沈存思，范方田，陶 麗，陳文顯，2，王愛云，2，陸 茵，2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;2.江蘇省中藥藥效與安全性評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇南京 210023)

1997年由三個(gè)研究小組分別從10q23.3上定位克隆了同一種抑癌基因，并從各自角度給予了命名，稱為抑癌基因PTEN，另外也叫MMACI或TEP1。該基因自發(fā)現(xiàn)起就一直在腫瘤治療研究中受到重視和關(guān)注，如今已發(fā)現(xiàn)PTEN在腫瘤增殖，侵襲，遷移過(guò)程中發(fā)揮極其重要的作用。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外愈來(lái)愈多的研究發(fā)現(xiàn)PTEN與腫瘤血管生成的關(guān)系十分密切，它可以通過(guò)激活PI3K信號(hào)通路，調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子1(HIF1)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)等，起到抑制腫瘤血管生成的作用。本文就近年來(lái)關(guān)于抑癌基因PTEN在腫瘤血管生成中的作用及其分子調(diào)節(jié)信號(hào)通路進(jìn)行的概述，期望對(duì)腫瘤血管抑制劑的研發(fā)及腫瘤血管生成機(jī)制的研究提供參考。

1 PTEN突變或缺失可引起腫瘤發(fā)生和發(fā)展

PTEN抑癌基因是雙特異蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成員，具有脂質(zhì)磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性［1］，PTEN被發(fā)現(xiàn)在多數(shù)惡性腫瘤中缺失，突變或者被抑制。它的突變首先影響了PTEN磷酸酶區(qū)域并且導(dǎo)致許多疾病，如小腦發(fā)育不良性節(jié)細(xì)胞瘤，BRR綜合征，并增加了乳腺，甲狀腺，子宮等器官癌變發(fā)生［2］。隨著相關(guān)研究的不斷深入，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)PTEN突變可以促進(jìn)腫瘤血管生成導(dǎo)致腫瘤的發(fā)展。

2 抑癌基因PTEN調(diào)控腫瘤血管生成途徑促腫瘤的發(fā)展

PTEN的表達(dá)主要受miRNA(如miR-21)，磷酸化，乙?；?，泛素化等轉(zhuǎn)錄后調(diào)控［3］。大量的研究表明，PTEN基因的缺失在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了重要的作用，而它對(duì)腫瘤的血管生成過(guò)程可以通過(guò)影響磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/絲-蘇氨酸激酶(AKT)信號(hào)途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)［4－5］，主要過(guò)程是:PTEN通過(guò)其脂質(zhì)磷酸酶活性，可逆轉(zhuǎn)PI3K的磷酸化作用，將磷脂酰肌醇-3磷酸(PIP3)的磷酸基團(tuán)移除，使之還原成磷脂酰肌醇-2磷酸(PIP2)，維持胞內(nèi)低PIP3水平。到目前已有大量的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道了PTEN對(duì)腫瘤血管生成過(guò)程部分關(guān)鍵信號(hào)都有調(diào)控作用，下面分別進(jìn)行闡述。

