海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 劉圈煒 譚樹義
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所 孫 哲 張宏福*
中國疾病控制中心營養(yǎng)與食品安全所 楊曉光
蘇云金芽胞桿菌(Bt)是一種廣泛應(yīng)用的殺蟲微生物,其具有殺蟲效果好、安全、高效等優(yōu)點(Crook和 Jarrett,1991)。 隨著植物細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展,利用生物基因工程技術(shù)將外源抗蟲基因Bt導(dǎo)入玉米,使玉米自身產(chǎn)生抗蟲蛋白而達到抗蟲的目的。轉(zhuǎn)Bt玉米已經(jīng)在全世界范圍內(nèi)廣泛種植(James,2010)。 目前,有關(guān)轉(zhuǎn) Bt玉米對生長期五指山豬血液生理生化指標(biāo)影響的研究鮮見報道。為此,本試驗以五指山豬為研究對象,旨在研究轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬血清生化指標(biāo)及相關(guān)酶含量的影響,評價其對生長期五指山豬的安全性。
1.1 試驗動物與分組 選取72頭初始體重(9.80±0.41)kg、2月齡的健康斷奶五指山豬,隨機分到2個處理組中,分別飼喂含Bt玉米與非轉(zhuǎn)基因玉米的日糧。每組設(shè)6個重復(fù),每個重復(fù)6頭,公、母各半,分圈飼養(yǎng)。預(yù)飼期7 d,統(tǒng)一進行健胃、驅(qū)蟲、疫病防治、分組、編號。根據(jù)體重和采食量進行適當(dāng)調(diào)整,使組間差異不顯著。正式期68 d。
1.2 試驗飼糧組成與營養(yǎng)水平 采用常規(guī)玉米-豆粕型日糧,參考我國《豬飼養(yǎng)標(biāo)準》(NY/T 65-2004)中肉脂型生長肥育豬營養(yǎng)需要推薦量配制(二型標(biāo)準)(李德發(fā)等,2004)。日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平
1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)管理按正常飼養(yǎng)管理規(guī)程進行,專人飼養(yǎng),飼喂時間和管理條件相同,每日飼喂2次,定時定量,供給充足、清潔的飲水。
1.4 測試指標(biāo) 于試驗第68天上午08∶00,每重復(fù)選1頭豬,前腔靜脈抽取10 mL血液,4000 r/min離心15 min(4℃),分離血清,-20℃冰箱保存,用于測定血清生化指標(biāo)及相關(guān)酶含量。其中,血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶含量均采用試劑盒法,購于南京建成生物工程研究所。
1.5 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準差”表示。采用SAS 8.20統(tǒng)計軟件中GLM程序進行數(shù)據(jù)分析,差異顯著者進行Duncan’s多重比較。
2.1 轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬血清生化指標(biāo)的影響 從表2可知,試驗組血清總蛋白、球蛋白、葡萄糖、尿素氮和甘油三酯水平有所下降,而白蛋白和總膽固醇含量有所增加,但兩組間差異均不顯著(P > 0.05)。
2.2 轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬血清相關(guān)酶含量的影響 由表3可知,與對照組相比,試驗組谷草轉(zhuǎn)氨酶有所下降,而谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶含量有所升高,但均未達到顯著差異的水平(P>0.05)。
表2 轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬血清生化指標(biāo)的影響
表3 轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬血清酶含量的影響U/L
動物機體的代謝過程是一種連續(xù)變化的動態(tài)過程,當(dāng)機體代謝減弱或加強,甚至發(fā)生代謝障礙時,機體代謝就會產(chǎn)生相應(yīng)的改變,通常首先通過血液中某些生理生化指標(biāo)的變化反映出來。血清總蛋白是多種蛋白質(zhì)的混合物,參與機體免疫等生理功能,并可一定程度上反映機體的蛋白質(zhì)代謝狀況。血清尿素氮能反映機體氨基酸代謝和利用的狀況(Eggum,1970)。血清尿素氮含量下降,表明機體的蛋白合成增強或蛋白分解減少(Brown 和 Clinc,1974)。 Buzoianu 等(2012)試驗表明,轉(zhuǎn)Bt玉米對雜種豬(大白×長白)生長期血清總蛋白和尿素氮含量未產(chǎn)生明顯影響。本研究也發(fā)現(xiàn),生長期五指山豬血清總蛋白、白蛋白及球蛋白含量均受轉(zhuǎn)Bt玉米的影響不大,提示轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬蛋白質(zhì)的代謝未產(chǎn)生不利影響。正常情況下,血清葡萄糖含量變化是機體對糖吸收、轉(zhuǎn)運和代謝動態(tài)平衡狀態(tài)的反映(李冬梅等,2007)。血清總膽固醇含量反映了體內(nèi)脂質(zhì)代謝的狀況。血清總膽固醇含量異常的上升往往引起腎臟、心血管和腦血管方面的疾病。本研究表明,生長期五指山豬血清葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇水平變化不明顯,提示轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬糖類和脂肪的代謝沒有產(chǎn)生負面影響。
谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于動物線粒體中的重要的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶,其活性變化也是反映肝細胞和心肌細胞受損傷的主要敏感指標(biāo)。正常情況下,血清中轉(zhuǎn)氨酶的活性很低,當(dāng)心臟和肝臟組織細胞受損或在天氣驟變、熱冷應(yīng)激狀態(tài)下,會有大量的轉(zhuǎn)氨酶進入血清,于是血清中轉(zhuǎn)氨酶的活性升高(段銘等,2003)。堿性磷酸酶是生物體內(nèi)的一種重要的代謝調(diào)控酶,其功能是加速物質(zhì)的攝取和轉(zhuǎn)運,為二磷酸腺苷轉(zhuǎn)化為三磷酸腺苷提供更多所需的無機磷酸 (周定剛等,1993)。本試驗表明,生長期五指山豬血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶含量變化也不明顯,這與Rehout等(2009)在雞上的研究結(jié)果一致。提示轉(zhuǎn)Bt玉米對動物機體營養(yǎng)物質(zhì)的代謝與合成未造成不良影響。
本試驗條件下,轉(zhuǎn)Bt玉米對生長期五指山豬的血清生化指標(biāo)及相關(guān)酶含量未產(chǎn)生不良的影響。
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