周云龍，廖志軍，鄧國(guó)孫，丁 罡

原發(fā)性肝癌是一種惡性程度高、早期浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移性強(qiáng)的腫瘤，為全球第5大常見惡性腫瘤，我國(guó)肝癌的死亡率居惡性腫瘤死亡率的第2位，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%。早期肝癌患者接受根治性治療，5年生存率高達(dá)70%。然而，70%左右的肝癌患者就診時(shí)已是中晚期，只能接受姑息性治療，嚴(yán)重影響其預(yù)后［1］。中晚期原發(fā)性肝癌病程發(fā)展快、預(yù)后差、死亡率高，因此，及時(shí)準(zhǔn)確的診斷和治療是提高生存率的關(guān)鍵。

本研究通過用化學(xué)發(fā)光方法檢測(cè)血清分離前AFP和分離后AFP-L3，計(jì)算AFP-L3在AFP中的含量比例，評(píng)價(jià)甲胎蛋白異質(zhì)體在原發(fā)性肝病早期篩查中的作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 采用回顧性分析在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院于2010年1月至2013年6月診斷原發(fā)性肝癌患者共58例，隨機(jī)抽取同期在本院診斷的慢性肝病患者58例作為對(duì)照。原發(fā)性肝癌58例，男45例，女13例;年齡36～84歲，平均61.2歲;慢性肝病患者58例，男42例，女16例;年齡25～79歲，平均59.2歲。所有原發(fā)性肝癌患者均經(jīng)細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)診斷確診;慢性肝病患者均經(jīng)臨床、B超或CT檢查確診。

1.2 方法 清晨空腹抽取靜脈血3～4 ml，以3 000 r/min離心10 min，分離血清置 -20℃冰箱貯存待檢。AFP-L3檢測(cè)試劑由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供。按照試劑說明書的要求，在柱內(nèi)預(yù)先裝有耦聯(lián)了小扁豆凝集素的瓊脂糖微量離心柱，加入待檢稀釋血清，可特異性地結(jié)合AFP-L3，經(jīng)離心清洗洗去不結(jié)合的甲胎蛋白，然后加入洗脫液，經(jīng)過離心后收集洗脫液中含有的AFP-L3，用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)分離前血清中甲胎蛋白和洗脫液中AFP-L3的含量，計(jì)算AFP-L3占AFP總量的百分比［2］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 21軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用F檢驗(yàn)，多因素非條件logistic回歸分析，2組間的比較采用U檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

原發(fā)性肝癌組及慢性肝病組患者AFP-L3測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 2組患者血清AFP-L3檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

全世界每年約有25萬(wàn)人新診斷為原發(fā)性肝癌。原發(fā)性肝癌發(fā)病之初較為隱匿，無(wú)特異臨床癥狀，早期診斷困難，大多數(shù)患者往往是中晚期就診后發(fā)現(xiàn)，失去良好的治療時(shí)機(jī)，近年隨著影像醫(yī)學(xué)的發(fā)展，一部分小肝癌患者得以及時(shí)發(fā)現(xiàn)，患者5年存活率有了一定的提高。因此，早期發(fā)現(xiàn)、定期檢測(cè)肝硬化轉(zhuǎn)為肝癌的預(yù)測(cè)指標(biāo)尤為重要。近年來(lái)肝癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，治療肝癌的關(guān)鍵是強(qiáng)調(diào)早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療。如何早期發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者，是提高患者的5年存活率的關(guān)鍵［6］。

目前的早期診斷篩查主要依據(jù)是B超檢查及甲胎蛋白測(cè)定的價(jià)值已經(jīng)得到了廣泛的認(rèn)可，以甲胎蛋白＞400 μg/L為判斷原發(fā)性肝癌的標(biāo)準(zhǔn)，雖特異度較高，但敏感度較低。大約只有32.9%的原發(fā)性肝癌患者甲胎蛋白水平高于上述標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)在病毒性肝炎和慢性肝臟疾病中，甲胎蛋白亦可見不同程度的升高，有假陽(yáng)性(如病毒性肝炎、肝硬化等)和20% ～30%的假陰性，從而造成診斷的漏診或誤診。

隨著醫(yī)學(xué)科技的進(jìn)步，近年研究發(fā)現(xiàn)，甲胎蛋白并非單一成分，其存在多種異質(zhì)體，根據(jù)與小扁豆凝集素(LCA)親合強(qiáng)弱程度不同將甲胎蛋白分為甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)、甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFPL2)、甲胎蛋白異質(zhì)體 3(AFP-L3)［2］;良性肝病時(shí)肝細(xì)胞壞死后再生性甲胎蛋白與惡性肝癌細(xì)胞產(chǎn)生的甲胎蛋白在糖鏈結(jié)構(gòu)上有差異，其中肝癌組織產(chǎn)生的特異性甲胎蛋白為甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)，甲胎蛋白異質(zhì)體 (AFP)主要存在于原發(fā)性肝癌患者血清中，對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷具有很高的特異性［3-5］。

近年國(guó)內(nèi)外研究表明，AFP-L3是肝癌高度特異性指標(biāo)，比單純檢查AFP能顯著提高準(zhǔn)確率，可以不受 AFP≥400 ng標(biāo)準(zhǔn)的限制［7］。有文獻(xiàn)報(bào)道［8］，AFP-L3陽(yáng)性預(yù)測(cè)肝癌發(fā)生的正確率高達(dá)94%，本研究也再次證實(shí)，如果檢測(cè)AFP-L3為陰性，就基本可以排除。本研究以AFP-L3(%)＞10%為陽(yáng)性判斷界限，原發(fā)性肝癌血清檢測(cè)的敏感性為敏感度94.9%、特異度96.49%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值96.5%、陽(yáng)性似然比27.03。因此，筆者認(rèn)為檢測(cè)血清中AFP-L3對(duì)篩查原發(fā)性肝癌患者具有一定的幫助;同時(shí)，在影像學(xué)檢查尚未發(fā)現(xiàn)肝癌的特征性占位性病變時(shí)，檢測(cè)AFP-L3可以作為預(yù)測(cè)早期肝癌篩查的指標(biāo)，值得推廣。

［1］丁惠國(guó).重視原發(fā)性肝癌的規(guī)范化篩查與監(jiān)測(cè)［J］.北京醫(yī)學(xué)，2013，35(6):409-411.

［2］曹立，孫華寶，敖琴芳，等.ROC曲線評(píng)價(jià)甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，28(5):465-467.

［3］韓風(fēng)，邱大鵬，陳偉瑜，等.AFP-L3含量測(cè)定在肝癌診治中的意義［J］. 山東醫(yī)藥，2010，50(24):5.

［4］Yamamoto K，Imamura H，Matsuyama Y，et al.AFP，AFP-L3，DCP，and GP73 as markers for monitoring treatment response and recurrence and as surrogate markers of clinicopathologicalvariables of HCC［J］.J Gastroenterol，2010，45(12):1272-1282.

［5］孔祥亙，韓紹磊，鄭昭敏，等.高爾基體蛋白73聯(lián)合甲胎蛋白異質(zhì)體在原發(fā)性肝癌診斷中的價(jià)值［J］.山東大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2011，49(4):110.

［6］賈志凌，王莉，劉暢，等.甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)肝癌診斷的臨床意義［J］.中國(guó)腫瘤，2010，19(10):686-688.

［7］王利健，駱劍明，吳榮輝，等.甲胎蛋白異質(zhì)體在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22(11):2673-2677.

［8］龔玉華，王捷婷，高玉鳳，等.甲胎蛋白異質(zhì)體測(cè)定對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的作用［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2010，36(2):180-181.