2.1 PTEN與HIF1信號(hào)的關(guān)系 HIF1與腫瘤血管生成密切相關(guān)，腫瘤的發(fā)展開始被限制在1～2 mm3是由于供氧，供能不足，腫瘤在低氧狀態(tài)下會(huì)優(yōu)先首先觸發(fā)血管生成機(jī)制HIF1信號(hào)通路，它是血管生成信號(hào)途徑的關(guān)鍵性的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子［6］。在研究中發(fā)現(xiàn)PTEN在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中有抑制HIF1的穩(wěn)定以及它的轉(zhuǎn)錄因子活性。此外，一些研究報(bào)道在腎透明細(xì)胞癌中，HIF1通路中2個(gè)重要的調(diào)控者VHL和PTEN基因都會(huì)有相伴性的丟失［7－8］。另外又有研究證明了在卵巢腫瘤細(xì)胞中PTEN表達(dá)上調(diào)會(huì)導(dǎo)致HIF1α，VEGF，和增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)的下調(diào)［9］。胃癌的微陣列芯片分析實(shí)驗(yàn)顯示PTEN的表達(dá)與VEGF以及MMPs的表達(dá)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)［10］，在一些胰腺癌中，miR-21對(duì)于提高VEGF和MMPs的表達(dá)也有著重要作用，而這些影響通過(guò)PI3K抑制劑治療有可能被消除［11］。更廣泛的細(xì)胞系(如PC-3，HepG2等細(xì)胞)進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)［12－13］也得到了類似的結(jié)果，綜合上述實(shí)驗(yàn)提示，PTEN影響腫瘤血管生成的機(jī)制之一有可能是通過(guò)調(diào)控PI3K通路影響來(lái)HIF1信號(hào)進(jìn)而調(diào)控VEGF的表達(dá)，基于這一點(diǎn)，基于HIF1信號(hào)途徑為靶點(diǎn)的腫瘤血管生成的藥物研究應(yīng)考慮對(duì)PTEN的調(diào)控。

2.2 PTEN對(duì)血管生成中Ang/Tie2體系的影響 Ang/Tie2(促血管生成素/血管緊張素2)體系在腫瘤血管生成也起到了重要的作用。該途徑主要作用機(jī)制:VEGF會(huì)引起血管的出芽生長(zhǎng)，但此時(shí)血管腔不完整，通透性高，缺少周細(xì)胞等。Ang1的表達(dá)增高后，能夠募集周細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等使血管穩(wěn)定。Ang2則起到雙重作用，既可阻斷Ang1的血管穩(wěn)定作用，導(dǎo)致血管床退化，血管外基質(zhì)降解。還可促進(jìn)血管新生，其機(jī)制可能是Ang2結(jié)合Tie2，抑制Ang1的活性，誘導(dǎo)血管旁細(xì)胞從內(nèi)皮細(xì)胞上分離，增加內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。Ang2的活化導(dǎo)致腫瘤血管數(shù)量的大規(guī)模減少和血管直徑增大。血管的減少導(dǎo)致缺氧，進(jìn)而上調(diào)腫瘤細(xì)胞 VEGF的表達(dá)，導(dǎo)致腫瘤的周圍明顯的血管生成［14］。另外也有研究報(bào)道VEGF被抑制后，Ang1/tie2有利于腫瘤的生長(zhǎng)以及血管生存［15］。近年相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)Ang-1刺激Tie-2觸發(fā)了PI3K通路的激活［16］。初步揭示了Ang/Tie-2體系與PI3K通路的關(guān)聯(lián)性。另外，有相關(guān)研究報(bào)道稱脫落的Tie2受體能與Ang-1和Ang-2結(jié)合，從而抑制Tie2的磷酸化作用以及激活，而這一過(guò)程的調(diào)控是通過(guò)VEGF依賴性的PI3K通路激活來(lái)實(shí)現(xiàn)的，并證明 PTEN的過(guò)表達(dá)增加了 Tie-2的釋放［17］。該研究進(jìn)一步提示了是PTEN可能調(diào)控了Ang/Tie-2體系，進(jìn)而影響腫瘤血管生成，并且VEGF是該途徑的一個(gè)重要參與者。因此，以Ang/Tie靶向治療腫瘤血管生成的藥物也應(yīng)考慮到PTEN的影響因素。

