］和VEGF［20］的質(zhì)粒，結(jié)果表明均對癌細胞的生長有明顯的抑制作用。而另外的一些研究中也都明確了microRNA的作用靶點。miR－9是通過調(diào)節(jié)IFN誘導的基因和 MHCⅠ分子來發(fā)揮作用的［21］，Let－7a［22］和miR－26a［23］通過調(diào)節(jié)EZH2的表達發(fā)揮作用。miR－138 調(diào)節(jié) CCND1［24］，BART9 調(diào)節(jié) LMP1［25］，miR －1 調(diào)節(jié)前胸腺素 α［26］，miR － 216b 調(diào)節(jié) KRAS［27］，miR －218調(diào) 節(jié) SLIT －2 －ROBO1［28］，miR －200a調(diào) 節(jié)ZEB2［29－30］，Let－7 調(diào)節(jié) c － Myc［31］。上述所有作用靶點都有可能作為基因治療的突破口。

2.2 microRNAs與鼻咽癌的侵襲和轉(zhuǎn)移 惡性腫瘤一大重要特征是侵襲和轉(zhuǎn)移，也是腫瘤治療的難點之一。同樣，對于侵襲轉(zhuǎn)移而言，microRNAs有促進作用也有抑制作用。

2.2.1 促進轉(zhuǎn)移 淋巴轉(zhuǎn)移是腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑。敬敏等［32］通過 SYBRGreen實時定量 PCR方法發(fā)現(xiàn)miRNA－146a在鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達水平高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，可能促進鼻咽癌淋巴轉(zhuǎn)移。Ye等［33］在表達 EBV－miR－BART1的 CNE1細胞中發(fā)現(xiàn)了大量轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達，推測EBV－miRBART1可能促進了鼻咽癌的轉(zhuǎn)移。Luo等［34］發(fā)現(xiàn)miR－149可能通過調(diào)節(jié)上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進鼻咽癌轉(zhuǎn)移。miR－10b也具有促進腫瘤轉(zhuǎn)移的作用［35］。

2.2.2 抑制轉(zhuǎn)移 陳景亮等［18］研究報道hsa－miR－136不僅能明顯抑制鼻咽癌細胞5～8f的增殖，促進其凋亡，遷移實驗也顯示hsa－miR－136能明顯抑制5～8f細胞的遷移。Liu等［36］研究證實miR－29c能靶向TIAM1來抑制鼻咽癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。miR－200a不僅能抑制腫瘤細胞的生長，也能通過下調(diào)ZEB2和CTNNB1 來抑制其轉(zhuǎn)移［30］。

2.3 microRNAs與鼻咽癌的治療 鼻咽癌的治療目前有手術(shù)、放療、化療等，但是部分患者對射線和化療藥物的敏感性較低，治療效果不夠理想。而研究證實，某些microRNAs能影響鼻咽癌細胞對治療的敏感性。王旭丹等［37］對不同輻射抗拒的鼻咽癌細胞株CEN1和CEN2進行檢測，發(fā)現(xiàn)有部分差異表達的microRNAs，并推測某些microRNAs與鼻咽癌細胞的輻射抗拒有關(guān)。Zhang等［38］研究證實miR－29c能增強鼻咽癌細胞的放療敏感性和順鉑化療敏感性。Qu等［39］證實 miR－205能增強癌細胞對放療的抵抗。Chen等［40］研究發(fā)現(xiàn)，miR－7表達下調(diào)能增強癌細胞的放療敏感性。

另外，潘運寶等［41］用復方小柴胡湯治療鼻咽癌，治療后通過對比CNE1和CNE2中的miRNA發(fā)現(xiàn)有差異表達，推測復方小柴胡湯能通過調(diào)節(jié)某些miRNA的表達來抑制鼻咽癌細胞增殖。

2.4 microRNAs與鼻咽癌預后 某些microRNAs的表達水平與鼻咽癌患者的生存時間有密切關(guān)系。鄧敏等［4］研究鼻咽癌與 miR －218，通過 Kaplan－Meier生存分析發(fā)現(xiàn)，miR－218表達水平越高，患者生存時間越長。

3 結(jié) 論

microRNAs是一個龐大的家族，存在于幾乎所有的動植物體內(nèi)，這也就預示著microRNAs的功能十分廣泛，可能參與了生物體內(nèi)的多種調(diào)控。從基因芯片檢測結(jié)果來看，多種microRNAs存在差異性表達，而多個研究也證實其中某些基因與鼻咽癌的產(chǎn)生、細胞增殖、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、治療敏感性有密切的關(guān)系。這也就為我們對鼻咽癌患者進行個體化針對性治療找到了依據(jù)。但由于microRNAs的生物學分布及其功能廣泛，尚未發(fā)現(xiàn)某一種microRNAs只在鼻咽癌中特異性的差異表達，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有密切關(guān)系的microRNAs距離實際的臨床應用仍有一段距離。展望未來，microRNAs仍然是基因領(lǐng)域研究的熱點，microRNAs與鼻咽癌的研究前景十分廣闊，我們期待鼻咽癌從診斷到治療到預后能有一種特異性的microRNAs作為標準。

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