2.3PTEN與鈉氫交換調(diào)控因子1(NHERF1)的關(guān)系 鈉氫交換調(diào)控因子1(NHERF1)是一種氨基酸組成的多功能連接蛋白，其分布位置與表達(dá)水平將決定其功能。當(dāng)其位于細(xì)胞膜上，可能表現(xiàn)為一個(gè)腫瘤抑制因子。當(dāng)其處于細(xì)胞質(zhì)中，可能成為致癌蛋白，其功能機(jī)制主要是通過(guò)調(diào)控血小板衍生因子(PDGF)、外向整流氯離子通道(ORCC)等信號(hào)通路等促進(jìn)腫瘤發(fā)生以及腫瘤血管生成［18］。PTEN定位在細(xì)胞內(nèi)部也是PTEN調(diào)控作用的一部分，因?yàn)樵诩?xì)胞膜上缺損PTEN的轉(zhuǎn)位會(huì)削弱它對(duì)PI3K的信號(hào)的控制［19－20］。另外一些研究發(fā)現(xiàn)鏈接蛋白NHERF1與細(xì)胞膜上PTEN轉(zhuǎn)位是有關(guān)聯(lián)的。它們也證實(shí)了缺損PTEN的轉(zhuǎn)位會(huì)導(dǎo)致持續(xù)的Akt激活。有研究發(fā)現(xiàn)NHERF1能夠引起一些受體酪氨酸激酶(RTK)間的相互作用，例如 PDGFR，EGFR［21］，它們都在腫瘤血管生成中發(fā)揮著重要作用，PTEN可能通過(guò)影響NHERF1的途徑干預(yù)腫瘤血管生成過(guò)程，另外有研究發(fā)現(xiàn)PTEN在細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)位不僅僅與RTK下游信號(hào)的調(diào)控有關(guān)，還與自身的表達(dá)調(diào)控相關(guān)［22］，可作為一個(gè)新的腫瘤血管生成研究切入點(diǎn)進(jìn)行深入探究。

2.4 PTEN對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC)的影響 血管內(nèi)皮細(xì)胞在腫瘤血管生成中起到起關(guān)鍵作用，腫瘤組織新生血管需要募集血管內(nèi)皮細(xì)胞，包括鄰近已有的內(nèi)皮細(xì)胞出芽，增殖和遷移經(jīng)過(guò)重塑形成的腫瘤血管，或者腫瘤細(xì)胞自身形變貼附血管壁發(fā)生血管生成擬態(tài)以及骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞整合到局部腫瘤血管分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞。PTEN對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的行為也具有調(diào)控作用。一些實(shí)驗(yàn)表明在大部分的細(xì)胞基質(zhì)和內(nèi)皮細(xì)胞中擾亂PTEN的表達(dá)，這樣能夠減少PTEN信號(hào)在內(nèi)皮細(xì)胞中PI3K的激活，并導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞增殖，生存以及遷移能力的增加，這些變化往往都是腫瘤血管生成重要因素及標(biāo)志［23］。此外最近有相關(guān)研究也顯示PTEN可能影響到內(nèi)皮細(xì)胞的周期［24］，進(jìn)而影響其分化增殖。該相關(guān)研究表明在腫瘤血管生成過(guò)程中，PTEN對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞在腫瘤血管生成中的行為的影響不僅是間接的，還有可能使是直接的作用。

2.5PTEN與內(nèi)皮一氧化氮合成酶(eNOS)、NO關(guān)系 近年的研究表明［25］，eNOS來(lái)源的NO參與了腫瘤新生血管的生成，有文獻(xiàn)報(bào)道eNOS在腫瘤組織中有廣泛的表達(dá)。并通過(guò)生成NO來(lái)調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的狀態(tài)以及骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)的動(dòng)員和歸巢［26］。NO在血管生成中也促成了脈管膨脹。又有人通過(guò)eNOS的基因敲除或抑制其活性，抑制了外周血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的歸巢以及腫瘤新生血管的生成［27］，也再次驗(yàn)證了氧化產(chǎn)物在腫瘤血管生成中的重要性。有文獻(xiàn)報(bào)道了在腫瘤細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞中，PTEN都參與了eNOS的調(diào)控，另外又有證明VEGF誘導(dǎo)的內(nèi)皮NO產(chǎn)物能維持急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)，并且發(fā)生機(jī)制涉及到 PI3K通路［28］。上述研究揭示了癌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中PTEN與內(nèi)皮含氮氧化物合酶調(diào)控是相關(guān)的，并且影響到了腫瘤血管生成，進(jìn)一步的作用機(jī)制有待探究。

Fig 1 PTEN participates in regulation of tumor angiogenesis

3 PTEN與腫瘤的抗血管生成治療

綜上所述，PTEN與多種影響腫瘤血管生成的因素相關(guān)，盡管PI3K途徑被認(rèn)為在腫瘤血管生成中是一個(gè)重要的信號(hào)調(diào)控節(jié)點(diǎn)，而PTEN對(duì)PI3K的信號(hào)又起到了重要的調(diào)控因素，從而與PI3K具有同等調(diào)控腫瘤血管生成的作用，也被視為調(diào)控腫瘤血管生成的一個(gè)關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。目前，臨床上針對(duì)腫瘤血管生成的治療主要集中在對(duì)抗VEGF，EGF等信號(hào)的過(guò)度活化，例如單克隆抗體針對(duì)VEGF-A如貝伐單抗，VEGFR的絡(luò)氨酸酶抑制劑如索拉菲尼。然而長(zhǎng)期治療會(huì)出現(xiàn)腫瘤耐藥的問(wèn)題。這些耐藥性機(jī)制通常與VEGF，bFGF或EGF誘導(dǎo)HIF-1和PI3K信號(hào)通路相關(guān)［29－30］。值得注意的是臨床研究證實(shí)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗抗EGFR治療的效果與PTEN相關(guān)，并且抗EGFR治療效果與PTEN表達(dá)量呈正相關(guān)。這為EGFR耐藥的問(wèn)題提供了新的思路［31－32］。與此同時(shí)，臨床研究還發(fā)現(xiàn)MMPs的過(guò)表達(dá)是耐藥的又一機(jī)制，而PTEN和MMPs表達(dá)也呈負(fù)相關(guān)，因此此類抗TKI的耐藥也可能通過(guò)上調(diào)PTEN解決。目前抗酪氨酸激酶抑制劑(TKI)耐藥的研究熱點(diǎn)主要集中在PI3K，AKT和mTOR抑制劑，但均處于臨床試驗(yàn)階段［33－34］。但是目前為止沒(méi)有發(fā)現(xiàn)PTEN的誘導(dǎo)劑進(jìn)入臨床試驗(yàn)研究，慶幸的是針對(duì)PTEN的基因治療已處實(shí)驗(yàn)階段，有報(bào)道野生型PTEN轉(zhuǎn)染到人類前列腺癌細(xì)胞，可以減少腫瘤血管生成［35］。雖然這項(xiàng)工作是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，卻能為抗TKI耐藥帶來(lái)希望。

4 結(jié)語(yǔ)與展望

腫瘤血管生成是在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵因素?？鼓[瘤血管生成是目前抗腫瘤治療其中一個(gè)重要的有效的手段。抑癌基因PTEN自發(fā)現(xiàn)以來(lái)一直作為抗腫瘤研究中一個(gè)重要的研究對(duì)象，隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)PTEN與腫瘤關(guān)系研究的不斷深入，逐步發(fā)現(xiàn)了PTEN與腫瘤血管生成機(jī)制中關(guān)鍵因素HIF1﹑VEGF﹑Ang/Tie-2體系﹑NHERF1、EC以及eNOS等都有著密切聯(lián)系，從而綜合調(diào)控影響了腫瘤血管的新生，但是目前的研究也存在一些問(wèn)題，PTEN調(diào)控因素較多，被影響的這些分子信號(hào)相互關(guān)系網(wǎng)絡(luò)復(fù)雜，它們是否具有更深層次的關(guān)聯(lián)性尚不十分明確，有待更深入研究。本文通過(guò)對(duì)于近年來(lái)PTEN與腫瘤血管生成關(guān)系較全面的綜述，PTEN很可能成為治療靶點(diǎn)，應(yīng)用于研究腫瘤抗血管生成機(jī)制以及抗腫瘤血管生成相關(guān)藥物的研發(fā)中，為癌癥的治療提供一個(gè)新的可行途徑。

［1］劉倫華，樓麗廣.PTEN功能調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2005，21(7):778－81.

［1］Liu L H，Lou L G.Recent advance in the regulation of PTEN’s function［J］.Chin Pharmacol Bull，2005，21(7):778－81.

［2］Wang X，Jiang X.Post-translational regulation of PTEN［J］.Oncogene，2008，27(41):5454－63.

［3］Meng F，Henson R.Wehbe-Janek H.MicroRNA-21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene in human hepatocellular cancer［J］.Gastroenterol，2007，133(2):647－58.

［4］許成芳，李小毛，李 田，等.紫杉醇對(duì)PTEN不同狀態(tài)的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株的作用及其機(jī)制探討［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2011，27(11):1528－32.

［4］Xu C F，Li X M，Li T，et al.The effect of taxol on endometrial cancer cells with different PTEN status［J］.Chin Pharmacol Bull，2011，27(11):1528－32

［5］Maehama T，Taylor G S.Dixon J E.PTEN and myotubularin:novel phosphoinositide phosphatases［J］.Annual Review of Biochemistry，2001，70:247－79 .

［6］Sonveaux P，Copetti T，De Saedeleer C J，et al.Targeting the lactate transporter MCT1 in endothelial cells inhibits lactate-induced HIF-1 activation and tumor angiogenesis［J］.PLoS One，2012，7(3):e33418.

［7］Von Teichman A，Comperat E，Behnke S，et al.VHL mutations and dysregulation of pVHL-and PTEN-controlled pathways in multilocular cystic renal cell carcinoma［J］.Modern Pathol，2010，24(4):571－8.

［8］Frew I J，Thoma C R，Georgiev S，et al.pVHL and PTEN tumour suppressor proteins cooperatively suppress kidney cyst formation［J］.EMBO J，2008，27(12):1747－57.

［9］Takei Y，Saga Y，Mizukami H，et al.Overexpression of PTEN in ovarian cancer cells suppresses i.p.dissemination and extends survival in mice［J］.Mol Cancer Ther，2008，7(3):704－ 11.

［10］Zheng H，Takahashi H，Murai Y，et al.Expressions of MMP-2，MMP-9 and VEGF are closely linked to growth，invasion，metastasis and angiogenesis of gastric carcinoma［J］.Anti Res，2007，26(5):3579－83.

［11］Sekuklu S D，Donoghue T A，Spillane C.miR-21 as a key regulator of oncogenic processes［J］.Biochemical Society Transactions，2009，37(4):918－25.

［12］Fang J，Ding M，Yang L，et al.PI3K/PTEN/AKT signaling regulates prostate tumor angiogenesis［J］.Cellular Signalling，2007，19(12):2487－97.

［13］Tian T，Nan K J，S.Wang S H，et al.PTEN regulates angiogenesis and VEGF expression through phosphatasedependent and-independent mechanisms in HepG2 cells［J］.Carcinogenesis，2010，31(7):1211－9.

［14］Wu X，Liu N.The role of Ang/Tie signaling in lymphangiogenesis［J］.Lymphol，2010，43(2):59－72.

［15］Huang J，Bae J，Tsai J P.Angiopoietin-1/tie-2 activation contributes to cascular survival and tumor growth during VEGF blockade［J］.Int J Oncol，2009，34(1):79－87.

［16］DeBusk L M，Hallahan D E，Lin P C.Akt is a major angiogenic mediator downstream of the Ang1/Tie2 signaling pathway［J］.Exp Cell Res，2004，298(1):167－77.

［17］Findley C M，Cudmore M J，Ahmed A，et al.VEGF induces Tie2 shedding via a phosphoinositide 3-kinase/Akt-dependent pathway to modulate Tie2 signaling［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2007，27(12):2619－26.

［18］Theisen C S，Wahl J K 3rd，Johnson K R，et al.NHERF lnks the N-Cadherin/Catenin complex to the platelet-derived growth factor receptor to modulate the actin cytoskeleton and regulate cell motility［J］.Mol Biol Cell，2007，18(4):1220－32.

［19］Vazquez F，Devreotes P.Regulation of PTEN function as a PIP3 gatekeeper through membrane interaction［J］.Cell Cycle，2007，5(14):1523－7.

［20］Molina J R，Morales F C，Hayashi Y，et al.Loss of PTEN binding adapter protein NHERF1 from plasma membrane in glioblastoma contributes to PTEN inactivation［J］.Cancer Res，2010，70(17):6697－703.

［21］Takahashi Y，Morales F C，Kreimann E L，et al.PTEN tumor suppressor associates with NHERF proteins to attenuate PDGF receptor signaling［J］.EMBO J，2007，25(4):910 –920.

［22］Vivanco I，Rohle D，Versele M，et al.The phosphatase and tensin homolog regulates epidermal growth factor receptor(EGFR)inhibitor response by targeting EGFR for degradation［J］.Proc National Acad Sci United States Am，2010，107(14):6459－64.

［23］Trimboli A J，Cantemir-Stone C J，Li F，et al.Pten in stromal broblasts suppresses mammary epithelial tumours［J］.Nature，2009，461(7267):1084－91.

［24］Tarnawski A S，Pai R，Tanigawa T，et al.PTEN silencing reverses aging-related impairment of angiogenesis in microvascular endothelial cells［J］.Biochem Biophys Res Commun，2010，394(2):291－6.

［25］Fukumura D，Kashiwagi S，Jain R K.The role of nitric oxde in tumor progression［J］.Nat Rev Cancer，2006，6(6):521－34.

［26］Beleslin-Cokic B B，Cokic V P，Yu X，et al.Erythropoietin and hypoxia stimulate erythropoietin receptor and nitric oxide production by endothelial cells［J］.Blood，2004，104(7):2073－80.

［27］Lim K H，Ancrile B B，Kashatus D F，et al.Tumor maintenance is mediated by eNOS［J］.Natue，2008，452(7187):646－9.

［28］Church J E，Qian J，Kumar S，et al.Inhibition of endothelial nitric oxide synthase by the lipid phosphatase PTEN［J］.Vascular Pharmacol，2010，525(6):191－8.

［29］Alessi P，Leali D，Camozzi M，et al.Anti-FGF2 approaches as a strategy to compensate resistance to anti-VEGF therapy:long-pentraxin3 as a novel antiangiogenic FGF2-antagonist［J］.European Cytokine Network，2009，20(4):225－34.

［30］Shi Y H，Bingle L，Gong L H，et al.Basic FGF augments hypoxia induced HIF-1-alpha expression and VEGF release in T47D breast cancer cells［J］.Pathol，2007，39(4):396－400.

［31］Martinelli E，Troiani T，Morgillo F，et al.Synergistic anti-tumor activity of sorafenib in combination with epidermal growth factor receptor inhibitors in colorectal and lung cancer cells［J］.Clin Cancer Res，2010，16(20):4990－5001.

［32］Cohen E E，Davis D W，Karrison T G，et al.Erlotinib and bevacizumab in patients with recurrent or metastatic squamous-cell carcinoma of the head and neck:a phase Ⅰ/Ⅱ study［J］.The Lancet Oncol，2009，10(3):247－57.

［33］Engelman J A.Targeting PI3K signalling in cancer:opportunities，challenges and limitations［J］.Nature Rev Cancer，2009，9(8):550－62.

［34］Marone R，Cmiljanovic V，Giese B，et al.Targeting phosphoinositide 3-kinase—moving towardstherapy［J］.Biochim Biophys Acta，2008，1784(1):159－85.

［35］Anai S，Goodison S，Shiverick K，et al.Combination of PTEN gene therapy and radiation inhibits the growth of human prostate cancer xenografts［J］.Human Gene Therapy，2006，17(10):975－84.